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联合消解-电感耦合等离子体质谱法测定大米中的铜、铅、锌、镉、铬 被引量：8
1
作者 邱丽 唐碧玉 +1 位作者 施意华 古行乾 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1078-1082,共5页
称取经研磨的样品0.500 0~1.000 0g至25mL石英烧杯中,加入1mL硝酸浸泡1h,在低温电炉上加热至完全炭化,移入500℃马弗炉中灰化4h,冷却至室温后,加入4mL硝酸(1+1)溶液,低温加热溶解残渣,冷却后用水定容至25mL,用电感耦合等离子体质谱仪测... 称取经研磨的样品0.500 0~1.000 0g至25mL石英烧杯中,加入1mL硝酸浸泡1h,在低温电炉上加热至完全炭化,移入500℃马弗炉中灰化4h,冷却至室温后,加入4mL硝酸(1+1)溶液,低温加热溶解残渣,冷却后用水定容至25mL,用电感耦合等离子体质谱仪测定溶液中的铜、铅、锌、镉、铬。经灰化处理后的样品溶液中盐类和有机质大大减少,结合内标(103 Rh)校正可消除基体效应和物理效应。采用数学校正法消除114Sn对114 Cd的干扰,通过干法消解样品除去有机质可消除40 Ar+12C对52Cr的干扰。铜、铅、锌、镉、铬的质量浓度在一定范围内与其响应值呈线性关系,检出限(3σ)在0.005~0.44μg·g-1之间。加标回收率在80.0%~125%之间,测定值的相对标准偏差(n=11)小于10%。方法用于测定大米国家一级标准物质中铜、铅、锌、镉、铬的含量,测定值与认定值相符。 展开更多
关键词 电感耦合等离子体质谱法 联合消解 大米 铜 铅 锌 镉 铬
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人骨关节炎软骨细胞的体外分离与培养 被引量：9
2
作者 魏钰 魏民 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第25期4056-4061,共6页
背景:大量针对骨关节炎细胞水平的研究仍集中在动物模型关节软骨细胞的体外培养。动物模型引发的退变效应与人骨关节炎的发生并不完全一致。如何利用人骨关节炎软骨组织构建体外细胞模型并研究其特征性蛋白变化趋势,是模拟体内骨关节炎... 背景:大量针对骨关节炎细胞水平的研究仍集中在动物模型关节软骨细胞的体外培养。动物模型引发的退变效应与人骨关节炎的发生并不完全一致。如何利用人骨关节炎软骨组织构建体外细胞模型并研究其特征性蛋白变化趋势,是模拟体内骨关节炎软骨退变过程的关键。目的:探讨人骨关节炎软骨细胞的体外分离、培养方法,观察原代至第3代人骨关节软骨细胞的形态学特性和相关蛋白表达变化。方法:取6例因重度骨关节炎行关节置换术患者的废弃软骨组织(获得中国人民解放军总医院医学伦理委员会批准,伦理批号为S2017-23-7),男2例,女4例;年龄62-72岁,平均(68.3±3.39)岁,采用一步酶消化法(Ⅱ型胶原酶)分离培养人骨关节炎软骨细胞,并进行传代培养,从而构建体外人骨关节炎软骨细胞培养体系。倒置相差显微镜观察各代细胞形态;苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫荧光染色方法进行细胞鉴定。采用Western blot法检测各代软骨细胞于70%融合率时Col2a、Aggrecan与MMP-13的表达。结果与结论:经过Ⅱ型胶原酶消化后,培养1周左右可见组织块周围爬出散在的细胞,3周左右可传代进行下一步研究;形态学、苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝染色与Ⅱ型胶原免疫荧光染色证明培养出的细胞为人软骨细胞。第3代软骨细胞Col2a、Aggrecan的相对表达量与原代比较有明显降低(P<0.01),且随着培养代数增加表达逐渐降低;MMP-13随着培养代数的增加表达逐渐增强(P <0.01)。结果表明,Ⅱ型胶原酶一步消化法可成功从标本中分离出骨关节炎软骨细胞并传代培养。体外培养的骨关节炎软骨细胞去分化特性随着传代次数增加而逐渐增强,功能性蛋白表达整体下降。3代以内的软骨细胞符合人骨关节炎时软骨退变的表现,可能是用于实验研究的最佳选择。 展开更多
