叶绿素合成关键酶基因表达的半定量RT-PCR分析 被引量：33

1

作者 姚嘉龙 郭蓓 谢皓 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期593-598,共6页

为了解叶绿素合成关键酶基因在大豆不同生育期的表达情况,本研究以拟南芥叶绿素合成关键酶基因序列设计引物,大豆科丰14和它的持绿突变体BN108为试材,利用半定量RT-PCR分析了9种叶绿素合成关键酶基因在开花期和成熟前期表达量的变化。... 为了解叶绿素合成关键酶基因在大豆不同生育期的表达情况,本研究以拟南芥叶绿素合成关键酶基因序列设计引物,大豆科丰14和它的持绿突变体BN108为试材,利用半定量RT-PCR分析了9种叶绿素合成关键酶基因在开花期和成熟前期表达量的变化。结果表明,HEMA、GSA、HEME、POR、CHLG基因在成熟前期表达量显著下降(p<0.05),尤其是HEMA和GSA基因的表达量下降幅度较大,说明上述基因在叶绿素生物合成过程中起到主要调控作用;而突变体BN108有别于科丰14,GSA、HEME、CHLM和CAO基因表达量在成熟前期不降反升,推测持绿突变体在成熟前期叶绿素能够维持较大的合成量,是植物持绿现象的重要原因之一。 展开更多

关键词 大豆 叶绿素 关键酶基因 表达 半定量PT-PCR

原文传递

生长动物脂肪代谢关键酶基因表达调控 被引量：32

2

作者 岳颖 刘国华 +4 位作者 郑爱娟 张华 王晓方 李婷婷 卢占军 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期232-238,共7页

动物体内脂肪组织合成与分解代谢的调控主要是通过调控脂肪代谢关键酶的含量和活性来进行的。关键酶的基因表达水平决定了酶蛋白的多寡和活性的高低。本文对脂肪代谢中的脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、激素敏感酯酶(HSL)、... 动物体内脂肪组织合成与分解代谢的调控主要是通过调控脂肪代谢关键酶的含量和活性来进行的。关键酶的基因表达水平决定了酶蛋白的多寡和活性的高低。本文对脂肪代谢中的脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、激素敏感酯酶(HSL)、脂蛋白酯酶(LPL)的活性及其相应的基因表达水平影响脂肪代谢的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 脂肪代谢 调控 关键酶 基因表达

下载PDF 职称材料

不同抗倒性甜荞茎秆木质素合成关键酶基因的表达分析 被引量：22

3

作者 胡丹 刘星贝 +5 位作者 汪灿 杨浩 李鹤鑫 阮仁武 袁晓辉 易泽林 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1864-1872,共9页

【目的】测定不同抗倒伏能力甜荞品种在不同时期的茎秆木质素含量及其相关合成酶基因表达量,探讨甜荞茎秆木质素合成积累的关键时期及其关键酶基因,为甜荞抗倒伏育种提供理论依据。【方法】用简并引物扩增得到基因CAD、CCR、F5H、COMT和... 【目的】测定不同抗倒伏能力甜荞品种在不同时期的茎秆木质素含量及其相关合成酶基因表达量,探讨甜荞茎秆木质素合成积累的关键时期及其关键酶基因,为甜荞抗倒伏育种提供理论依据。【方法】用简并引物扩增得到基因CAD、CCR、F5H、COMT和CCOAOMT的部分CDS序列,在NCBI数据库中进行比对分析;用紫外分光光度法测定4个不同抗倒性甜荞品种在分枝期、盛花期和乳熟期茎秆基部第2节间木质素含量;用荧光定量PCR(q RT-PCR)方法分析木质素合成途径中9个相关基因PAL、4CL、C4H、C3H、CAD、CCR、F5H、COMT和CCOAOMT的表达,用2-△△CT法计算其相对表达量。用Microsoft Excel 2003整理数据和作图,用SPSS 19软件进行方差分析和相关性分析。【结果】扩增得到CAD、CCR、F5H、COMT和CCOAOMT的CDS序列可用于设计后续荧光定量引物。甜荞茎秆木质素含量从分枝期到乳熟期逐渐增加,不同抗倒性品种间,高抗倒伏品种木质素含量在各个时期均显著高于易倒伏品种。基因PAL、4CL、C4H和CCR表达量在品种间和时期间均差异显著或极显著,CCOAOMT在品种间不显著,时期间显著,F5H在品种间差异显著,时期间不显著,C3H、CAD和COMT在品种和时期间差异均不显著。从分枝期到乳熟期,各品种的PAL、4CL、C4H、CAD、CCOAOMT、F5H和CCR表达量均先增后减,在盛花期达最大值,高抗倒伏品种表达量显著高于易倒伏品种;从分枝期到盛花期COMT表达量逐渐下降,易倒伏品种表达量显著高于高抗倒伏品种,乳熟期高抗倒伏品种显著高于易倒伏品种;从分枝期到乳熟期C3H表达量无明显变化规律。木质素含量与PAL、4CL、C4H、CCOAOMT、CAD和CCR基因表达量呈显著正相关,与C3H呈负相关,与COMT在分枝期和盛花期呈负相关,乳熟期呈正相关,与F5H呈正相关。【结论】木质素含量与甜荞茎秆倒伏密切相关,抗倒伏能力强的甜荞品种其茎秆木质素含量高;� 展开更多

