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Bone-conditioned medium contributes to initiation and progression of osteogenesis by exhibiting synergistic TGF-β1/BMP-2 activity 被引量:18
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作者 Maria B.Asparuhova Jordi Caballé-Serrano +1 位作者 Daniel Buser Vivianne Chappuis 《International Journal of Oral Science》 SCIE CAS CSCD 2018年第4期203-211,共9页
Guided bone regeneration (GBR) often utilizes a combination of autologous bone grafts, deproteinized bovine bone mineral(DBBM), and collagen membranes. DBBM and collagen membranes pre-coated with bone-conditioned medi... Guided bone regeneration (GBR) often utilizes a combination of autologous bone grafts, deproteinized bovine bone mineral(DBBM), and collagen membranes. DBBM and collagen membranes pre-coated with bone-conditioned medium (BCM) extracted from locally harvested autologous bone chips have shown great regenerative potential in GBR. However, the underlying molecular mechanism remains largely unknown. Here, we investigated the composition of BCM and its activity on the osteogenic potential of mesenchymal stromal cells. We detected a fast and significant (P <0.001) release of transforming growth factor-β1 (TGF-β1) from autologous bone within 10 min versus a delayed bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) release from 40 min onwards. BCMs harvested within short time periods (10, 20, or 40 min), corresponding to the time of a typical surgical procedure, significantly increased the proliferative activity and collagen matrix production of BCM-treated cells. Long-term (1, 3, or 6 days)-extracted BCMs promoted the later stages of osteoblast differentiation and maturation. Short-term-extracted BCMs, in which TGF-β1 but no BMP-2was detected, reduced the expression of the late differentiation marker osteocalcin. However, when both growth factors were present simultaneously in the BCM, no inhibitory effects on osteoblast differentiation were observed, suggesting a synergistic TGF-β1/BMP-2 activity. Consequently, in cells that were co-stimulated with recombinant TGF-β1 and BMP-2, we showed a significant stimulatory and dose-dependent effect of TGF-β1 on BMP-2-induced osteoblast differentiation due to prolonged BMP signaling and reduced expression of the BMP-2 antagonist noggin. Altogether, our data provide new insights into the molecular mechanisms underlying the favorable outcome from GBR procedures using BCM, derived from autologous bone grafts. 展开更多
关键词 Bone-conditioned medium contributes to initiation and progression of osteogenesis by exhibiting synergistic TGF BMP-2 activity
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基团转移聚合单体引发活性研究 被引量:6
2