关键词 骨关节炎 关节置换 人软骨细胞 一步酶消化法 Ⅱ型胶原酶 Ⅱ型胶原 聚集蛋白聚糖 国家自然科学基金
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剩余污泥与生活有机垃圾联合厌氧消化产沼气研究 被引量：6
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作者 韩文彪 王毅琪 +2 位作者 徐霞 赵玉柱 陈灏 《可再生能源》 CAS 北大核心 2016年第5期745-748,共4页
以污水处理厂剩余污泥和生活垃圾为发酵原料,研究了不同原料配比对厌氧消化过程及消化效率的影响。结果表明,剩余污泥和生活垃圾联合厌氧发酵可以提高垃圾的消化效率,当剩余污泥和生活垃圾TS比为1∶4时厌氧消化效果最好,经过66 d消化后,... 以污水处理厂剩余污泥和生活垃圾为发酵原料,研究了不同原料配比对厌氧消化过程及消化效率的影响。结果表明,剩余污泥和生活垃圾联合厌氧发酵可以提高垃圾的消化效率,当剩余污泥和生活垃圾TS比为1∶4时厌氧消化效果最好,经过66 d消化后,COD去除率为59.79%,TS去除率为56.92%,VS去除率为66.87%。 展开更多
关键词 剩余污泥 生活垃圾 联合厌氧消化
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老年小鼠踝关节软骨细胞体外分离及培养鉴定
4
作者 贾彩霞 何斯 哈小琴 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第32期5097-5101,共5页
背景:老年小鼠的关节软骨本身存在一定的磨损,提取难度较大;尤其是踝关节等难以分离关节软骨面的小关节软骨细胞的提取方法更加少见。目的:探究实验室改良两步酶消化法提取老年小鼠踝关节软骨细胞的效果,体外培养观察并评价其生物学特... 背景:老年小鼠的关节软骨本身存在一定的磨损,提取难度较大;尤其是踝关节等难以分离关节软骨面的小关节软骨细胞的提取方法更加少见。目的:探究实验室改良两步酶消化法提取老年小鼠踝关节软骨细胞的效果,体外培养观察并评价其生物学特性。方法:选取46周龄老年BALB/c雄性小鼠踝关节,通过实验室改良的0.25%胰酶EDTA、2 g/LⅡ型胶原酶两步酶消化法顺序进行分离提取及体外培养。使用倒置显微镜观察细胞生长形态,锥虫蓝染色并计数原代贴壁细胞,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫荧光染色,二甲基亚甲基蓝显色法测定原代贴壁细胞培养液和消化液中硫酸糖胺多糖水平,CCK-8试剂盒检测软骨细胞增殖进行软骨细胞生物学特性鉴定及评价。结果与结论:①关节软骨经两步酶消化后,细胞全部解离释放,老年小鼠每个踝关节平均收获9×10^(5)个原代贴壁细胞;原代及第1代、第2代细胞贴壁形态为梭形和多角形;②细胞甲苯胺蓝染色可见蓝紫色易染颗粒,Ⅱ型胶原免疫荧光染色可见红色荧光阳性表达;③原代细胞培养液和消化液中硫酸糖胺多糖分别为(42.41±15.00),(65.63±10.00)mg/L;阴性对照中硫酸糖胺多糖分别为(0.35±3.78),(0.21±2.56)mg/L;④原代细胞第6天细胞数量达到最大,第1代和第2代细胞第5天达到最大,同一时间点,第1代细胞的细胞活力大于第2代细胞和原代细胞;⑤结果证实:实验室改良的两步酶消化法可成功分离老年小鼠踝关节软骨细胞,贴壁细胞纯度高、数量多,可成功合成和分泌Ⅱ型胶原及蛋白聚糖,具有良好的生物学特性,其中第1代软骨细胞的活力最高,第2代次之,可用于实验研究。 展开更多
关键词 老年小鼠 踝关节 软骨细胞 酶消化法 细胞培养
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