关键词 甜荞 木质素 关键酶基因 荧光定量PCR 抗倒性

下载PDF 职称材料

刺五加皂苷合成关键酶基因表达的半定量RT-PCR分析 被引量：17

4

作者 邢朝斌 龙月红 +3 位作者 吴鹏 何闪 梁能松 李宝财 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期691-696,共6页

根据已克隆的刺五加鲨烯合酶(squalene synthase,SS)、鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SE)和β-香树酯醇合成酶(β-amyrin synthase,bAS)基因序列信息设计引物,通过半定量RT-PCR分析了SS、SE和bAS基因在刺五加不同生长发育时期和不同器... 根据已克隆的刺五加鲨烯合酶(squalene synthase,SS)、鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SE)和β-香树酯醇合成酶(β-amyrin synthase,bAS)基因序列信息设计引物,通过半定量RT-PCR分析了SS、SE和bAS基因在刺五加不同生长发育时期和不同器官中表达量的变化。结果表明,SS、SE和bAS基因在各生长发育时期和各器官中均有表达,但表达量差异显著(P<0.05),三者均在盛花期表达量最高,之后降低,进入果实成熟期后SS和bAS的表达量迅速回升,SE无显著变化。SS和bAS在叶片和根中的表达量较高,SE表达量的最大值出现在叶片和幼茎中。刺五加SS、SE和bAS基因的表达间存在显著的正相关关系(P<0.05)。研究结果为进一步分析关键酶基因对刺五加三萜皂苷生物合成的影响奠定了基础。 展开更多

关键词 关键酶基因 表达 半定量RT—PCR

下载PDF 职称材料

花青素代谢调控植物彩叶研究进展 被引量：16

5

作者 万东璞 于卓 +3 位作者 吴燕民 丁梦琦 李金博 周美亮 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期30-38,共9页

随着经济发展和社会进步,人们对于园林植物的审美有了更高的要求,彩叶植物逐渐成为了市场的新宠,而花青素对叶片颜色形成具有重要的作用。阐述了花青素相关的代谢途径及叶片中花青素代谢的关键结构基因和转录调控因子,归纳了多个环境因... 随着经济发展和社会进步,人们对于园林植物的审美有了更高的要求,彩叶植物逐渐成为了市场的新宠,而花青素对叶片颜色形成具有重要的作用。阐述了花青素相关的代谢途径及叶片中花青素代谢的关键结构基因和转录调控因子,归纳了多个环境因子通过调控花青素代谢对叶片颜色的影响,并探讨了通过分子生物学手段改变花青素含量以改良彩叶植物的途径,以期为彩叶植物的开发和利用提供参考。 展开更多

关键词 彩叶植物 花青素 关键酶基因 转录因子 基因工程

下载PDF 职称材料

烤烟成熟期氮代谢及其关键酶活性和相关基因表达分析 被引量：12

6

作者 贾保顺 孙祖正 +1 位作者 张锦中 朱学杰 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期559-565,共7页