作者 夏海平 邹友思 潘容华 《高分子学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1991年第2期225-229,共5页
基团转移聚合(GTP)是Webster等发现的一种合成高分子的新手段,能在相当温和的条件下进行,能成功地控制聚合过程及产物的微观结构,从而达到控制产品性能的目的。因此在高分子设计方面具有重要的地位。 适用于GTP的单体目前主要有三类:丙... 基团转移聚合(GTP)是Webster等发现的一种合成高分子的新手段,能在相当温和的条件下进行,能成功地控制聚合过程及产物的微观结构,从而达到控制产品性能的目的。因此在高分子设计方面具有重要的地位。 适用于GTP的单体目前主要有三类:丙烯腈,丙烯酸酯及甲基丙烯酸酯类化合物。 展开更多
关键词 基团转移聚合 单体引发活性 GTP
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The Crested Ibises expanding to plain areas exhibit a higher tolerance of human proximity
3
作者 Yuqi Zou Yiting Jiang +2 位作者 Zitan Song Xiaobin Fang Changqing Ding 《Avian Research》 SCIE CSCD 2024年第1期60-65,共6页
Animals must strike a balance between anti-predation behavior and other essential behaviors,such as foraging.Within the same species,strategies may vary on individuals’risk-taking preferences,and in this process the ... Animals must strike a balance between anti-predation behavior and other essential behaviors,such as foraging.Within the same species,strategies may vary on individuals’risk-taking preferences,and in this process the environment is a determinant,in addition to predator regime.The Crested Ibis(Nipponia nippon)exhibits such tendency.This is an endangered species,once inhabiting exclusively in China’s Qinling Mountain.This used to be the sole remaining wild population.However,over recent decades,this population has expanded.A portion has relocated to breed in the lower plain area,which is characterized by elevated level of human activities and landscape complexity.We used flight initiation distance(FID)as an indicator of the ibises’risk-taking preference,particularly their response to human proximity.Additionally,we examined the environmental factors influencing their foraging site selection,including altitude,terrain openness,human activity intensity and human construction.Our findings revealed a significantly shorter FID among individuals relocating to plain habitats,indicating a higher tolerance of human proximity.The results showed that FID decreased with distance to the nearest human settlement.Another finding is that FID was independent of instant human activity intensity and environmental factors(altitude and terrain openness).These different may arise from various combinations of human activity,predation risk,and food abundance within the two habitats.These results provide insights into the in situ conservation of the threatened species within the context of global urbanization. 展开更多
关键词 Anti-predation behavior Flight initiation distance Habitat expansion Human activity Nipponia nippon
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阿尔金断裂带中中新世以来构造变形的电子自旋共振测年证据 被引量:3
4
作者 李萌 汤良杰 +2 位作者 邱海峻 王鹏昊 甄素静 《地球科学与环境学报》 CAS 2015年第1期57-65,共9页
