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Comparative Study on the Immunogenicity between Recombinant MS-Sj26GST Vaccine and Recombinant BCG-Sj26GST Vaccine in Schistosoma japonicum
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作者 戴五星 高红 +3 位作者 黄海浪 袁野 胡佳杰 皇甫永穆 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2003年第3期213-215,218,共4页
The BALB/c mice were immunized with rMS Sj26GST and rBCG Sj26GST vaccine in Schistosoma japonicum by subcutaneous injection After they were immunized for 8 weeks, the eyeballs were removed to get blood and macroph... The BALB/c mice were immunized with rMS Sj26GST and rBCG Sj26GST vaccine in Schistosoma japonicum by subcutaneous injection After they were immunized for 8 weeks, the eyeballs were removed to get blood and macrophages of abdominal cavity and spleen cells were harvested The lymphocytic stimulating index (SI) was used to measure the cellular proliferating ability and NO release was used to measure the phagocytic activity of the macrophages By using ELISA kit, the levels of interleukin 2 (IL 2) and interferon γ (IFN γ) in serum and the splenic lymphocytic cultured supernatant were detected The results showed that after the mice were immunized with 10 6 CFU of rMS Sj26GST and rBCG Sj26GST vaccine separately by subcutaneous injection, proliferating ability of splenic lymphocytes in the mice showed no difference ( P >0 05), but both were significantly increased as compared with that in the control group( P <0 05); The contents of NO in the intraperitoneal macrophages of rMS Sj26GST vaccine group were significantly lower than in the control group ( P <0 001) and rBCG Sj26GST vaccine group ( P <0 01); The levels of serum IL 2 in the rMS Sj26GST vaccine group were significantly increased as compared with that in the control group ( P <0 001), vector group ( P <0 01) and rBCG Sj26GST vaccine group ( P <0 05); The contents of serum IFN γ in the rMS Sj26GST vaccine group were significantly increased as compared with that in the control group ( P <0 01) and rBCG Sj26GST vaccine group ( P <0 05) The contents of IFN γ in the cultured supernatant were significantly lower than those of rBCG Sj26GST vaccine group ( P <0 001), but were significantly increased as compared with that in the control group ( P <0 01) It was indicated that both vaccines could enhance the immune response of the mice, but rMS Sj26GST vaccine had stronger immunogenicity than rBCG Sj26GST vaccine 展开更多
关键词 Schistosoma japonnicum Mycobacterium smegmatis mc 2155(MS) BCG VACCINE IMMUNOGENICITY
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日本血吸虫7d童虫cDNA文库构建及免疫筛选
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作者 韩宏晓 洪炀 +2 位作者 傅志强 彭金彪 林矫矫 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第2期92-97,共6页
为了从7 d童虫cDNA文库筛选出童虫发育阶段特异性表达抗原基因。本研究首先构建了日本血吸虫7 d童虫cDNA文库,其次再采用日本吸血虫感染血清进行筛选。结果显示:建立的文库插入片段为0.5~3.0 kb,文库重组率为98%,初始文库滴度为2.4×... 为了从7 d童虫cDNA文库筛选出童虫发育阶段特异性表达抗原基因。本研究首先构建了日本血吸虫7 d童虫cDNA文库,其次再采用日本吸血虫感染血清进行筛选。结果显示:建立的文库插入片段为0.5~3.0 kb,文库重组率为98%,初始文库滴度为2.4×10~6 pfu/mL,扩增后滴度为1.6×10~9 pfu/mL,利用感染日本血吸虫10 d和42 d的小鼠血清免疫筛选该文库,初筛和复筛后获得17条有效EST序列,其编码7个基因,分别为复制蛋白(2 ESTs)、肝再生增强因子(3 ESTs)、血小板活化因子(6 ESTs)、钙调理蛋白基因(3 EST)、丝束蛋白(1 ESTs)、核糖体RNA(1 EST)和还原型辅酶脱氢酶基因(1 EST)。该研究结果对今后探讨血吸虫的生长发育机制及筛选血吸虫早期诊断抗原具有重要意义。 展开更多
关键词 日本血吸虫 童虫cDNA文库 免疫学筛选
