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高效液相色谱-串联质谱法测定重组胰岛素中的异丙基硫代半乳糖苷
1
作者 金磊 王朋 +2 位作者 胡骏杰 刘飞 曹婧 《分析试验室》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第2期172-176,共5页
基于高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术,建立了多肽药物重组胰岛素中残留异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的检测方法。采用乙腈从重组胰岛素粗产品/原料药中萃取IPTG,结合亲水作用色谱(HILIC)分离,在质谱多反应监测(MRM)模式下测定。结... 基于高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术,建立了多肽药物重组胰岛素中残留异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的检测方法。采用乙腈从重组胰岛素粗产品/原料药中萃取IPTG,结合亲水作用色谱(HILIC)分离,在质谱多反应监测(MRM)模式下测定。结果表明,IPTG在0.2~100 ng/mL范围内线性关系良好(R^(2)=0.9969),定量限为0.1 ng/mL,检出限为0.025 ng/mL;在重组胰岛素原料药中加标低、中、高浓度IPTG的回收率为103.3%~106.0%,相对标准偏差为0.6%~4.2%。该方法可作为多肽药物中IPTG杂质含量的质量控制方案。 展开更多
关键词 高效液相色谱-串联质谱 多肽药物 异丙基硫代半乳糖苷 亲水作用色谱
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IPTG与乳糖联合诱导重组大肠杆菌右旋糖酐蔗糖酶表达 被引量：6
2
作者 李攀峰 张洪斌 胡雪芹 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第1期185-188,共4页
研究异丙基硫代-β-D-呋喃半乳糖苷(isopropyl-β-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)与乳糖联合诱导重组大肠杆菌右旋糖酐蔗糖酶表达的效果。在利用IPTG和乳糖分别作为诱导剂对右旋糖酐蔗糖酶工程菌Escherichia coli BL21(DE3)/pET28-de... 研究异丙基硫代-β-D-呋喃半乳糖苷(isopropyl-β-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)与乳糖联合诱导重组大肠杆菌右旋糖酐蔗糖酶表达的效果。在利用IPTG和乳糖分别作为诱导剂对右旋糖酐蔗糖酶工程菌Escherichia coli BL21(DE3)/pET28-dexYG进行诱导表达的基础上,尝试将此两种诱导剂联合使用,在降低成本的同时获得较好的表达效果。在获得最佳培养基的基础上,考察菌体IPTG与乳糖的联合加入量、菌体浓度、诱导时间对右旋糖酐蔗糖酶表达的影响。在菌浓(OD600 nm)达到3.0时,加入0.1 mmol/L IPTG 95μL+2.5 g/L乳糖,25℃混合诱导培养4 h,酶活力最高,达到40.44 U/mL。IPTG与乳糖联合诱导重组大肠杆菌右旋糖酐蔗糖酶表达可行。 展开更多
关键词 异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷 乳糖 右旋糖酐蔗糖酶 表达 联合诱导
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谷氨酰胺酶基因原核表达载体的构建与表达 被引量：2
3
作者 卢彪 吴拥军 +2 位作者 吴玉俊 罗熹 刘艳敏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第9期140-142,共3页
为验证谷氨酰胺酶基因glsA2的酶活力,以pET-32a为表达载体构建原核表达重组质粒pET32a-glsA2,转化表达菌株E.coli BL21(DE3)。从异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)的诱导浓度及诱导表达时间两方面对重组菌株glsA2基因的表达系统进行... 为验证谷氨酰胺酶基因glsA2的酶活力,以pET-32a为表达载体构建原核表达重组质粒pET32a-glsA2,转化表达菌株E.coli BL21(DE3)。从异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)的诱导浓度及诱导表达时间两方面对重组菌株glsA2基因的表达系统进行优化。结果显示,0.1mmol/L IPTG诱导6h,谷氨酰胺酶活力达到608.2U/μg,约为对照的15倍。 展开更多
关键词 谷氨酰胺酶 glsA 原核表达 iptg诱导
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DJ-1融合蛋白的原核表达、纯化和鉴定
4
作者 曲伟 蒲小平 Hiroyoshi Ariga 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1627-1628,共2页
Nagakubo等[1]在1997年发现并报道了DJ-1之后,人们研究发现DJ-1基因突变与帕金森病（Parkinsons disease,PD）相关[2],此外,DJ-1还具有转录调控、抗氧化应激等功能[3-4]。目前DJ-1逐渐成为PD的研究热点,但国内尚未见有关DJ-1蛋白原核... Nagakubo等[1]在1997年发现并报道了DJ-1之后,人们研究发现DJ-1基因突变与帕金森病（Parkinsons disease,PD）相关[2],此外,DJ-1还具有转录调控、抗氧化应激等功能[3-4]。目前DJ-1逐渐成为PD的研究热点,但国内尚未见有关DJ-1蛋白原核表达的报道。 展开更多
关键词 DJ-1 帕金森病 原核表达 大肠杆菌 氧化应激 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
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