阿尔金断裂带新生代以来大规模活动的时限及规律一直是国内外研究的热点问题之一,但目前仍缺乏可靠的年代学约束。在野外地质调查基础上,对阿尔金断裂带中的伴生石英脉和石膏采用电子自旋共振(ESR)测年,并用测年结果约束断裂活动起始时... 阿尔金断裂带新生代以来大规模活动的时限及规律一直是国内外研究的热点问题之一,但目前仍缺乏可靠的年代学约束。在野外地质调查基础上,对阿尔金断裂带中的伴生石英脉和石膏采用电子自旋共振(ESR)测年,并用测年结果约束断裂活动起始时间的下限,最后探讨了阿尔金断裂带中中新世以来的构造活动。结果表明:阿尔金断裂带新生代大规模构造变形始自中中新世((12.5±1.3)^(15.1±1.5)Ma),之后经历了多期次的构造变形活动;阿尔金主断裂开始大规模走滑活动的时限至少始于(15.1±1.5)Ma,而阿尔金北缘断裂挤压逆冲活动的时限至少始于(14.1±1.4)Ma;阿尔金断裂带的变形活动在其主体走滑和北缘逆冲之间存在时间差,推测其具有从中心向两侧渐进扩展的变形方式;深部的韧性剪切首先引起阿尔金主断裂的走滑位移,致使附近山体快速抬升,随后变形扩展并引起阿尔金北缘断裂逆冲活动的构造响应。 展开更多
关键词 构造变形 电子自旋共振测年 中中新世 起始时间 流体活动 渐进扩展 阿尔金断裂带
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不饱和聚酯/过氧化甲乙酮体系的新型铁促进剂
5
作者 刘斌 张梦嫒 +1 位作者 袁才登 郭睿威 《热固性树脂》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期25-31,共7页
采用示差扫描量热仪(DSC)研究了铁系促进剂CF40对不饱和聚酯树脂常用引发剂过氧化甲乙酮(MEKP)及其主要组分过氧化氢(H2O2),2,2-二氢过氧丁烷(T4),过氧化丁酮(T3)引发UPR固化时的促进特性。结果表明,在CF40作用下UPR/MEKP的DSC固化曲线... 采用示差扫描量热仪(DSC)研究了铁系促进剂CF40对不饱和聚酯树脂常用引发剂过氧化甲乙酮(MEKP)及其主要组分过氧化氢(H2O2),2,2-二氢过氧丁烷(T4),过氧化丁酮(T3)引发UPR固化时的促进特性。结果表明,在CF40作用下UPR/MEKP的DSC固化曲线表现为多峰,起聚温度随促进剂用量增加而降低,CF40具有很好的低温促进活性,可使UPR完全固化。CF40对3种过氧化物的促进活性依次为H2O2>T4>T3。H2O2与T4对CF40/MEKP/UPR的低温固化活性起重要作用,T3对CF40/MEKP/UPR高温下的完全固化起重要作用。 展开更多
关键词 不饱和聚酯 过氧化甲乙酮 室温固化 铁促进剂 引发活性
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Molecular dynamics reveal a novel kinase-substrate interface that regulates protein translation
6
作者 Ming S. Liu Die.Wang +4 位作者 Hiroyuki Morimoto Howard C.H. Yim Aaron T. Irving Bryan R.G. Williams Anthony J, Sadler 《Journal of Molecular Cell Biology》 SCIE CAS CSCD 2014年第6期473-485,共13页
A key control point in gene expression is the initiation of protein translation, with a universal stress response being constituted by in- hibitory phosphoryiation of the eukaryotic initiation factor 2α (el F2oL). ... A key control point in gene expression is the initiation of protein translation, with a universal stress response being constituted by in- hibitory phosphoryiation of the eukaryotic initiation factor 2α (el F2oL). In humans, four kinases sense diverse physiological stresses to regulate elF2α to control cell differentiation, adaptation, and survival. Here we develop a computational molecular model of elF2α and one of its kinases, the protein kinase R, to simulate the dynamics of their interaction. Predictions generated by coarse-grained dynamics simulations suggest a novel mode of action. Experimentation substantiates these predictions, identifying a previously unrecognized interface in the protein complex, which is constituted by dynamic residues in both elF2α and its kinases that are crucial to regulate protein translation. These findings call for a reinterpretation of the current mechanism of action of the el F2α kinases and demonstrate the value of conducting computational analysis to evaluate protein function. 展开更多
