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干扰素诱导蛋白204抑制大鼠血管外膜成纤维细胞增殖 被引量：1
1
作者 龙向淑 黄晶 +3 位作者 吴强 田茂波 宋方 肖燕 《贵阳医学院学报》 CAS 2016年第5期502-506,共5页
目的:探讨干扰素诱导蛋白204(p204)对大鼠血管外膜成纤维细胞(VAFs)增殖的影响及可能机制。方法:将大鼠VAFs分为空白对照组(N组)、非特异性小干扰RNA(siRNA)转染组(control组)、IFN-α干预组(IFN-α组)及Ifi204 siRNA转染组(Ifi204 siRN... 目的:探讨干扰素诱导蛋白204(p204)对大鼠血管外膜成纤维细胞(VAFs)增殖的影响及可能机制。方法:将大鼠VAFs分为空白对照组(N组)、非特异性小干扰RNA(siRNA)转染组(control组)、IFN-α干预组(IFN-α组)及Ifi204 siRNA转染组(Ifi204 siRNA组),给予相应处理;应用Real Time qRT-PCR法检测p204mRNA表达,MTT比色法测定细胞活力,流式细胞仪分析细胞周期,Western blot检测p204、Ras蛋白表达及Raf与Erk磷酸化水平。结果:与N组比较,IFN-α组p204 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05),细胞活力下降,细胞周期G_1/S转换下调(P<0.05),伴Ras蛋白表达减少,Raf及Erk磷酸化水平下降(P<0.05);Ifi204 siRNA组p204 mRNA及蛋白表达下调(P<0.05),细胞活力增高,G_0/G_1期细胞减少,S期细胞增多(P<0.05),Ras蛋白表达增多,Raf及Erk磷酸化水平升高(P<0.05);而control组上述指标与N组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:p204表达可抑制大鼠VAFs增殖,Ras信号通路可能参与p204对VAFs增殖的调控。 展开更多
关键词 干扰素诱导蛋白204 成纤维细胞 增殖 Ras信号通路 大鼠 Sprague-Dawley
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干扰素诱导蛋白p204表达变化对大鼠血管平滑肌细胞增殖及p21表达的影响 被引量：8
2
作者 龙向淑 吴强 宋方 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期249-252,共4页
目的:观察干扰素诱导蛋白p204对鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及p21表达的影响,探讨p204在VSMCs增殖调控中的作用及可能机制。方法:应用干扰素α(IFN-α)处理和p204基因(Ifi204)的小干扰RNA(siRNA)瞬时干预体外培养的VSMCs,用MTT法测定... 目的:观察干扰素诱导蛋白p204对鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及p21表达的影响,探讨p204在VSMCs增殖调控中的作用及可能机制。方法:应用干扰素α(IFN-α)处理和p204基因(Ifi204)的小干扰RNA(siRNA)瞬时干预体外培养的VSMCs,用MTT法测定细胞活力反映细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期,用半定量RT-PCR法和Western blotting分别检测p204和p21的mRNA和蛋白表达。结果:IFN-α可诱导鼠VSMCsp204 mRNA和蛋白表达上调,降低VSMCs细胞活力和细胞周期G1/S转换,伴p21 mRNA和蛋白表达上调。转染Ifi204 siRNA可抑制p204和p21表达,提高VSMCs细胞活力和促进细胞周期G1/S转换。结论:p204表达可抑制鼠VSMCs的增殖,该效应可能与激活p21表达有关。 展开更多
关键词 干扰素 干扰素诱导蛋白 p204 血管平滑肌细胞 小干扰RNA
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RAS信号途径参与干扰素-α抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖 被引量：5
3
作者 龙向淑 吴强 +2 位作者 宋方 黄晶 张林军 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第7期882-885,共4页
目的探讨RAS信号途径在干扰素-α(IFN-α)抑制大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖中的作用。方法应用转染IFI204 siRNA和/或IFN-α瞬时干预体外培养的大鼠VSMCs,以非特异性siRNA转染组为对照组,用MTT法测定细胞活力,流式细胞仪分析细胞周期,... 目的探讨RAS信号途径在干扰素-α(IFN-α)抑制大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖中的作用。方法应用转染IFI204 siRNA和/或IFN-α瞬时干预体外培养的大鼠VSMCs,以非特异性siRNA转染组为对照组,用MTT法测定细胞活力,流式细胞仪分析细胞周期,RT-PCR法和Western blot分别检测P204 mRNA、P204和Ras蛋白的表达及RAF与ERK的磷酸化水平。结果与对照组比较,IFN-α组P204 mRNA和蛋白表达上调(P<0.01),细胞活力和细胞周期G1/S转换下调(P<0.01),伴RAS蛋白表达减少(P<0.01),RAF及ERK磷酸化水平下降(P<0.01);转染IFI204 siRNA后再加IFN-α干预,P204 mRNA及蛋白表达下调(P<0.01),而G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(P<0.01),且RAS蛋白表达和RAF及ERK磷酸化水平亦下调(P<0.01)。结论 RAS信号途径参与IFN-α抑制大鼠VSMCs增殖。 展开更多
