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转基因猪骨髓间充质干细胞的分离及与猪胰岛的共培养研究
1
作者 朱淑芳 曲泽澎 +2 位作者 陆赢 潘登科 牟丽莎 《器官移植》 CSCD 北大核心 2024年第1期55-62,共8页
目的探讨α-1,3-半乳糖基转移酶(GGTA1)基因敲除(GTKO)、GTKO/人补体调节蛋白hCD46插入、单磷酸胞嘧啶-N-乙酰神经氨酸羟化酶(CMAH)/GGTA1双基因敲除(Neu5GC/Gal)猪骨髓间充质干细胞(BMSC)的分离培养,以及与猪胰岛共培养对胰岛的保护作... 目的探讨α-1,3-半乳糖基转移酶(GGTA1)基因敲除(GTKO)、GTKO/人补体调节蛋白hCD46插入、单磷酸胞嘧啶-N-乙酰神经氨酸羟化酶(CMAH)/GGTA1双基因敲除(Neu5GC/Gal)猪骨髓间充质干细胞(BMSC)的分离培养,以及与猪胰岛共培养对胰岛的保护作用。方法从不同转基因修饰GTKO、GTKO/hCD46及Neu5GC/Gal猪中提取骨髓,采用全骨髓法分离猪BMSC后进行培养。对BMSC进行形态学观察,并使用流式细胞术鉴定BMSC表面标志物。同时,观察BMSC诱导的多向分化,通过绿色荧光蛋白(GFP)转染标记猪BMSC来实现对BMSC的标记和示踪。将GFP转染标记的猪BMSC与猪胰岛细胞共培养,观察猪胰岛形态变化,与单纯猪胰岛细胞培养组进行比较。结果猪来源的BMSC在体外培养时呈梭形,表达标志物CD29、CD44、CD73、CD90、CD105及CD166,不表达CD34、CD45,具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞分化的能力;通过GFP转染标记的猪BMSC能够实现BMSC的标记和示踪,且在细胞分裂后的子代细胞中也能够稳定表达。猪BMSC对胰岛细胞有一定保护能力。结论成功建立了GFP标记的GTKO、GTKO/hCD46及Neu5GC/Gal猪来源的BMSC,其对胰岛细胞具有一定的保护能力。 展开更多
关键词 胰岛移植 1型糖尿病 间充质干细胞 基因修饰猪 分离 鉴定 共培养 排斥反应
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胰岛干细胞分离全程温度控制系统的研制 被引量：2
2
作者 冯靖祎 胡亮 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期82-87,共6页
胰岛干细胞分离过程中复合胶原酶的催化效率对温度非常敏感,因此分离过程中的温度控制对其分离质量有显著影响。为此,提出了一种简便且精度高、控制速度快的温度控制系统。该系统利用热电冷却器的快速调温功能,通过控制变温元件两端的... 胰岛干细胞分离过程中复合胶原酶的催化效率对温度非常敏感,因此分离过程中的温度控制对其分离质量有显著影响。为此,提出了一种简便且精度高、控制速度快的温度控制系统。该系统利用热电冷却器的快速调温功能,通过控制变温元件两端的电压极性实现制冷和制热,并利用单片机调节PID参数,从而实现对目标温度的调控。实验结果表明,该系统能够达到升降温温度过冲小于0.5℃,恒温精度±0.3℃,对胰岛干细胞分离的数量和活性有显著的提高。 展开更多
关键词 胰岛干细胞分离 PID控制 温度控制 热电冷却器
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一种新型温控系统在胰岛干细胞分离中的应用 被引量：1
3
作者 胡亮 冯靖祎 吕颖莹 《中国医疗设备》 2010年第11期14-16,共3页
基于半导体变温的温度控制系统应用于胰岛干细胞分离,探索胰岛干细胞分离过程温度精密控制对胰岛干细胞分离效果的影响。温度控制系统利用热电冷却器的快速调温功能,并利用单片机调节PID参数,从而实现对目标温度的调控。采用雄性Balb/c... 基于半导体变温的温度控制系统应用于胰岛干细胞分离,探索胰岛干细胞分离过程温度精密控制对胰岛干细胞分离效果的影响。温度控制系统利用热电冷却器的快速调温功能,并利用单片机调节PID参数,从而实现对目标温度的调控。采用雄性Balb/c小鼠作为供体分离胰岛,比较不同的胰岛分离过程温度控制方式得到的胰岛的效果差异。本温度控制系统应用后,每只小鼠胰腺分离纯化后收获量为(109±32)IEQ,胰岛纯度为96.2%±1.9%。 展开更多
关键词 胰岛干细胞分离 PID控制 热电冷却器 温度控制
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