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亲和膜配基的结构和密度对胆红素吸附的影响 被引量:14
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作者 鞠佳 聂飞 +1 位作者 段志军 贺高红 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期303-310,共8页
体内存在过量的胆红素会引起神经系统疾病,严重时危及生命,常用循环吸附法去除,但是多数胆红素与白蛋白形成复合物,难于拆分,导致血清胆红素的吸附去除率降低。以醋酸纤维素/聚乙烯基亚胺共混亲和膜(CA/PEI膜)为基质,通过戊二醛活化,引... 体内存在过量的胆红素会引起神经系统疾病,严重时危及生命,常用循环吸附法去除,但是多数胆红素与白蛋白形成复合物,难于拆分,导致血清胆红素的吸附去除率降低。以醋酸纤维素/聚乙烯基亚胺共混亲和膜(CA/PEI膜)为基质,通过戊二醛活化,引入间隔臂,固载具有一定特异性吸附的5种有机胺和8种氨基酸配基,强化血清胆红素的去除效果。研究结果表明,虽然改性膜的伯胺基含量仅为CA/PEI膜的1/3,但是因间隔臂的引入和配基特异性的增强,4种改性膜的胆红素吸附量提高了100%以上,并且提高了胆红素相对于蛋白的吸附选择性。增加胺基和疏水结构有利于胆红素的吸附;羧基不利于胆红素吸附;胆红素吸附还受到配基密度和空间位阻等诸多因素的影响。苯环等空间位阻较大的配基,不利于实际胆红素的吸附,且无法通过提高配基密度而提高其改性膜的胆红素吸附量,而含直链胺配基的己二胺(3-HMD)改性膜的胆红素吸附量随配基密度的提高而提高。 展开更多
关键词 胆红素 氨基酸 配基密度 空间位阻 亲和膜
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琼脂糖-DEAE离子交换介质的配基密度和孔径对BSA吸附的影响 被引量:13
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作者 卢慧丽 林东强 姚善泾 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第11期3164-3170,共7页
离子交换色谱是蛋白质分离纯化的有效方法之一,配基密度和介质孔径是影响蛋白质吸附的关键因素。采用3种不同琼脂糖浓度的凝胶为基质,具有不同的平均孔径,分别偶联上阴离子交换配基DEAE,通过调控反应条件,包括反应温度、反应时间、碱浓... 离子交换色谱是蛋白质分离纯化的有效方法之一,配基密度和介质孔径是影响蛋白质吸附的关键因素。采用3种不同琼脂糖浓度的凝胶为基质,具有不同的平均孔径,分别偶联上阴离子交换配基DEAE,通过调控反应条件,包括反应温度、反应时间、碱浓度和DEAE浓度,得到了不同配基密度和介质孔径的系列DEAE离子交换介质。考察了牛血清白蛋白(BSA)的静态和动态吸附性能,发现随配基密度增加或介质孔径减小,BSA饱和吸附容量有所增大;对于吸附动力学,介质孔径显著影响有效扩散系数。结果表明,配基密度和介质孔径共同决定了蛋白质的吸附性能,介质孔径主导蛋白质的孔内扩散,而配基密度则影响配基-蛋白质间的相互作用。 展开更多
关键词 离子交换色谱 配基密度 介质孔径 蛋白吸附
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Advancement in separation materials for blood purification therapy 被引量:5
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作者 Jia Ju Feixue Liang +6 位作者 Xiaoxin Zhang Ran Sun Xiaoguang Pan Xiaoyun Guan Guanning Cui Xuan He Mengyan Li 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2019年第6期1383-1390,共8页
Blood purification refers to the extra corporeal therapies of removing potentially toxic substances, in which blood is circulated through an adsorption system loading separation materials. High-efficient inexpensive s... Blood purification refers to the extra corporeal therapies of removing potentially toxic substances, in which blood is circulated through an adsorption system loading separation materials. High-efficient inexpensive separation materials are critical to success. In this review, separation materials such as polymers and nanomaterials are summarized and compared. Combining the advantages of the adsorptive membranes and nanomaterials, organic–inorganic hybrid/blend membranes have been developed explosively. These hybrid/blend membranes have both the characteristics of high permeability, easy fabrication, good biocompatibility of adsorptive membranes, and characteristics of fast adsorption rate and high adsorption capacity of nanomaterials. The preparation and modification methodology of the separation materials is reviewed. For affinity separation materials, the relationship of ligand chemistry, ligand density and pores of the matrix is discussed. This paper also summarizes some interesting applications in separation materials for removal of bilirubin, endotoxin, toxic metal ions, cytokine, etc. 展开更多
关键词 Blood purification Organic INORGANIC hybrid/blend membrane Albumin-bound TOXINS Preparation and modification ligand density
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乳腺生物反应器表达的重组人乳铁蛋白的分离纯化及生物活性鉴定 被引量:5
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作者 白倩 张焱 +5 位作者 汪音爵 罗坚 李岩 黄永东 马润宇 苏志国 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1576-1583,共8页
以国产高交联度的快流速琼脂糖为基质,合成了不同配基密度的SP(Sulfopropyl,磺酸基)离子交换介质,建立了乳腺生物反应器表达重组人乳铁蛋白(Recombinant Human Lactoferrin,rHLF)的纯化方法。以溶菌酶为模型蛋白考察了不同配基密度离子... 以国产高交联度的快流速琼脂糖为基质,合成了不同配基密度的SP(Sulfopropyl,磺酸基)离子交换介质,建立了乳腺生物反应器表达重组人乳铁蛋白(Recombinant Human Lactoferrin,rHLF)的纯化方法。以溶菌酶为模型蛋白考察了不同配基密度离子交换介质的静态和动态吸附行为,结果表明介质具有良好的吸附性能。不同配基密度离子交换介质均可纯化得到rHLF,其中,高配基密度(0.24mol/L)的离子交换介质每毫升可以处理50mL rHLF牛乳,rHLF收率为86.5%,纯度为98.5%。圆二色谱的测定结果表明纯化的rHLF二级结构与天然人乳铁蛋白一致。生物学功能实验结果表明,rHLF的铁结合与释放活性与天然人乳铁蛋白相似,浓度为5g/L的rHLF对大肠杆菌的生长具有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 离子交换介质 配基密度 重组人乳铁蛋白 纯化 抑菌活性
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配基密度和介质孔径对离子交换层析分离蛋白质的影响 被引量:3
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作者 卢慧丽 林东强 +1 位作者 朱咪咪 姚善泾 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第S2期209-213,共5页
离子交换层析广泛应用于蛋白质的分离纯化,介质的配基密度和孔径是影响蛋白质分离的关键因素,但相关研究却十分缺乏。本文制备了具有不同配基密度和孔径的DEAE离子交换层析介质,以牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)为模型蛋白质,测... 离子交换层析广泛应用于蛋白质的分离纯化,介质的配基密度和孔径是影响蛋白质分离的关键因素,但相关研究却十分缺乏。本文制备了具有不同配基密度和孔径的DEAE离子交换层析介质,以牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)为模型蛋白质,测定了系列离子交换层析介质的吸附等温线,并采用Langmuir吸附等温式进行拟合,提出综合指数N,用以关联饱和吸附容量与配基密度和介质孔径间的关系。进一步对吸附动力学进行研究,采用孔扩散模型进行拟合,分析配基密度和介质孔径对孔扩散系数的影响。 展开更多
关键词 离子交换层析 配基密度 介质孔径 吸附等温线 吸附动力学
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多肽配基亲和吸附介质的配基密度控制规律 被引量:3
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作者 张海龙 乔昕 +2 位作者 姚红娟 郑春杨 苏志国 《化学反应工程与工艺》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第4期289-295,共7页