以烤烟品种K 326和NC 71为试验材料,测定分析了烟叶成熟期含氮化合物(叶片NH4^+、可溶性蛋白质、总氮和游离氨基酸)含量和氮代谢关键酶活性,并对其关键酶基因(NtNR,NtGS和NtGOGAT)进行实时荧光定量PCR分析。结果表明在烤烟成熟期,烟叶... 以烤烟品种K 326和NC 71为试验材料,测定分析了烟叶成熟期含氮化合物(叶片NH4^+、可溶性蛋白质、总氮和游离氨基酸)含量和氮代谢关键酶活性,并对其关键酶基因(NtNR,NtGS和NtGOGAT)进行实时荧光定量PCR分析。结果表明在烤烟成熟期,烟叶内总氮、可溶性蛋白质和游离氨基酸含量总体呈逐渐降低的变化趋势。叶片NH4^+呈单峰波动变化,移栽后80 d时其含量达到峰值。从移栽后70 d开始,烟叶谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸脱氢酶(GDH)和谷氨酸合成酶(GOGAT)活性逐渐增强,至移栽后80 d其活性达到最高,随后逐渐降低。NtGR基因表达量在成熟期逐渐降低,而NtGS和NtGOGAT基因表达量则呈先升高后降低的变化趋势。硝酸还原酶(NR)对烟叶氮代谢起主要调控作用,GS对调节叶片NH4^+有重要影响。同一生态环境和栽培条件下,NtGS广泛参与烟叶的氮代谢调控,而NtGOGAT起主要协助作用。 展开更多

关键词 烤烟 成熟期 氮代谢 关键酶活性 基因表达

下载PDF 职称材料

雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)在诱导条件下积累虾青素的调控机理研究新进展 被引量：6

7

作者 魏东 吴汪黔生 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2002年第2期60-64,共5页

本文综述了近年来国内外在雨生红球藻(Haematococcuspluvialis)的虾青素生物合成途径、关键酶的性质及相关基因的克隆、表达与调控的分子机理等领域取得的最新研究进展,并提出了国内应开展的相关创新性研究的通报。

关键词 雨生红球藻 虾青素 生物合成途径 关键酶 基因表达 调控机理

下载PDF 职称材料

茉莉酸甲酯对川续断根中川续断皂苷Ⅵ合成积累的影响 被引量：9

8

作者 胡正平 徐娇 +5 位作者 周涛 江维克 郭娟 肖承鸿 张进强 周冰清 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期2302-2307,共6页

通过分析茉莉酸甲酯(MeJA)对川续断根中川续断皂苷Ⅵ积累及相关基因表达的影响,为深入研究MeJA调控川续断皂苷Ⅵ的合成奠定基础。本研究以川续断幼苗为实验材料,分别添加浓度为50、100、150、200、300μmol·L^(-1)的MeJA进行处理,... 通过分析茉莉酸甲酯(MeJA)对川续断根中川续断皂苷Ⅵ积累及相关基因表达的影响,为深入研究MeJA调控川续断皂苷Ⅵ的合成奠定基础。本研究以川续断幼苗为实验材料,分别添加浓度为50、100、150、200、300μmol·L^(-1)的MeJA进行处理,在处理后1、3、5天不同时间点取样。分析根中川续断皂苷Ⅵ和超氧化物阴离子的含量、叶片中丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及川续断皂苷Ⅵ合成路径相关基因转录表达水平的动态变化。结果表明,采用浓度为150μmol·L^(-1)的MeJA处理川续断能显著增加根中川续断皂苷Ⅵ的积累,处理3天后川续断皂苷Ⅵ的含量最高,是对照组的2.16倍。MeJA处理后叶片中SOD活性降低,MDA的含量升高,根中超氧化物阴离子含量升高。同时根中川续断皂苷Ⅵ合成关键酶基因鲨烯环氧酶(DaSE1)、牻牛儿基二磷酸合成酶(DaGPS)的表达量与对照组相比上调表达。以上研究表明MeJA 150μmol·L^(-1)是促进川续断皂苷Ⅵ积累的适宜浓度,通过上调川续断皂苷Ⅵ合成关键酶基因的表达增加川续断皂苷Ⅵ的积累,从而抵抗MeJA对川续断造成的逆境胁迫。 展开更多