关键词 molecular dynamics eukaryotic initiation factor 2α(elF2oc) elF2α kinases protein kinase R (PKR) protein translation kinase activity
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长春花叶片愈伤组织诱导及培养过程中生物碱合成类型的变化和调节及有关酶的分析 被引量:10
7
作者 赵剑 朱蔚华 +1 位作者 胡秋 王文科 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 1999年第7期533-537,共5页
在4种不同培养基上诱导长春花叶片愈伤组织发生的过程中,叶片中含量较高的文多灵(vindoline)和长春质碱(catharanthine)迅速降解至极低水平,而在叶片中含量较低的阿玛碱(aj-malicine)和蛇根... 在4种不同培养基上诱导长春花叶片愈伤组织发生的过程中,叶片中含量较高的文多灵(vindoline)和长春质碱(catharanthine)迅速降解至极低水平,而在叶片中含量较低的阿玛碱(aj-malicine)和蛇根碱(serpentine)的合成却逐渐增加,同时酸性和碱性过氧化物酶(peroxidase)活性呈上升趋势,尤其碱性过氧化物酶与蛇根碱和阿玛碱的相关性较密切。光照和黑暗中的变化趋势基本一致,但光照可提高过氧化物酶的活性,对培养物的长春质碱、文多灵和蛇根碱的合成有利。不同的培养基对生物碱的合成影响较大,2,4-D显著抑制生物碱的合成,持续光照使愈伤组织的生长受到抑制,使阿玛碱向其蛇根碱转化。 展开更多
关键词 长春花愈伤组织 吲哚生物碱 过氧化物酶
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成都地区老年抑郁现状及相关因素分析 被引量:20
8
作者 曹颖 王意君 +3 位作者 吕莉霞 喻国 贺清悦 高明 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期1182-1187,共6页
目的探讨成都地区老年抑郁现状及相关因素。方法选择2018年1~12月在成都市第一人民医院老年内分泌科、心内科住院的老年患者、体检部体检的老年人、成都市中和社区随机选取的老年人共计615例,根据老年抑郁量表(GDS)评估判断,分为正常组... 目的探讨成都地区老年抑郁现状及相关因素。方法选择2018年1~12月在成都市第一人民医院老年内分泌科、心内科住院的老年患者、体检部体检的老年人、成都市中和社区随机选取的老年人共计615例,根据老年抑郁量表(GDS)评估判断,分为正常组463例(无抑郁症状),轻度抑郁症组135例,中重度抑郁症组17例。由经过培训的医师采用GDS和老年评估问卷以面对面的方式对入选者进行调查,GDS包括情绪抑郁、活动减少、烦躁、痛苦念头和负面评价等,老年评估问卷包括年龄、教育程度、婚姻状况、健康自评、残疾、失眠、运动、受教育程度、职业、家庭模式、收入、慢性疾病、吸烟、饮酒、工作时间和医疗费用,先进行单因素分析,再用多变量有序logistic回归分析抑郁症的相关因素。结果正常组、轻度抑郁组和中重度抑郁组情绪抑郁、活动减少、烦躁、痛苦念头和负面评价等GDS评分比较,差异有统计学意义[(0.62±0.04)分vs(3.11±0.91)分vs(4.35±0.32)分,(0.93±0.04)分vs(1.73±0.09)分vs(3.71±0.24)分,(0.17±0.02)分vs(0.95±0.04)分vs(3.00±0.42)分,(0.97±0.04)分vs(2.92±0.10)分vs(4.00±0.21)分,(2.04±0.05)分vs(4.40±0.15)分vs(6.65±0.32)分,P=0.000]。离婚和独居者患抑郁症比例高于其他婚姻状况者,健康自评差者患抑郁症比例高于自评良好者,残疾者抑郁症比例高于无残疾者,睡眠不规律者抑郁症比例高于规律者,从不运动者抑郁症比例高于经常运动者(P<0.05,P<0.01)。婚姻状况、失眠、健康自评、残疾和运动是患抑郁症的影响因素(P<0.05,P<0.01)。结论健康自评、残疾、运动、失眠和婚姻状况是成都地区的老年抑郁症相关因素。筛选社会和生活方式相关的因素是评估抑郁症的预防和干预重要战略,应在老年抑郁症患者中进行社会和环境干预。 展开更多
关键词 抑郁 婚姻状况 入睡和睡眠障碍 健康状况 残疾人 运动活动
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Madden–Julian Oscillation: Its Discovery, Dynamics, and Impact on East Asia 被引量:14
9
作者 Tim LI Jian LING Pang-Chi HSU 《Journal of Meteorological Research》 SCIE CSCD 2020年第1期20-42,共23页
In this review article,we pay primary attention to innovative works in the Madden–Julian Oscillation(MJO)field done by Chinese scientists.The historical aspect of discovery of the MJO and earlier studies of its dynam... In this review article,we pay primary attention to innovative works in the Madden–Julian Oscillation(MJO)field done by Chinese scientists.The historical aspect of discovery of the MJO and earlier studies of its dynamics by Chinese scientists are first described.It is followed by the description of recent