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题名斑马鱼myo7ab基因敲除品系的构建
被引量：2
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作者
谢缤灵
邓慧玲
付贵芳
王金福
谢鼎华
谢华平
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机构
湖南师范大学动物肠道功能调控湖南省重点实验室
湖南师范大学动物营养与人体健康实验室
湖南师范大学淡水鱼类发育生物学国家重点实验室
中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉科
浙江大学生命科学学院细胞与发育生物学研究所
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出处
《激光生物学报》
CAS
2021年第3期217-222,共6页
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基金
国家自然科学基金项目(31970504)
湖南省自然科学基金项目(2019JJ50860)
+3 种基金
湖南省卫生健康委科研计划项目(20200666)
湖湘高层次人才聚集工程项目(2018RS3069)
湖南省科技领军人才项目(2019RS3022)
省计划创新引导计划项目(2018SK52513)。
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文摘
MYO7A是人类Usher综合征(US)的致病基因。由MYO7A突变导致的Usher综合征病例占Usher综合征1型病例的29%~55%。研究发现人类MYO7A突变能够导致Usher综合征1B型(USH1B),包括感觉神经性听力损伤及年龄依赖性视网膜色素变性(RP),但其分子机制尚不清楚。为了研究该基因在内耳及视网膜发育中的具体分子作用机制,利用Cloning free CRISPR/Cas9基因编辑技术构建斑马鱼myo7ab基因敲除品系。首先,通过分析软件筛选出该基因的敲除位点,利用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增该基因的向导DNA(gDNA),再以gDNA为模板转录得到向导RNA(gRNA),将gRNA和Cas9蛋白共同注射到斑马鱼1细胞期胚胎中;随后,进行基因编辑的有效性检测。研究结果表明,CRISPR/Cas9系统对该基因的敲除有效。对其进行进一步筛选,成功获得斑马鱼myo7ab基因敲除突变品系,这为研究该基因在内耳及视网膜发育过程中的作用奠定了基础。
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关键词
斑马鱼
CRISPR/Cas9
myo7ab基因
内耳及视网膜发育
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Keywords
zebrafish
CRISPR/Cas9
myo7ab gene
inner ear and retina development
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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