关键词 茉莉酸甲酯 川续断 川续断皂苷Ⅵ 关键酶基因 表达量

原文传递

烟草绿原酸生物合成途径关键酶基因的研究进展 被引量：8

9

作者 杨银菊 陈爱国 +2 位作者 刘光亮 张彦 王树声 《现代农业科技》 2018年第13期5-8,10,共5页

绿原酸是重要的植物苯丙素类次生代谢产物之一,与植物的食品风味和药用生物活性等密切相关,其生物合成与调控研究一直是科研人员所关注的焦点。本文综述了烟草绿原酸生物合成途径中关键节点苯丙氨酸解氨酶基因、肉桂酸-4-羟化酶基因、对... 绿原酸是重要的植物苯丙素类次生代谢产物之一,与植物的食品风味和药用生物活性等密切相关,其生物合成与调控研究一直是科研人员所关注的焦点。本文综述了烟草绿原酸生物合成途径中关键节点苯丙氨酸解氨酶基因、肉桂酸-4-羟化酶基因、对-香豆酸辅酶A连接酶基因、羟基肉桂酰辅酶A:奎尼酸羟基肉桂酰转移酶基因、羟基肉桂酰辅酶A莽草酸/奎尼酸羟基肉桂酰转移酶基因、对-香豆酸3′-羟化酶基因的研究进展,并进一步展望了烟草绿原酸生物合成代谢调控的研究方向,旨在为烟草绿原酸生物合成途径的深入研究和定向调控提供参考。 展开更多

关键词 烟草 绿原酸 生物合成 关键酶 基因

下载PDF 职称材料

老化窖泥己酸代谢的研究 被引量：7

10

作者 代金凤 罗雯 +6 位作者 廖作敏 罗政 文春平 许艳 吴正云 周山大慶 张文学 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第12期148-152,共5页

浓香型白酒的独特风味与窖泥有着密不可分的关系,而以己酸为前体物质的己酸乙酯是浓香型白酒中最重要的香气成分。该实验采用宏转录组技术对产己酸关键酶基因crt1、bcd、etfA1、etfB1、hbd1、nfnA和nfnB在老化窖泥中的表达以及老化窖泥... 浓香型白酒的独特风味与窖泥有着密不可分的关系,而以己酸为前体物质的己酸乙酯是浓香型白酒中最重要的香气成分。该实验采用宏转录组技术对产己酸关键酶基因crt1、bcd、etfA1、etfB1、hbd1、nfnA和nfnB在老化窖泥中的表达以及老化窖泥中的己酸代谢途径进行了研究,为白酒品质提升提供理论依据。结果表明,根据关键酶基因的物种注释结果,推测脱卤厌氧杆菌(Anaeromyxobacter dehalogenans)可能是窖泥中一类重要微生物;同时,窖泥中己酸的合成可能并非己酸菌作用的结果,而是由多种非己酸菌共同作用产生。在老化窖泥中,D-乳酸和L-乳酸之间不能通过乳酸消旋酶相互转换,丙酮酸通过丙酮酸氧化还原酶或2-氧代酸氧化还原酶而不是丙酮酸甲酸裂解酶催化生成乙酰辅酶A。 展开更多

关键词 老化窖泥 己酸 宏转录 关键酶基因

下载PDF 职称材料

盾叶薯蓣转录组分析及其皂苷元生物合成关键酶基因的挖掘 被引量：7

11

作者 李雅静 王丰青 +5 位作者 谢彩侠 智惊宇 孟庆博 耿晓桐 陶晓赛 张苗 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第16期3885-3894,共10页