advances in MJO propagation and initiation dynamics.For MJO eastward propagation,two types of the moisture mode theory are introduced.The first one emphasizes the effect of zonal asymmetry of perturbation moisture in the atmospheric boundary layer and the second one emphasizes the zonal asymmetry of column integrated moisture static energy(MSE)tendency.The mechanisms for MJO initiation over the western Indian Ocean include three distinctive processes:lower tropospheric moistening due to horizontal advection caused by preceding suppressed-phase MJO,midlatitude Rossby wave activity flux convergence in the upper troposphere originated from the Southern Hemisphere,and a delayed sea surface temperature feedback in association with a preceding opposite-phase MJO.The impacts of MJO on low-frequency variability of precipitation and temperature and associated extreme events in East Asia are also discussed. 展开更多
关键词 Madden–Julian Oscillation(MJO) propagation and initiation lower TROPOSPHERIC moistening ROSSBY wave activity flux delayed sea surface temperature feedback
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代币法干预对慢性精神分裂症患者森田疗法作业期始动性缺乏的影响 被引量:7
10
作者 李玲 陶凤瑛 +2 位作者 陈剑华 董萍 柏忠生 《中国医药导报》 CAS 2017年第34期50-53,57,共5页
目的探讨代币法对慢性精神分裂症患者森田疗法作业期始动性缺乏的影响。方法选择上海交通大学医学院附属精神卫生中心康复二科2015年7月~2016年12月符合入组标准的慢性精神分裂症患者105例,随机分为对照组(51例)和代币法干预组(54例)。... 目的探讨代币法对慢性精神分裂症患者森田疗法作业期始动性缺乏的影响。方法选择上海交通大学医学院附属精神卫生中心康复二科2015年7月~2016年12月符合入组标准的慢性精神分裂症患者105例,随机分为对照组(51例)和代币法干预组(54例)。对照组按原抗精神病药物治疗配合森田疗法;代币法干预组在原抗精神病药物治疗基础上给予代币法森田疗法。分别于治疗前后使用NOSIE-30量表及Butler始动性缺乏评分表对患者进行评分比较。结果 NOSIE-30量表组内比较显示,代币法干预组治疗后社会能力、社会兴趣以及个人卫生因子分高于治疗前,激惹、退缩以及抑郁因子分均低于治疗前,差异有高度统计学意义(P<0.01);组间比较显示,治疗后代币法干预组的社会能力、社会兴趣以及个人卫生因子分均高于对照组,激惹、退缩以及抑郁因子分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Butler始动性缺乏评分表组内比较显示,治疗后代币法干预组Butler量表总分低于治疗前,差异有高度统计学意义(P<0.01);组间比较显示,治疗后代币法干预组的Butler量表总分低于对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。治疗后两组患者Butler量表的减分率比较,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论代币法干预可显著改善慢性精神分裂症患者在森田疗法作业期出现的始动性缺乏。 展开更多
关键词 慢性精神分裂症 森田疗法 始动性缺乏
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大鼠衰老过程中肝细胞核及染色质的体外转录活性 被引量:6
11
作者 杜延顺 张宗玉 张昌颖 《生物化学杂志》 CSCD 1991年第1期95-99,共5页
用同位素掺入法研究不同年龄大鼠的肝细胞核及染色质体外转录活性,所得结果表明:(1)老年大鼠肝细胞核的转录起始能力较断乳鼠及青年鼠分别下降68%及56%。(2)大鼠肝细胞核内与染色质结合的RNA聚合酶所致的转录活性随增龄呈近似线性下降... 用同位素掺入法研究不同年龄大鼠的肝细胞核及染色质体外转录活性,所得结果表明:(1)老年大鼠肝细胞核的转录起始能力较断乳鼠及青年鼠分别下降68%及56%。(2)大鼠肝细胞核内与染色质结合的RNA聚合酶所致的转录活性随增龄呈近似线性下降,而不与染色质结合的RNA聚合酶所致的转录活性随增龄则无变化。(3)老年大鼠肝染色质体外转录活性较断乳鼠及青年鼠分别下降52%及35%。这些结果提示。老年大鼠肝染色质功能的改变可能是转录活性改变的主要原因。 展开更多
关键词 转录活性 细胞核 染色质 衰老
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原发失眠病人脑电波及脑电频带功率与事件相关电位P300的相关性
12
作者 韩婕 邵明菊 +1 位作者 高呈飞 赵丽霞 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2024年第3期422-424,共3页
