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腹腔内注射IL-2重组腺病毒、IL-3重组腺病毒增强化疗药物抗白血病作用的研究
1
作者 于敏 杨建民 +2 位作者 孟沛霖 曹雪涛 章卫平 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第3期191-194,共4页
对实验性白血病小鼠模型大剂量化疗后,直接腹腔注射IL-2重组腺病毒(Ad-IL-2)和/或IL-3重组腺病毒(Ad-IL-3),发现腹腔注射对照腺病毒载体小鼠虽经大剂量化疗,仍有大量白血病细胞浸润至骨髓、血管、肝脏及脾脏。而腹腔注射Ad-IL-2或Ad-IL-... 对实验性白血病小鼠模型大剂量化疗后,直接腹腔注射IL-2重组腺病毒(Ad-IL-2)和/或IL-3重组腺病毒(Ad-IL-3),发现腹腔注射对照腺病毒载体小鼠虽经大剂量化疗,仍有大量白血病细胞浸润至骨髓、血管、肝脏及脾脏。而腹腔注射Ad-IL-2或Ad-IL-3组小鼠肿瘤生长缓慢,注射Ad-IL-2组小鼠脾NK、CTL活性显著提高,注射Ad-IL-3组小鼠腹腔巨噬细胞数量及杀伤活性明显提高,联合应用Ad-IL-2,Ad-IL-3组小鼠抗白血病作用最为明显,骨髓中虽然仍见白血病细胞,但可见较多正常造血细胞,且肝、脾中未见白血病细胞浸润。表明腹腔内注射Ad-IL-2和Ad-IL-3可显著增强大剂量化疗对白血病的治疗效果。 展开更多
关键词 腹腔内注射 IL-2 重组腺病毒 IL-3 重组腺病毒 抗白血病作用 化疗药物
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白细胞介素2-乙型肝炎病毒前S抗原融合蛋白的免疫原性研究 被引量：7
2
作者 陈章国 马大龙 +3 位作者 张颖妹 宋泉声 狄春辉 万艳平 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期34-37,共4页
为协同人白细胞介素与乙型肝炎病毒前Ｓ抗原的生物学功能，探索治疗慢性乙肝的特异性免疫药物。方法用聚合酶链反应和基因重组技术构建了ＨＢＶ完整前Ｓ抗原和ＩＬ－２的嵌合基因，并在大肠杆菌中高效表达了ＩＬ－２－前Ｓ抗原融合蛋白... 为协同人白细胞介素与乙型肝炎病毒前Ｓ抗原的生物学功能，探索治疗慢性乙肝的特异性免疫药物。方法用聚合酶链反应和基因重组技术构建了ＨＢＶ完整前Ｓ抗原和ＩＬ－２的嵌合基因，并在大肠杆菌中高效表达了ＩＬ－２－前Ｓ抗原融合蛋白。结果该融合蛋白保留了ＩＬ－２和前Ｓ抗原天然分子的生物学活性，能维持白细胞介素２依赖株细胞增殖，其比活性１０＾７Ｕ／ｍｇ蛋白。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 前S抗原 白细胞介素-2 融合蛋白
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人源抗HBsAg单链抗体与白细胞介素2融合蛋白在巴氏毕赤酵母中的表达 被引量：4
3
作者 陈文吟 粟宽源 +1 位作者 饶桂荣 余宙耀 《天津医药》 CAS 北大核心 2004年第12期752-754,共3页
目的 :探讨抗HBsAg单链抗体与白细胞介素 2融合蛋白在巴氏毕赤酵母 (P .Pastoris)中的表达以及初步的纯化、活性鉴定方法。方法 :用PCR将目的蛋白基因从质粒PGEM7Zf(+) HBScFv IL 2上扩增出来 ,再亚克隆到酵母表达载体pPICZаA中 ,转化... 目的 :探讨抗HBsAg单链抗体与白细胞介素 2融合蛋白在巴氏毕赤酵母 (P .Pastoris)中的表达以及初步的纯化、活性鉴定方法。方法 :用PCR将目的蛋白基因从质粒PGEM7Zf(+) HBScFv IL 2上扩增出来 ,再亚克隆到酵母表达载体pPICZаA中 ,转化P .Pastoris宿主菌GS 115 ,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定转化子 ,重组酵母经甲醇诱导后 ,通过SDS PAGE及Western blot分析鉴定表达产物 ;再通过亲和层析法纯化目的蛋白 ;用间接ELISA实验鉴定其活性。结果 :表达的重组蛋白分子质量约为 4 4ku ,表达量可达 12 % ;纯化后凝胶成像分析目的蛋白的纯度达到95 % ;重组融合蛋白能与HBsAg、鼠抗IL 2单克隆抗体特异性结合。结论 :成功构建了抗HBsAg单链抗体与IL - 2融合蛋白酵母表达工程菌 ,并初步建立了对目的蛋白的纯化及活性鉴定方法。 展开更多
关键词 抗HBsAg单链抗体 白细胞介素2 融合蛋白 巴氏毕赤酵母 基因表达 慢性乙型肝炎
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rhTNFα加rhIL-2诱导小鼠CNE3细胞凋亡和抑制增殖的体内实验研究 被引量：4
4
作者 焦伟 刘时才 +1 位作者 莫祥兰 黄振录 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期549-551,共3页