目的分析比较盾叶薯蓣根茎与叶片的转录组,挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因。方法利用Illumina Hi Seq2000高通量测序技术对盾叶薯蓣根茎与叶片进行转录组测序,对测序结果进行注释分析;并结合根茎与叶片中皂苷元的... 目的分析比较盾叶薯蓣根茎与叶片的转录组,挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因。方法利用Illumina Hi Seq2000高通量测序技术对盾叶薯蓣根茎与叶片进行转录组测序,对测序结果进行注释分析;并结合根茎与叶片中皂苷元的含量测定结果,挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因;最后利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术对部分候选基因的表达模式进行分析。结果共获得了81 660个Unigene,有64.33%在NT、NR、Swiss-Prot、KOG、GO、KEGG数据库中得到注释;根据其表达量与代谢通路分析筛选出29种共227个可能参与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径的催化酶基因,部分催化酶基因的表达模式与皂苷元含量具有一定相关性;并发现5个盾叶薯蓣内生菌基因。结论研究初步获得了盾叶薯蓣中参与皂苷元生物合成的候选关键酶基因,部分候选酶基因可能参与盾叶薯蓣中皂苷类成分的后修饰过程,并发现盾叶薯蓣根茎中内生菌可能参与其皂苷元的生物合成,为进一步阐明盾叶薯蓣中皂苷元生物合成的分子机制奠定基础。 展开更多

关键词 盾叶薯蓣 转录组 皂苷元 关键酶基因 高通量测序

原文传递

叶酸代谢关键酶基因多态性与非综合征性唇腭裂相关性研究进展 被引量：7

12

作者 姚涛 李三华 宋庆高 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第3期310-314,共5页

非综合征性唇腭裂(nonsyndromic cleft of lip with or without palate,NSCL/P)是新生儿颌面部最常见的先天性出生缺陷之一,与遗传因素和多种环境有关。叶酸缺乏、代谢紊乱及介导其代谢的关键酶基因的多态性可能是导致NSCL/P的重要因素... 非综合征性唇腭裂(nonsyndromic cleft of lip with or without palate,NSCL/P)是新生儿颌面部最常见的先天性出生缺陷之一,与遗传因素和多种环境有关。叶酸缺乏、代谢紊乱及介导其代谢的关键酶基因的多态性可能是导致NSCL/P的重要因素,母体孕期摄入叶酸可降低NSCL/P的患病风险。本文就叶酸代谢及介导其代谢的关键酶基因的多态性与NSCL/P的相关性进行综述。 展开更多

关键词 非综合征性唇腭裂 叶酸代谢 关键酶 基因多态性

下载PDF 职称材料

外源茉莉酸甲酯诱导对香菇多糖代谢及关键酶基因表达的影响 被引量：6

13

作者 张润吉 黄熙瀛 +4 位作者 向泉桔 曾先富 李昕竺 张小平 辜运富 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2338-2345,共8页

香菇多糖是重要的生物活性成分,其药用价值高,茉莉酸甲酯有助于提高食用菌多糖含量,但关于其对香菇多糖合成的影响尚不清楚。本研究以香菇新808为实验材料,对不同浓度茉莉酸甲酯(MeJA)诱导下香菇菌丝生物量和生长速率、香菇多糖代谢关... 香菇多糖是重要的生物活性成分,其药用价值高,茉莉酸甲酯有助于提高食用菌多糖含量,但关于其对香菇多糖合成的影响尚不清楚。本研究以香菇新808为实验材料,对不同浓度茉莉酸甲酯(MeJA)诱导下香菇菌丝生物量和生长速率、香菇多糖代谢关键酶活性及基因相对表达量、香菇多糖含量进行比较分析。结果表明:10μmol/L的茉莉酸甲酯可显著促进香菇菌丝生长并提高菌丝体生物量,分别是对照的1.14倍、1.2倍;与香菇多糖代谢相关的UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)、葡萄糖磷酸异构酶(PGI)、α-葡萄糖磷酸变位酶(α-PGM)活性增加,为对照组的1.58、1.13、3.21倍;其基因相对表达量较对照组也显著上调,为对照组的5.73、1.4、1.77倍;香菇多糖合成量显著增加,为对照组1.58倍。10μmol/L的MeJA处理后,香菇多糖代谢关键酶活性及基因相对表达量与多糖含量间存在显著的正相关关系,表明添加适宜浓度的茉莉酸甲酯会影响香菇菌丝的生长及多糖合成。 展开更多