目的探讨原发失眠病人脑电波、脑电频带功率与事件相关电位P300的相关性,为评估原发失眠对大脑功能及认知功能的影响提供客观依据。方法选取原发性失眠病人31例为研究对象(失眠组),以正常成人31例为对照(正常组),分别进行常规脑电监测... 目的探讨原发失眠病人脑电波、脑电频带功率与事件相关电位P300的相关性,为评估原发失眠对大脑功能及认知功能的影响提供客观依据。方法选取原发性失眠病人31例为研究对象(失眠组),以正常成人31例为对照(正常组),分别进行常规脑电监测、事件相关电位P300(P3a及P3b)检查,分析脑电波占比、脑电频带功率及P3a和P3b潜伏期、波幅等数据及其相关性。结果失眠组与正常组P3a和P3b潜伏期及波幅、脑电α波及β波占比、FTT-β频带功率、FTT-总频带功率差异均具有统计学意义(Z=-6.84~-1.99,P<0.05)。脑电β波占比及FTT-β频带功率与P3b潜伏期呈正相关(r=0.483、0.517,P<0.05);脑电β波占比及FTT-β频带功率与P3b波幅呈负相关(r=-0.540、-0.691,P<0.01)。结论失眠病人脑电β波及FTT-β频带功率增加,事件相关电位P300改变,这可为评估失眠引起脑功能改变及认知功能障碍提供客观依据。 展开更多
关键词 入睡和睡眠障碍 脑电波 脑地形图 事件相关电位 P300 认知功能障碍
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The Benefits and Barriers Related to Regular Participation in Physical Activity by African-American Women: Implications for Intervention Development
13
作者 Meredith S. Scott Roy F. Oman Robert John 《Open Journal of Preventive Medicine》 2015年第4期169-176,共8页
A common strategy for improving health behaviors is to emphasize the benefits and reduce the barriers to behavior change. This study investigated potential differences in perceived benefits and barriers related to par... A common strategy for improving health behaviors is to emphasize the benefits and reduce the barriers to behavior change. This study investigated potential differences in perceived benefits and barriers related to participation in physical activity (PA) between women in pre-maintenance versus the maintenance phase of PA behavior to determine if perceived benefits were greater and perceived barriers lower in women with more extensive and successful PA participation experience. Data were collected from a community-based sample (N = 113) of middle-aged African-American women. The sample was stratified into two groups according to how long they had been regularly engaging in PA (6 months or longer versus less than 6 months). Chi-square analyses were conducted to investigate possible differences between the two groups of women in regard to perceived benefits and barriers associated with PA. Descriptive data showed that nearly all of the benefits and barriers to PA were perceived as being important for a majority of the participants and chi-square and t-test results indicated few significant between-group differences (p < .05) in regard to these perceptions. Additional analyses indicated there was no significant between-group difference (p < .05) for Body Mass Index. The results suggest the benefits and barriers related to PA behavior are already valued and understood by many African-American women. Further, the results do not support the commonly held belief that effective health behavior improvement programming should emphasize the benefits and reduce the barriers related to the behavior. Practitioners should consider focusing on other evidenced based factors proven to promote PA behavior such as counseling regarding social support (e.g., buddy system) and increasing self-efficacy (e.g., goal setting) to initiate and sustain a physically active lifestyle. 展开更多