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日本血吸虫SjIrV1的基因特性及免疫保护效果
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作者 魏梅梅 熊雅念 +7 位作者 洪炀 黄莉妮 孟培培 艾德宙 张旻 傅志强 刘升发 林矫矫 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期891-903,共13页
钙结合蛋白是日本血吸虫生长发育不可缺少的蛋白,具有非常广泛而重要的功能。在课题组日本血吸虫体被表膜蛋白研究基础上,利用PCR技术克隆了中国大陆株日本血吸虫66 kDa钙结合蛋白(SjIrV1)编码基因的cDNA序列,BLAST分析与菲律宾株日本... 钙结合蛋白是日本血吸虫生长发育不可缺少的蛋白,具有非常广泛而重要的功能。在课题组日本血吸虫体被表膜蛋白研究基础上,利用PCR技术克隆了中国大陆株日本血吸虫66 kDa钙结合蛋白(SjIrV1)编码基因的cDNA序列,BLAST分析与菲律宾株日本血吸虫SjIrV1 cDNA编码序列一致,荧光定量PCR分析表明该基因在童虫和成虫期不同发育阶段均有表达,其中在35 d和42 d成虫中表达量较高,在42 d雌虫中该基因表达水平远高于42 d雄虫。构建重组表达质粒pET28a(+)-SjIrV1,在大肠杆菌中成功诱导表达,重组蛋白主要以可溶性形式存在,通过高效液相色谱法(RP-HPLC)以及串联质谱法(MS/MS)鉴定所获蛋白为目的蛋白SjIrV1。蛋白质印迹(Western blotting)分析结果显示重组蛋白能被感染日本血吸虫鼠血清和免疫鼠血清所识别,SjIrV1蛋白在虫体各发育阶段中均表达。免疫荧光染色实验观察表明SjIrV1主要分布在日本血吸虫成虫的表膜。应用重组蛋白免疫BALB/c小鼠后,免疫鼠血清中检测到较高水平的特异性IgG、IgG1和IgG2a抗体。结果表明SjIrV1可能在日本血吸虫的生长发育过程中起着重要作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 钙结合蛋白 表达 免疫原性 免疫保护
原文传递
日本血吸虫重组抗原rSjGALE对小鼠的免疫保护效果分析
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作者 曹宇凡 乔洪宾 +6 位作者 刘萍萍 杨云霞 石耀军 李浩 刘金明 林矫矫 金亚美 《中国动物传染病学报》 CAS 2013年第3期51-56,共6页
前期研究结果表明日本血吸虫(Schistosoma japonnicum)UDP-葡萄糖表异构酶(GALE),在抗血吸虫病方面有一定的免疫保护效果,尤其是对雌虫产卵有较大影响。为制定更适宜的免疫保护方案,本研究选用206佐剂与rSjGALE重组蛋白联合免疫动物,结... 前期研究结果表明日本血吸虫(Schistosoma japonnicum)UDP-葡萄糖表异构酶(GALE),在抗血吸虫病方面有一定的免疫保护效果,尤其是对雌虫产卵有较大影响。为制定更适宜的免疫保护方案,本研究选用206佐剂与rSjGALE重组蛋白联合免疫动物,结果表明,该蛋白与206佐剂联用有一定的免疫保护作用,免疫后小鼠产生了特异性抗体,且在减虫、减卵、减孵化等方面均有一定作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 SjGALE 206佐剂 免疫保护
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日本血吸虫mago nashi基因的克隆表达及其功能研究
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作者 彭金彪 韩宏晓 +5 位作者 洪炀 王欣之 石耀军 傅志强 刘金明 林矫矫 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期11-15,35,共6页
以日本血吸虫18 d虫体的cDNA为模板,PCR获得Sjmago nashi编码基因的全长cDNA,其开放阅读框为441 bp,将该序列提交至NCBI,登录号为GQ403668;应用荧光实时定量PCR分析该基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况。结果表明:该基因在不... 以日本血吸虫18 d虫体的cDNA为模板,PCR获得Sjmago nashi编码基因的全长cDNA,其开放阅读框为441 bp,将该序列提交至NCBI,登录号为GQ403668;应用荧光实时定量PCR分析该基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况。结果表明:该基因在不同发育阶段均有表达,在13日龄童虫表达量相对最高,32日龄次之;在不同性别成虫虫体中,该基因在雄虫的表达量远高于雌虫,说明该基因为日本血吸虫性别发育差异基因。以pET28a(+)为载体构建重组表达质粒,在大肠杆菌中表达,表达产物分子质量为19.5 ku,并以Ni-NTA HisBind Resin纯化重组蛋白。Western blotting试验显示该重组蛋白具有良好的抗原性,在小鼠免疫试验中,与空白对照组比较,免疫组小鼠获得25.94%的减虫率和30.01%的肝脏减卵率。 展开更多
关键词 日本血吸虫 mago nashi基因 克隆表达 免疫保护效果
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日本血吸虫幼虫巨大致死基因片段的克隆、表达及免疫效果分析
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作者 石艳丽 刘萍萍 +4 位作者 杨云霞 刘金明 林矫矫 宋铭忻 金亚美 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期557-561,共5页
为研究日本血吸虫(Schistosoma japonnicum)幼虫巨大致死基因(Lethal giant larvae)的生物学功能,本研究应用荧光定量RT-PCR分析SjLgL基因在S.japonnicum不同发育阶段的表达情况,构建重组表达质粒pET-SjLgL进行诱导表达,对重组蛋白进行w... 为研究日本血吸虫(Schistosoma japonnicum)幼虫巨大致死基因(Lethal giant larvae)的生物学功能,本研究应用荧光定量RT-PCR分析SjLgL基因在S.japonnicum不同发育阶段的表达情况,构建重组表达质粒pET-SjLgL进行诱导表达,对重组蛋白进行western blot鉴定;重组蛋白刺激免疫动物进行免疫保护试验,检测IL-4、IL-10、TNF-α和IFN-γ的变化。结果表明,SjLgL基因在S.japonnicum不同发育时期均有表达,成虫期略高于童虫,雄虫高于雌虫。Western blot鉴定结果显示,该重组蛋白具有良好的抗原性。免疫保护试验结果表明,免疫小鼠分别获得了22.34%的减虫率和55.49%的肝脏减卵率。血清学检测结果显示重组蛋白免疫小鼠后产生了特异性IgG抗体。细胞因子检测结果表明,重组蛋白刺激免疫动物主要诱发产生Th1型的免疫应答。本实验结果表明该重组蛋白在小鼠体内可诱导产生部分免疫保护效果。 展开更多
关键词 日本血吸虫 SjLGL 荧光实时定量PCR 免疫保护效果
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