关键词 茉莉酸甲酯 香菇多糖 关键酶 基因表达量

原文传递

银杏类黄酮代谢研究进展 被引量：4

14

作者 冯凯 陈颖 +2 位作者 刘瑞 马娟娟 赵斌 《西南林业大学学报（自然科学）》 CAS 北大核心 2022年第1期178-188,共11页

基于类黄酮化合物在银杏叶用林培育、药物生产加工等方面的重要理论研究和应用价值,从环境、细胞培养、分子水平3个方面对近年来银杏类黄酮代谢的调控研究进行了综述。得出光照、温度、水分等环境条件的改变可以调控银杏类黄酮的代谢;... 基于类黄酮化合物在银杏叶用林培育、药物生产加工等方面的重要理论研究和应用价值,从环境、细胞培养、分子水平3个方面对近年来银杏类黄酮代谢的调控研究进行了综述。得出光照、温度、水分等环境条件的改变可以调控银杏类黄酮的代谢;诱导子、微量元素的调整是细胞培养中类黄酮生产的有效调控手段;随着银杏全基因组测序地完成,人们通过基因组学与高通量测序技术挖掘出了许多关键酶基因和转录因子,丰富了人们对银杏黄酮代谢进行调控的手段。在未来的应用和研究中,建议通过多组学研究挖掘更多的相关基因和关键酶,从上游和下游的基因簇共调节研究黄酮的代谢通路,并结合合成生物学实现银杏黄酮的智能调控。 展开更多

关键词 银杏 黄酮代谢 细胞培养 关键酶基因 转录因子

下载PDF 职称材料

硼等4种元素对甘草酸生物合成关键酶基因表达的RT-PCR分析 被引量：5

15

作者 梁新华 栾维江 +1 位作者 梁军 张风侠 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期2351-2353,共3页

目的研究B、Mn、Zn和Mo等4种微量元素对甘草酸生物合成关键酶鲨烯合成酶(SQS)和β-香树脂醇合成酶(β-AS)基因表达的影响。方法设置上述4种微量元素0,0.05%,0.1%,0.15%和0.3%5个不同浓度水培乌拉尔甘草幼苗,9天后,取其根部半定量PCR检... 目的研究B、Mn、Zn和Mo等4种微量元素对甘草酸生物合成关键酶鲨烯合成酶(SQS)和β-香树脂醇合成酶(β-AS)基因表达的影响。方法设置上述4种微量元素0,0.05%,0.1%,0.15%和0.3%5个不同浓度水培乌拉尔甘草幼苗,9天后,取其根部半定量PCR检测。结果能够促进SQS基因表达的是高和极高浓度的Zn元素(0.15%和0.3%)和中、高和极高浓度的Mo元素(0.1%,0.15%和0.3%);Zn元素所有处理浓度均可明显提高β-AS基因的表达,随着Mo元素处理浓度的提高,β-AS基因的表达量增加。结论 Zn和Mo两种元素对乌拉尔甘草甘草酸生物合成关键酶基因表达有明显的促进作用。 展开更多

关键词 甘草 甘草酸 关键酶 基因表达 微量元素 半定量PCR

下载PDF 职称材料

黄瓜叶酸合成关键基因克隆与分析 被引量：5

16

作者 周琪 刘小萍 +4 位作者 薄凯亮 苗晗 董邵云 顾兴芳 张圣平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第18期3764-3776,I0013-I0016,共17页