关键词 PHYSICAL activity BEHAVIOR AFRICAN American Women Benefits and Barriers Maintenance of PHYSICAL activity BEHAVIOR initiation of PHYSICAL activity BEHAVIOR Transtheoretical Model
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丙型肝炎病毒5’端非编码区的5’端序列对其翻译启动活性的影响 被引量:2
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作者 刘水平 赵俊琴 +2 位作者 谭德明 朱海鹏 余俊龙 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2005年第4期355-358,共4页
目的分析丙型肝炎病毒(HCV)5’端非编码区(5’NCR)的5’端序列对其翻译启动活性的影响。方法用PCR技术扩增获得全长和5’端17个碱基缺失的HCV5’NCR片段,定向克隆至表达质粒pSEAP2Control的SEAP基因上游,分别构建成全长和5’端截短的HCV... 目的分析丙型肝炎病毒(HCV)5’端非编码区(5’NCR)的5’端序列对其翻译启动活性的影响。方法用PCR技术扩增获得全长和5’端17个碱基缺失的HCV5’NCR片段,定向克隆至表达质粒pSEAP2Control的SEAP基因上游,分别构建成全长和5’端截短的HCV5’NCR调控SEAP表达的重组质粒pNCRSEAP和pdNCRSEAP。用脂质体方法将重组质粒转染至肝细胞株QSG7701,并用化学发光法检测SEAP的表达。结果酶切和测序结果表明,重组质粒pNCRSEAP和pdNCRSEAP构建成功。表达的发光强度分别为390482±42856和635265±52285RLU,二者有差异显著性(P<0.01)。结论HCV5’NCR的5’端碱基缺失提高了它对SEAP基因的翻译启动活性,为进一步分析HCVIRES的结构提供了实验基础。 展开更多
关键词 肝炎病毒 丙型 5’端非编码区 内部核糖体进入位点 翻译启动活性
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结构域Ⅰ缺失的丙型肝炎病毒5′NCR调控荧光素酶基因的表达 被引量:1
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作者 杨滔 赵俊琴 +2 位作者 刘水平 李洪涛 李建华 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第5期699-701,共3页
目的:分析丙型肝炎病毒(HCV)5′端非编码区(NCR)的结构域Ⅰ序列在其翻译启动活性中的作用。方法:以质粒pCMVN CRluc为模板,PCR扩增分别得到缺失5′端20nt和43nt的HCV 5′NCR片段,并分别替换pCMVNCRluc中的完整HCV 5′NCR,构建结构域Ⅰ... 目的:分析丙型肝炎病毒(HCV)5′端非编码区(NCR)的结构域Ⅰ序列在其翻译启动活性中的作用。方法:以质粒pCMVN CRluc为模板,PCR扩增分别得到缺失5′端20nt和43nt的HCV 5′NCR片段,并分别替换pCMVNCRluc中的完整HCV 5′NCR,构建结构域Ⅰ缺失的HCV 5′NCR调控萤火虫荧光素酶(luc)基因表达的真核表达质粒(pCN1-d1、pCNl-d2)。以脂质体方法转染人肝癌细胞株HepG2,用双荧光素酶报告基因检测系统检测荧光素酶相对于内参考的海肾荧光素酶表达活性,同时采用RT-PCR方法检测转染后细胞中萤火虫荧光素酶基因的相对表达水平。结果:酶切和测序结果表明,各重组质粒构建成功。各重组质粒转染细胞后luc mRNA的相对表达水平与pCMVNRluc相比差异无显著性(P>0.05);pCNl-dl、pCNl-d2表达的荧光素酶活性与pCMVNCRluc差异无显著性(P>0.05)。结论:HCV 5′NCR的5′端20nt和43nt序列缺失不影响它的翻译启动活性。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 荧光素酶 翻译启动活性
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头状链轮丝菌染色体复制起始区的克隆和对变铅青链霉菌的转化 被引量:1
16
作者 马伟 茅翔 +4 位作者 卢捷 姜卫红 焦瑞身 覃重军 赵国屏 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期662-666,共5页
头状链轮丝菌 (Streptoverticillumcaespitosus)ATCC2 742 2是抗肿瘤药物———丝裂霉素A的产生菌 ,根据高GC含量革兰氏阳性菌染色体复制起始区两端基因序列的保守性 ,采用PCR方法从该菌中克隆了一段包含染色体复制起始区 (oriC)的 1 3k... 头状链轮丝菌 (Streptoverticillumcaespitosus)ATCC2 742 2是抗肿瘤药物———丝裂霉素A的产生菌 ,根据高GC含量革兰氏阳性菌染色体复制起始区两端基因序列的保守性 ,采用PCR方法从该菌中克隆了一段包含染色体复制起始区 (oriC)的 1 3kb片段。序列分析发现 ,克隆片段与天蓝色链霉菌的oriC及邻近区域的同源性达 80 %以上 ;头状链轮丝菌oriC中含有 2 2个DnaA box ,保守序列为TTGTCCACA。以克隆片段构建的质粒可以跨属转化变铅青链霉菌 (S .lividans)ZX7,原生质体转化效率为 3 2× 10 2 个 μgDNA ;质粒在S .lividansZX7中能以低拷贝形式稳定存在 ;转化子的菌落和菌丝形态均正常。头状链轮丝菌oriC序列与几种链霉菌的oriC有较高的同源性 ,以及在变铅青链霉菌中仍具有复制起始活性等说明链轮丝菌属与链霉菌属在系统发生上关系较近 ;但采用最大似然法分析oriC序列构建的头状链轮丝菌与几种链霉菌的系统进化树表明 ,头状链轮丝菌与几种链霉菌之间的分化距离远大于链霉菌之间的分化距离。 展开更多
