目的:探讨激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of the femoral head,SONFH)滑膜病变的分子机制。方法:(1)转录组测序及生物信息学分析。收集9例接受全髋关节置换术的患者(SONFH患者3例、髋骨关节炎患者3例和股骨颈骨折患者...目的:探讨激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of the femoral head,SONFH)滑膜病变的分子机制。方法:(1)转录组测序及生物信息学分析。收集9例接受全髋关节置换术的患者(SONFH患者3例、髋骨关节炎患者3例和股骨颈骨折患者3例)术中切除的髋关节滑膜组织,进行转录组测序和生物信息学分析,筛选SONFH滑膜病变核心基因。(2)滑膜组织检测。根据标本来源将髋关节滑膜组织分为SONFH组、髋骨关节炎组和股骨颈骨折组。观察各组髋关节滑膜组织的组织形态,采用实时定量PCR检测3组髋关节滑膜组织中SONFH滑膜病变核心基因的mRNA相对表达量,采用蛋白质印迹法和免疫组织化学染色法检测3组髋关节滑膜组织中SONFH滑膜病变核心基因的蛋白相对表达量。采用免疫荧光染色法检测SONFH滑膜病变的靶细胞。(3)细胞验证。培养大鼠滑膜成纤维细胞,构建滑膜炎细胞模型。采用实时定量PCR及蛋白质印迹法检测空白细胞(空白细胞组)和滑膜炎模型细胞(模型细胞组)中SONFH滑膜病变核心基因的表达。结果:(1)转录组测序和生物信息学分析结果。经对不同患者来源的髋关节滑膜组织进行差异基因分析,共筛选出1001个与SONFH髋关节滑膜病变相关的基因,这些基因与免疫反应和外泌体有关,其中干扰素调节因子(interferon regulatory factor,IRF)4和IRF7是SONFH髋关节滑膜病变的核心基因,两者均为参与Ⅰ型干扰素应答的关键转录因子。(2)滑膜组织形态观察结果。苏木素-伊红染色显示,股骨颈骨折组髋关节滑膜组织形态正常,无细胞增生、肥大或间质水肿;髋骨关节炎组髋关节滑膜组织细胞增生,有少量新生血管和细胞聚集;SONFH组髋关节滑膜组织细胞大量增殖和聚集,有新生血管。(3)滑膜组织中SONFH滑膜病变核心基因表达检测结果。SONFH组髋关节滑膜组织中IRF4、IRF7、干扰素-α(interferon-α,IFN-α)的mRNA相�展开更多
文摘目的:探讨激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of the femoral head,SONFH)滑膜病变的分子机制。方法:(1)转录组测序及生物信息学分析。收集9例接受全髋关节置换术的患者(SONFH患者3例、髋骨关节炎患者3例和股骨颈骨折患者3例)术中切除的髋关节滑膜组织,进行转录组测序和生物信息学分析,筛选SONFH滑膜病变核心基因。(2)滑膜组织检测。根据标本来源将髋关节滑膜组织分为SONFH组、髋骨关节炎组和股骨颈骨折组。观察各组髋关节滑膜组织的组织形态,采用实时定量PCR检测3组髋关节滑膜组织中SONFH滑膜病变核心基因的mRNA相对表达量,采用蛋白质印迹法和免疫组织化学染色法检测3组髋关节滑膜组织中SONFH滑膜病变核心基因的蛋白相对表达量。采用免疫荧光染色法检测SONFH滑膜病变的靶细胞。(3)细胞验证。培养大鼠滑膜成纤维细胞,构建滑膜炎细胞模型。采用实时定量PCR及蛋白质印迹法检测空白细胞(空白细胞组)和滑膜炎模型细胞(模型细胞组)中SONFH滑膜病变核心基因的表达。结果:(1)转录组测序和生物信息学分析结果。经对不同患者来源的髋关节滑膜组织进行差异基因分析,共筛选出1001个与SONFH髋关节滑膜病变相关的基因,这些基因与免疫反应和外泌体有关,其中干扰素调节因子(interferon regulatory factor,IRF)4和IRF7是SONFH髋关节滑膜病变的核心基因,两者均为参与Ⅰ型干扰素应答的关键转录因子。(2)滑膜组织形态观察结果。苏木素-伊红染色显示,股骨颈骨折组髋关节滑膜组织形态正常,无细胞增生、肥大或间质水肿;髋骨关节炎组髋关节滑膜组织细胞增生,有少量新生血管和细胞聚集;SONFH组髋关节滑膜组织细胞大量增殖和聚集,有新生血管。(3)滑膜组织中SONFH滑膜病变核心基因表达检测结果。SONFH组髋关节滑膜组织中IRF4、IRF7、干扰素-α(interferon-α,IFN-α)的mRNA相�
