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泛素特异性蛋白酶15稳定着色性干皮病F蛋白并促进DNA链间交联损伤修复
被引量：
3
1
作者
耿瑞
赵美美
王嘉东
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期509-516,共8页
着色性干皮病F蛋白(xeroderma pigmentosum group F,XPF)和切除修复交叉互补组1蛋白(excision repair cross complementing group 1,ERCC1)组成一种结构特异性的核酸内切酶(XPFERCC1)复合物,参与DNA链间交联(interstrand crosslink,ICL...
着色性干皮病F蛋白(xeroderma pigmentosum group F,XPF)和切除修复交叉互补组1蛋白(excision repair cross complementing group 1,ERCC1)组成一种结构特异性的核酸内切酶(XPFERCC1)复合物,参与DNA链间交联(interstrand crosslink,ICL)损伤修复。其中,XPF蛋白的去泛素化修饰对DNA损伤修复的影响尚未见报道。本工作主要研究泛素特异性蛋白酶15 (ubiquitinspecific protease 15,USP15)对XPF的稳定性及ICL修复的影响。本研究通过蛋白质质谱和Western印迹法分析发现,XPF蛋白与USP15存在相互作用,进而使XPF蛋白去泛素化修饰;采用CRISPR-Cas9技术构建USP15基因敲除的He La细胞株(USP15 KO)并进行Western印迹分析,结果显示,敲除组XPF蛋白水平低于对照组(P<0. 001)。克隆形成试验显示,在ICL诱导剂顺铂(cisplatin,DDP)和丝裂霉素C (mitomycin,MMC)的作用下,USP15基因敲除的HeLa细胞增殖能力显著降低(P<0. 01)。本研究表明,去泛素化酶USP15是一种重要的DNA修复调节因子,该酶通过稳定XPF蛋白促进由XPF-ERCC1介导的ICL修复。本研究为改善ICL诱导剂类抗癌药物的耐药性提供了理论依据,并为肿瘤的治疗提供了潜在的新靶点。
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关键词
泛素特异性蛋白酶USP15
核酸内切酶XPF-ERCC1
去泛素化修饰
链间交联损伤
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题名
泛素特异性蛋白酶15稳定着色性干皮病F蛋白并促进DNA链间交联损伤修复
被引量：
3
1
作者
耿瑞
赵美美
王嘉东
机构
北京大学基础医学院放射医学教研室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期509-516,共8页
基金
国家自然科学基金(No.81472906
No.81672981)
+1 种基金
重大慢性非传染性疾病防控研究专项基金(No.2016YFC1302101)
蛋白质机器与生命过程调控专项基金(No.2017YFA0503900)资助~~
文摘
着色性干皮病F蛋白(xeroderma pigmentosum group F,XPF)和切除修复交叉互补组1蛋白(excision repair cross complementing group 1,ERCC1)组成一种结构特异性的核酸内切酶(XPFERCC1)复合物,参与DNA链间交联(interstrand crosslink,ICL)损伤修复。其中,XPF蛋白的去泛素化修饰对DNA损伤修复的影响尚未见报道。本工作主要研究泛素特异性蛋白酶15 (ubiquitinspecific protease 15,USP15)对XPF的稳定性及ICL修复的影响。本研究通过蛋白质质谱和Western印迹法分析发现,XPF蛋白与USP15存在相互作用,进而使XPF蛋白去泛素化修饰;采用CRISPR-Cas9技术构建USP15基因敲除的He La细胞株(USP15 KO)并进行Western印迹分析,结果显示,敲除组XPF蛋白水平低于对照组(P<0. 001)。克隆形成试验显示,在ICL诱导剂顺铂(cisplatin,DDP)和丝裂霉素C (mitomycin,MMC)的作用下,USP15基因敲除的HeLa细胞增殖能力显著降低(P<0. 01)。本研究表明,去泛素化酶USP15是一种重要的DNA修复调节因子,该酶通过稳定XPF蛋白促进由XPF-ERCC1介导的ICL修复。本研究为改善ICL诱导剂类抗癌药物的耐药性提供了理论依据,并为肿瘤的治疗提供了潜在的新靶点。
关键词
泛素特异性蛋白酶USP15
核酸内切酶XPF-ERCC1
去泛素化修饰
链间交联损伤
Keywords
ubiquitin-specific
protease
15
endonuclease
XPF-ERCC1
deubiquitination
interstrand
crosslink
(
icl
)
分类号
Q75 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
泛素特异性蛋白酶15稳定着色性干皮病F蛋白并促进DNA链间交联损伤修复
耿瑞
赵美美
王嘉东
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
3
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