关键词 头状链轮丝菌 染色体 复制起始区 克隆 变铅青链霉菌 转化
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丙型肝炎病毒5'端非编码区结构域Ⅰ、Ⅱ在其翻译启动活性中的作用具有细胞特异性
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作者 黄小晔 刘丽莎 +4 位作者 崔光晶 刘西霞 刘美佟 马琼山 刘水平 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1826-1829,共4页
目的分析在不同宿主细胞的翻译体系下,缺失不同片段的HCV 5'UTR翻译启动活性的差异。方法以脂质体介导基因转染技术,将截短型HCV 5'UTR调控Fluc的真核表达质粒与Rluc真核表达质粒p RL-TK共转染至不同的细胞中,转染后36 h:6提取... 目的分析在不同宿主细胞的翻译体系下,缺失不同片段的HCV 5'UTR翻译启动活性的差异。方法以脂质体介导基因转染技术,将截短型HCV 5'UTR调控Fluc的真核表达质粒与Rluc真核表达质粒p RL-TK共转染至不同的细胞中,转染后36 h:6提取细胞RNA,半定量RT-PCR检测目的质粒的转录水平;6用双荧光素酶报告基因检测系统检测Fluc基因相对表达活性,分析HCV 5'UTR缺失不同结构域后在不同翻译体系中翻译启动活性的差异。结果 6缺失5'端44个碱基的HCV 5'UTR的翻译启动活性分别与缺失前相比:在He La细胞和C6细胞中无明显影响,在L-02细胞中活性下降为46%,而在293T细胞则为缺失前的146%;6缺失5'端118个碱基后,HCV 5'UTR的活性分别与缺失前相比:在He La细胞中,缺失后活性仅为缺失前的49%,而在L-02细胞、C6细胞和293T细胞中,活性分别为缺失前的140%、160%和235%。在本研究使用的四种细胞中,p CNl的翻译启动活性的差异无统计学意义,p CNl-d2在293T细胞中活性最高,在L-02细胞中活性最低。p CNl-d3在293T、C6和L-2细胞中活性相近,但在He La细胞中的活性明显比其他细胞低。结论 HCV 5'UTR的DomainⅠ和DomainⅡ对其翻译启动活性的影响与宿主细胞种类相关,具细胞特异性。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 5'端非编码区 翻译启动活性 细胞特异性
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核桃JreIF1A基因启动子的鉴定及表达活性分析
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作者 张英杰 闫鹏宇 +3 位作者 李文凯 崔茂凯 张彤 杨桂燕 《西部林业科学》 CAS 北大核心 2019年第5期15-21,共7页
真核生物翻译起始因子(eIF1)对逆境响应具有一定正响应;启动子能有效预测基因功能。以本研究鉴定获得核桃eIF1A基因(即JreIF1A)为其上游启动子,通过生物信息学、瞬时转化及GUS活性测定等不同技术,分析JreIF1A启动子的基本生物功能。结... 真核生物翻译起始因子(eIF1)对逆境响应具有一定正响应;启动子能有效预测基因功能。以本研究鉴定获得核桃eIF1A基因(即JreIF1A)为其上游启动子,通过生物信息学、瞬时转化及GUS活性测定等不同技术,分析JreIF1A启动子的基本生物功能。结果显示,JreIF1A上游1200bp启动子序列中包含众多与逆境响应相关的元件,病害响应相关的BIHD1OS、热胁迫响应相关的CCAATBOX1、Dof转录因子识别的DOFCOREZM、WRKY识别的WRKY71OS等。将JreIF1A启动子瞬时转入烟草测定GUS酶活性,发现JreIF1A启动子具有表达活性,且受干旱、盐、寒、热等胁迫诱导。表明JreIF1A启动子具有逆境响应表达活性,可能调控JreIF1A基因参与多重逆境响应。 展开更多
关键词 核桃 真核翻译起始因子 eIF1A基因 启动子 表达活性
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真核细胞翻译起始因子4E相关通路小分子抑制剂的研究进展
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作者 赵兴旺 吴冰 +7 位作者 焦慎超 李晶晶 樊印波 刘丽娜 赵睿 李青青 刘丹 赵临襄 《国际药学研究杂志》 CAS CSCD 2013年第4期396-404,421,共10页
真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)在蛋白翻译起始过程中发挥重要作用,与肿瘤细胞的生长、增殖和分化等密切相关。随着对eIF4E功能及相关信号通路研究的不断深入,以eIF4E及相关信号通路为靶点的药物在肿瘤治疗中的作用日益引起重视。目前... 真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)在蛋白翻译起始过程中发挥重要作用,与肿瘤细胞的生长、增殖和分化等密切相关。随着对eIF4E功能及相关信号通路研究的不断深入,以eIF4E及相关信号通路为靶点的药物在肿瘤治疗中的作用日益引起重视。目前已有部分相关抗肿瘤药物上市或进入临床试验。本文综述了作用于eIF4E及相关通路的小分子抑制剂的研究进展。 展开更多
关键词 真核细胞翻译起始因子4E 小分子抑制剂 作用机制 抗肿瘤活性
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