【目的】分析黄瓜基因组中与叶酸合成代谢相关的基因数量、定位以及表达特征,对关键酶基因进行生物信息学分析与克隆,旨在为黄瓜叶酸合成调控研究奠定基础。【方法】根据已报道的拟南芥叶酸合成相关基因,利用黄瓜基因组数据库中9930_V3... 【目的】分析黄瓜基因组中与叶酸合成代谢相关的基因数量、定位以及表达特征,对关键酶基因进行生物信息学分析与克隆,旨在为黄瓜叶酸合成调控研究奠定基础。【方法】根据已报道的拟南芥叶酸合成相关基因,利用黄瓜基因组数据库中9930_V3版本进行BLAST比对。利用MapChart绘制黄瓜染色体物理图谱并对基因定位。利用qRT-PCR分析这些基因在黄瓜果实发育不同时期和不同材料中的表达量。通过MEGA、WebLOGO、ExPASy等工具对关键酶基因进行生物信息学分析。通过PCR扩增对关键酶基因进行克隆,并测序分析基因的序列差异。【结果】同源比对获得19个黄瓜叶酸代谢相关基因,这些基因不均匀分布在黄瓜7条染色体上,且以Chr.4和Chr.5上分布最多。通过对其中11个调控叶酸合成的基因在测序黄瓜9930果实发育不同时期以及果实叶酸含量高低差异显著的2份材料的表达量分析,发现CsFPGS、CsHPPK/CsDHPS和CsDHNA 3个基因与果实叶酸含量变化趋势完全一致;CsADCS、CsADCL、CsDHNA、CsHPPK/CsDHFS、CsFPGS、CsDHFS等基因的表达量在2份材料中具有显著差异。通过对2个调控叶酸合成限速步骤的关键酶基因CsGCHI和CsADCS的蛋白序列及蛋白结构域分析,发现各物种中CsGCHI的同源基因均具有2个GTP_cyclohydroI结构域;CsADCS的同源基因均具有2个GATase结构域、1个Anth_synt_I_N结构域和1个Chorismate_bind结构域。它们在不同物种中高度保守,进化树分析亲缘关系近的物种聚类到一起。分别扩增黄瓜果实低叶酸含量自交系65G和高叶酸含量自交系02245中CsGCHI和CsADCS的同源基因,序列分析表明CsaV3_1G041250全长为3012 bp,CDS序列长度为1413 bp,3个SNP位点的突变导致了氨基酸序列的变异;CsaV3_7G026240全长为3047 bp,CDS长度1407 bp,序列无变异;CsaV3_5G036360全长7941 bp,CDS序列长度为2706 bp,序列无变异。【结论】鉴定出19个不均匀分布在7条染色 展开更多

关键词 黄瓜 叶酸 关键酶 同源基因 克隆

下载PDF 职称材料

外源GA_3对太子参块根发育及赤霉素生物合成的调控 被引量：5

17

作者 李军 周涛 +4 位作者 郑伟 张晨 龚安慧 肖承鸿 江维克 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第20期6867-6874,共8页

内源激素是植物生长发育的重要调节系统,对植物器官的形态建成具有重要意义。本研究采用外施赤霉素(GA_3)或赤霉素抑制剂(PBZ)处理太子参种苗,探讨外源赤霉素对太子参内源赤霉素及块根形成的影响。结果表明,喷施外源赤霉素可显著增加株... 内源激素是植物生长发育的重要调节系统,对植物器官的形态建成具有重要意义。本研究采用外施赤霉素(GA_3)或赤霉素抑制剂(PBZ)处理太子参种苗,探讨外源赤霉素对太子参内源赤霉素及块根形成的影响。结果表明,喷施外源赤霉素可显著增加株高、茎节数,但降低叶厚及地上茎粗,抑制太子参块根的形成。外施赤霉素早期迅速降低块根内源赤霉素含量,并在后期维持块根中内源赤霉素在较高水平。多效唑缓慢降低内源赤霉素水平,但在块根发育后期维持较高的赤霉素含量。外源赤霉素能显著降低GA20氧化酶、GA_3氧化酶及受体蛋白基因GID1的表达水平;多效唑长期处理能显著提高降低GA20氧化酶、GA_3氧化酶的表达水平,但降低受体蛋白基因GID1的表达水平。长期外施赤霉素与多效唑对植物内源赤霉素具有动态调节的作用,且内源赤霉素的生物合成具有显著的反馈调节机制。 展开更多

关键词 太子参 外源赤霉素 块根发育 关键酶基因

原文传递

海藻糖对香菇多糖代谢及关键酶基因表达的影响

18

作者 曹雨影 李艳 +3 位作者 张莹 向泉桔 张凌子 辜运富 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2244-2256,共13页