以谷胱甘肽为配基,琼脂糖微球为骨架,探索将谷胱甘肽通过共价键偶联到琼脂糖微球骨架上,制备可以分离谷胱甘肽S转移酶(Glutathione S-transferase,GST)及以其为标签的融合蛋白的亲和吸附介质。采用正交实验方法考察了谷胱甘肽加入量、... 以谷胱甘肽为配基,琼脂糖微球为骨架,探索将谷胱甘肽通过共价键偶联到琼脂糖微球骨架上,制备可以分离谷胱甘肽S转移酶(Glutathione S-transferase,GST)及以其为标签的融合蛋白的亲和吸附介质。采用正交实验方法考察了谷胱甘肽加入量、偶联缓冲液的pH值和反应温度对亲和介质配基密度的影响。结果发现,该反应过程中的pH值对配基密度影响最大,其次为谷胱甘肽的加入量。用所制备的亲和吸附介质纯化GST(大鼠肝脏谷胱甘肽S转移酶),发现GST的吸附量随配基密度增加而增加,但GST活性却随配基密度的增加而下降,较好的干胶配基密度为260μmol/g。大鼠肝匀浆液经过离子交换和亲和层析两个步骤,获得了电泳纯的GST,比活力为12.08 U/mg,总活性回收率为40%以上。 展开更多
关键词 亲和吸附介质 琼脂糖 配基密度 谷胱甘肽
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pH和靶头密度对FcBP修饰的PEG-PCL胶束在Caco-2细胞上摄取与外排的影响 被引量:2
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作者 宋晓宁 李瑞 +5 位作者 张华 代文兵 何冰 郑颖 张强 王学清 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1331-1336,共6页
利用小肠上皮细胞顶膜侧和基底侧pH的差异以及新生儿Fc受体(neonatal Fc receptor,FcRn)与其配体结合的pH依赖特性可能增加配体修饰的纳米载体从小肠上皮细胞顶膜侧向基底侧的转运,从而促进药物的吸收。本课题制备了靶向于FcRn的短肽FcB... 利用小肠上皮细胞顶膜侧和基底侧pH的差异以及新生儿Fc受体(neonatal Fc receptor,FcRn)与其配体结合的pH依赖特性可能增加配体修饰的纳米载体从小肠上皮细胞顶膜侧向基底侧的转运,从而促进药物的吸收。本课题制备了靶向于FcRn的短肽FcBP(IgG Fc段结合肽,IgG Fc domain-binding peptides)修饰的聚乙二醇-聚ε-己内酯[poly(ethyl ethylene phosphate)-co-poly(ε-caprolactone),PEG-PCL]胶束并在人克隆结肠腺癌细胞(human colon adenanocaricinoma cell lines,Caco-2)上考察了pH和靶头密度对胶束摄取与外排过程的影响。采用薄膜水化法制备不同靶头修饰密度的包载香豆素6(coumarin 6,C6)的PEG-PCL主动胶束和被动胶束,并用激光粒度测定仪测定其粒径,透射电镜观察其形态,流式细胞术测定各主、被动胶束在不同pH值下的摄取和外排以及FcRn在胶束摄取中的作用。结果表明,PEG-PCL胶束的粒径约为30 nm,FcBP的修饰不影响胶束的粒径。pH和靶头密度都对FcBP修饰的PEG-PCL胶束的摄取有影响。主动胶束在pH 6.0的摄取量显著高于在pH7.4的摄取量,并且在两种pH下主动胶束的摄取量都表现出随靶头密度的增大先增大后减少的趋势。进一步研究胶束的外排表明,胶束在pH 6.0下摄取后可以在pH 7.4环境中外排,外排量与靶头密度有关,其中靶头密度10%的主动胶束外排量最大,显示出较强的跨膜转运递送的潜力。同时,竞争性抑制实验验证了胶束的摄取与配体和受体的作用有关。本研究为应用FcBP修饰的PEG-PCL胶束进行跨膜转运药物打下一定的基础,为纳米载体的设计提供了一定的参考。 展开更多
关键词 胶束 摄取与外排 新生儿Fc受体 IgG Fc段结合肽 PH 靶头密度
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离子交换配基密度对蛋白质吸附行为的影响
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作者 杨小雁 李雯露 +3 位作者 孔英俊 王明林 张贵锋 苏志国 《生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第2期39-43,68,共6页
利用双偏振极化干涉测量仪(DPI)研究了离子交换配基密度对蛋白质吸附行为的影响。用N,N-二乙基-3-氨基丙基三甲氧基硅烷(DAPTMS)对DPI芯片进行修饰,利用X射线光电子能谱表征了芯片上配基密度的差异。以溶菌酶、细胞色素C、糜蛋白酶、牛... 利用双偏振极化干涉测量仪(DPI)研究了离子交换配基密度对蛋白质吸附行为的影响。用N,N-二乙基-3-氨基丙基三甲氧基硅烷(DAPTMS)对DPI芯片进行修饰,利用X射线光电子能谱表征了芯片上配基密度的差异。以溶菌酶、细胞色素C、糜蛋白酶、牛血清白蛋白和免疫球蛋白为模型蛋白,利用DPI研究了5种蛋白质在不同配基密度界面上吸附量、吸附密度和空间形态。结果表明,随着配基密度的增加,蛋白在界面上的吸附量、吸附密度随之增加,起始吸附速率随之增大;蛋白的空间形态与配基密度密切相关,特别是免疫球蛋白,蛋白层厚度远小于其分子直径,空间形态发生变化。证明配基密度是影响界面上蛋白质吸附量、吸附密度和空间形态等吸附行为的关键因素。 展开更多
关键词 离子交换色谱 配基密度 吸附行为 双偏振极化干涉测量仪
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混合模式介质的制备及用于清除抗体中蛋白A