关键词 干扰素 血管平滑肌细胞 增殖 干扰素诱导蛋白 P204 RAS信号途径
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抑制干扰素诱导蛋白p204表达促进大鼠血管外膜成纤维细胞生长与迁移 被引量：4
4
作者 宋方 田茂波 +2 位作者 黄晶 龙向淑 吴强 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2016年第1期18-22,共5页
目的观察干扰素诱导蛋白p204表达抑制后对大鼠血管外膜成纤维细胞(VAF)凋亡、增殖与迁移的影响及其部分机制。方法应用Ifi204小干扰RNA(si RNA)转染VAF使Ifi204基因沉默(Ifi204-si RNA组),以非特异性si RNA转染作为其转染阴性对照组(Con... 目的观察干扰素诱导蛋白p204表达抑制后对大鼠血管外膜成纤维细胞(VAF)凋亡、增殖与迁移的影响及其部分机制。方法应用Ifi204小干扰RNA(si RNA)转染VAF使Ifi204基因沉默(Ifi204-si RNA组),以非特异性si RNA转染作为其转染阴性对照组(Con-si RNA组)和未经处理的VAF作为未干预阴性对照组(Neg组)。用MTT法检测VAF细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,细胞划痕法和Transwell法测定细胞迁移情况,应用实时荧光q RT-PCR和Western blot分别检测p204、p53及p21的m RNA和蛋白表达。结果与Con-si RNA组和(或)Neg组相比,Ifi204-si RNA组的p204、p53及p21的m RNA和蛋白表达减少(P<0.05),细胞凋亡率下降(P<0.05),细胞增殖及迁移速度提高(P<0.05)。结论抑制p204表达可减少大鼠VAF细胞凋亡,促进其增殖与迁移,其机制可能部分与抑制p53及p21表达有关。 展开更多
关键词 干扰素诱导蛋白p204 血管外膜成纤维细胞 细胞凋亡 细胞增殖 细胞迁移
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干扰素α通过P204和P21诱导大鼠原代血管平滑肌细胞凋亡 被引量：3
5
作者 龙向淑 吴强 +2 位作者 宋方 黄晶 张林军 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第12期1635-1639,共5页
目的探讨干扰素-α(IFN-α)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的影响。方法应用转染IFI204 siRNA和/或IFN-α瞬时干预体外培养的大鼠VSMCs,以非特异性siRNA转染组为对照组,RT-PCR法检测P204及P21mRNA表达,Western blot检测P204及P21蛋白... 目的探讨干扰素-α(IFN-α)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的影响。方法应用转染IFI204 siRNA和/或IFN-α瞬时干预体外培养的大鼠VSMCs,以非特异性siRNA转染组为对照组,RT-PCR法检测P204及P21mRNA表达,Western blot检测P204及P21蛋白表达,流式细胞仪Annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡。结果与对照组比较,IFN-α组P204 mRNA和蛋白表达上调(P<0.01),细胞凋亡增多(P<0.01),伴P21 mRNA和蛋白表达增多(P<0.01);IFI204 siRNA转染组P204 mRNA和蛋白表达下调(P<0.01),细胞凋亡减少(P<0.01),P21mRNA和蛋白表达减少(P<0.01);转染IFI204 siRNA后再加IFN-α干预,P204 mRNA及蛋白表达下调(P<0.01),但P21mRNA及蛋白表达增多(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01)。结论 P204及P21参与IFN-α诱导大鼠VSMCs凋亡过程的调控。 展开更多
关键词 干扰素 血管平滑肌细胞 凋亡 干扰素诱导蛋白 P204
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转染携带Ifi204基因的慢病毒上调大鼠主动脉成纤维细胞的p204表达
6
作者 胡慧 吴强 田茂波 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第2期158-162,共5页
目的观察转染携带Ifi204基因的慢病毒对大鼠血管外膜成纤维细胞p204表达的影响。方法培养大鼠主动脉外膜成纤维细胞(VAF),免疫细胞化学鉴定细胞类型及纯度。用携带Ifi204基因的慢病毒载体系统转染体外培养的大鼠成纤维细胞(Ifi204组),... 目的观察转染携带Ifi204基因的慢病毒对大鼠血管外膜成纤维细胞p204表达的影响。方法培养大鼠主动脉外膜成纤维细胞(VAF),免疫细胞化学鉴定细胞类型及纯度。用携带Ifi204基因的慢病毒载体系统转染体外培养的大鼠成纤维细胞(Ifi204组),分别以空载慢病毒处理和未处理的大鼠成纤维细胞作为对照组(C组)和空白组(N组)。用q-PCR技术和Western blot检测细胞中p204 mRNA和蛋白表达。结果 p204在N组存在结构表达。与N组和C组比较,Ifi204组的p204 mRNA及蛋白表达均上调(P<0.01)。结论转染携带Ifi204基因的慢病毒可上调大鼠VAF的p204表达。 展开更多
关键词 干扰素诱导蛋白 P204 慢病毒载体 转染 成纤维细胞 大鼠
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