目的：研究重组人肿瘤坏死因子（rhTNF－α）对鼻咽癌细胞敏感性、重组人白细胞介素－2（rhIL－2）协同抗瘤效应及抗瘤机理。方法：利用我室建立的鼻咽癌细胞株（CNE3）制成的裸鼠鼻咽癌模型，rhTNFα通过与rhIL－2配伍瘤内注射以观察... 目的：研究重组人肿瘤坏死因子（rhTNF－α）对鼻咽癌细胞敏感性、重组人白细胞介素－2（rhIL－2）协同抗瘤效应及抗瘤机理。方法：利用我室建立的鼻咽癌细胞株（CNE3）制成的裸鼠鼻咽癌模型，rhTNFα通过与rhIL－2配伍瘤内注射以观察移植瘤超微结构及免疫组织化学的改变，探讨其作用机理。结果：鼻咽癌裸鼠移植瘤经治疗后出现坏死、体积缩小、甚至消失；超微结构观察凋亡细胞缩皱，核内异染色质边集；免疫组化研究发现：rhTNF－α有下调（突变型）p53和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达，其可能与rhTNF－α的抗癌机理有关；rhIL－2能增强rhTNF－α的抗瘤作用。结论：rhIL－2增强rhTNF－α的抗瘤机理可能与IL－2诱导癌细胞表达TNF受体作用有关，该研究为临床在鼻咽镜下进行TNF局部治疗提供实验依据。 展开更多
关键词 重组人肿瘤坏死因子α 白细胞介素-2 鼻咽癌细胞株 裸鼠 抑瘤效应 RHTNFΑ RHIL-2
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抗HBsAg单链抗体与白细胞介素-2融合蛋白的构建与序列测定 被引量：3
5
作者 陈文吟 粟宽源 +3 位作者 任向荣 唐永红 郑业华 余宙耀 《天津医药》 CAS 北大核心 2002年第8期475-477,F003,共4页
目的:构建以人抗乙肝表面抗原（HBsAg）单链抗体（ScFv）为导向作用,白细胞介素-2（IL-2）为治疗作用的融合蛋白原核表达载体pQE 40/ScFv-IL-2。方法:应用PCR技术将抗HBsAg单链抗体与白细胞介素-2在分子水平上进行基因重组,构建中间载体... 目的:构建以人抗乙肝表面抗原（HBsAg）单链抗体（ScFv）为导向作用,白细胞介素-2（IL-2）为治疗作用的融合蛋白原核表达载体pQE 40/ScFv-IL-2。方法:应用PCR技术将抗HBsAg单链抗体与白细胞介素-2在分子水平上进行基因重组,构建中间载体pGEM7Zf（+）/ScFv-IL-2,经酶切鉴定及序列测定正确后,将目的基因片段克隆到pQE 40表达载体中,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达。结果:SDS-PAGE结果显示在相对分子质量约4.3×104Da处,可见蛋白表达带。以鼠抗人IL-2单克隆抗体经免疫印迹验证,该表达蛋白为所设计的融合蛋白。结论:融合蛋白ScFv-IL-2的成功构建及表达,为融合蛋白的纯化和研究开发新型的乙肝导向治疗的基因工程药物打下良好的基础。 展开更多
关键词 抗HBsAg单链抗体 白细胞介素-2 序列测定 基因重组 融合蛋白 免疫印迹法
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Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在BHK细胞表达鼠IL-2蛋白的研究
6
作者 黄大林 戴支凯 +2 位作者 王鑫 李彬彬 钟江 《天津医药》 CAS 北大核心 2011年第2期145-148,共4页
目的:利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在BHK细胞表达重组鼠白细胞介素(IL)-2蛋白。方法:用Flag标记鼠IL-2并加入真核细胞启动子CMV,构建重组质粒pFB-CMV-IL-2并予酶切和PCR鉴定;将鼠IL-2克隆入杆状病毒表达载体pFastBacDual中,将pFB-CMV... 目的:利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在BHK细胞表达重组鼠白细胞介素(IL)-2蛋白。方法:用Flag标记鼠IL-2并加入真核细胞启动子CMV,构建重组质粒pFB-CMV-IL-2并予酶切和PCR鉴定;将鼠IL-2克隆入杆状病毒表达载体pFastBacDual中,将pFB-CMV-IL-2转化到含杆状病毒穿梭载体Bacmid的DH10Bac感受态菌中,筛选阳性克隆,获得重组杆状病毒载体Bacmid-pFB-CMV-IL-2,抽提质粒;用脂质体转染法将Bacmid-pFB-CMV-IL-2转染Sf9昆虫细胞包装病毒,收获重组杆状病毒,将构建病毒转导BHK细胞培养,用Western blot检测IL-2蛋白。结果:通过杆状病毒表达系统,在BHK细胞成功表达重组的鼠IL-2蛋白。结论:重组杆状病毒在真核细胞中成功表达重组鼠IL-2蛋白。 展开更多
关键词 白细胞介素2 重组蛋白质类 杆状病毒科 遗传载体 质粒 聚合酶链反应 小鼠 近交系
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