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作者 严军 钱永常 +1 位作者 姚善泾 林东强 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第7期3190-3197,共8页
针对抗体纯化过程中脱落蛋白A的清除,设计和制备了以N-苄基-N-甲基乙醇胺为功能配基的混合模式层析介质Adhere NUPharose FF,该配基兼有疏水、静电和氢键作用。采用烯丙基缩水甘油醚活化法,并对琼脂糖微球基质的活化和配基偶联条件进行... 针对抗体纯化过程中脱落蛋白A的清除,设计和制备了以N-苄基-N-甲基乙醇胺为功能配基的混合模式层析介质Adhere NUPharose FF,该配基兼有疏水、静电和氢键作用。采用烯丙基缩水甘油醚活化法,并对琼脂糖微球基质的活化和配基偶联条件进行了优化,优化后活化密度达260μmol·ml^(-1)以上,配基密度达120μmol·ml^(-1)。同时以抗体和蛋白A的混合物为研究对象来考察该介质对抗体中蛋白A的清除能力,结果表明对蛋白A的有效去除率达到83.1%,为抗体制品中蛋白A的清除提供了一种可行性方法。 展开更多
关键词 混合模式介质 制备 抗体 蛋白A 配基密度
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间臂和丁基密度对疏水层析分离纯化重组乙肝病毒表面抗原的影响
10
作者 李瑞红 李岩 +7 位作者 闭静秀 赵岚 周卫斌 黄永东 张焱 孙李靖 王化军 苏志国 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期692-699,共8页
以国产高交联度的快流速琼脂糖为基质,合成了针对纯化中国仓鼠卵巢细胞表达乙肝病毒表面抗原(CHO-HBsAg)的不同间臂(3C、8C和10C)和不同配基密度的丁基疏水介质。配基密度的增加和间臂C链的延长都会增加介质的疏水性,从而影响其对CHO-HB... 以国产高交联度的快流速琼脂糖为基质,合成了针对纯化中国仓鼠卵巢细胞表达乙肝病毒表面抗原(CHO-HBsAg)的不同间臂(3C、8C和10C)和不同配基密度的丁基疏水介质。配基密度的增加和间臂C链的延长都会增加介质的疏水性,从而影响其对CHO-HBsAg的分离效果。采用正交实验考察了配基密度、盐浓度、pH值三个影响因素对不同间臂疏水介质性能的影响。以分离CHO表达的乙肝病毒表面抗原(CHO-HBsAg)的收率和纯化倍数为主要指标。根据正交试验结果,分离效果最佳的介质间臂为8C、配基密度为22μmol/mL。该介质在硫酸铵浓度9%、pH7.0条件下,CHO-HBsAg的收率可以接近100%,纯化倍数达到60。 展开更多
关键词 疏水层析介质 间臂 配基密度 重组乙肝病毒表面抗原 分离纯化 正交试验
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色胺混合模式层析介质制备及配基密度影响研究
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作者 施伟 李明昊 +1 位作者 栾浩飞 韩得满 《台州学院学报》 2019年第3期33-41,共9页
混合模式层析是一种新型的生物分离技术,在生物大分子药物的分离纯化中展现了良好的应用价值。本研究以色胺作为配基,制备了一系列不同配基密度的新型混合模式介质(4FF-Try)。对介质进行了成分结构表征,并通过静态吸附与吸附动力学考察... 混合模式层析是一种新型的生物分离技术,在生物大分子药物的分离纯化中展现了良好的应用价值。本研究以色胺作为配基,制备了一系列不同配基密度的新型混合模式介质(4FF-Try)。对介质进行了成分结构表征,并通过静态吸附与吸附动力学考察了pH与盐对不同配基密度介质吸附性能的影响。结果表明,4FF-Try对于牛血清白蛋白的吸附呈现典型的pH依赖性及良好的耐盐吸附能力,并且吸附能力随着配基密度的增加,呈现“U”型变化,即存在最佳配基密度范围(60~80μmol/g),最高吸附容量为74.5mg/g。本研究结果证实了4FF-Try用于生物分离的潜力,可应用于介质制备过程与分离过程的优化。 展开更多
关键词 混合模式 色胺 配基密度 吸附性能 生物分离
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基质微环境力学与细胞生物学行为
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作者 李倩 朱晓嫚 +1 位作者 王纪浩 谢岩黎 《生命科学研究》 CAS CSCD 2019年第6期487-493,共7页
细胞作为有机体的最小组成单元,广泛参与着一系列的生命活动。细胞甚至单分子层面上的生物化学反应一直是探究机体生理活性的重点。近些年来,越来越多的研究指出,力学微环境广泛地影响着细胞的生物学活性,如细胞内蛋白质的分布和动态变... 细胞作为有机体的最小组成单元,广泛参与着一系列的生命活动。细胞甚至单分子层面上的生物化学反应一直是探究机体生理活性的重点。近些年来,越来越多的研究指出,力学微环境广泛地影响着细胞的生物学活性,如细胞内蛋白质的分布和动态变化、信号转导等,同时细胞对外界产生的力学效应在组织的重构中起着重要的作用。理解力学微环境与细胞生物学效应的关系为研究生理病理条件下细胞的变化提供了新的视角,同时为开发支架等仿生材料提供了新的思路。本文总结了基质的硬度、配体浓度如何影响细胞黏附、迁移和分化,可为未来生物力学的研究提供基础和依据。 展开更多
关键词 细胞 力学微环境 硬度 配体浓度
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