香菇多糖是从香菇中纯化提取出来,具有药用价值的一种高分子葡聚糖。本研究以香菇新808为研究对象,探究不同浓度外源海藻糖处理下的香菇菌丝生长速率、生物量、多糖含量、菌丝胞内外酶的活性及多糖合成关键酶基因表达量的差异。本研究... 香菇多糖是从香菇中纯化提取出来,具有药用价值的一种高分子葡聚糖。本研究以香菇新808为研究对象,探究不同浓度外源海藻糖处理下的香菇菌丝生长速率、生物量、多糖含量、菌丝胞内外酶的活性及多糖合成关键酶基因表达量的差异。本研究发现在2.5mg/mL浓度海藻糖处理下,香菇菌丝生物量和多糖含量相较于对照组显著提高,菌丝生长速率与对照组间没有显著差异;参与调控菌丝多糖合成的胞外酶(木质素过氧化物酶、漆酶、纤维素酶、锰过氧化物酶和半纤维素酶)及胞内酶(葡萄糖激酶、磷酸葡萄糖变位酶、磷酸葡萄糖异构酶)的活性与对照相比均显著升高;多糖合成关键酶基因LENED_003770、LENED_004424、LENED_005589、LENED_010922和LENED_012941的表达量相对于对照组均显著上调,而LENED_009143基因表达量则明显下调。表明适宜浓度的外源海藻糖能有效提高香菇菌丝多糖合成量,有利于香菇多糖合成积累。 展开更多

关键词 香菇 海藻糖 香菇多糖 合成关键酶 基因表达量

原文传递

外源ABA、GA_3对太子参皂苷含量及其生物合成关键酶基因表达的影响 被引量：4

19

作者 张晨 周涛 +4 位作者 郑伟 李军 肖承鸿 龚安慧 江维克 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第13期4255-4262,共8页

为了探讨ABA、GA3对太子参皂苷生物合成的影响,该研究通过根灌ABA及其抑制剂氟啶酮(Fluridone)、GA3及其抑制剂多效唑(PBZ),利用酶标仪分光光度法测定皂苷和内源茉莉酸甲酯(Me JA)的含量,采用实时荧光定量PCR技术检测三萜皂苷生物合成... 为了探讨ABA、GA3对太子参皂苷生物合成的影响,该研究通过根灌ABA及其抑制剂氟啶酮(Fluridone)、GA3及其抑制剂多效唑(PBZ),利用酶标仪分光光度法测定皂苷和内源茉莉酸甲酯(Me JA)的含量,采用实时荧光定量PCR技术检测三萜皂苷生物合成关键酶基因表达量的变化。结果表明,太子参总皂苷总含量与其生物合成关键酶基因的表达呈现一致的变化趋势,外源GA3长期处理后太子参中皂苷的含量明显增加,太子参SE1和IPPI基因的表达量明显上调;施加外源ABA则降低了太子参总皂苷的含量,太子参HMGS、MDD、SS1、SS2和β-A28O各基因表达量均明显下调。因此,我们推测在太子参块根生长发育过程中GA3可能通过影响JA从而促进了皂苷的积累,ABA可能是通过抑制皂苷合成关键酶基因的表达进而降低皂苷的含量。此外,在块根发育的不同时期,ABA、GA对Me-JA的影响可能存在较大差异。 展开更多

关键词 太子参 植物激素 皂苷 关键酶基因 表达分析

原文传递

大豆天冬氨酸代谢途径关键酶基因电子定位与结构分析 被引量：4

20

作者 于妍 姜威 +3 位作者 唐敬仙 刘春燕 陈庆山 胡国华 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期22-27,共6页

运用电子定位的方法,利用大豆基因组物理图和遗传图的整合图谱,完成了17个大豆天冬氨酸代谢途径中关键酶基因的定位以及结构分析。结果表明:这些酶基因分别定位在A1、B2、D1a、D1b、D2、F、G、H、J、L和N等11个连锁群上,并获得了相应连... 运用电子定位的方法,利用大豆基因组物理图和遗传图的整合图谱,完成了17个大豆天冬氨酸代谢途径中关键酶基因的定位以及结构分析。结果表明:这些酶基因分别定位在A1、B2、D1a、D1b、D2、F、G、H、J、L和N等11个连锁群上,并获得了相应连锁群区间两侧的标记;在基因结构分析上,AHAS、DHDPS、HK与TS没有内含子,DHAD基因的内含子数目最多,为13个,AK基因有12个内含子。通过定位获得的对应分子标记可以为基因分子辅助育种奠定基础,而基因结构信息能更好的实现基因功能分析。 展开更多

关键词 大豆 天冬氨酸 关键酶基因 电子定位 基因结构

下载PDF 职称材料