苦参碱对白血病细胞诱导分化作用和机理研究 被引量：29

1

作者 朱宁希 罗文纪 +3 位作者 虞荣喜 吕庆华 徐荣臻 郑树 《上海中医药大学学报》 CAS 2001年第1期43-44,共2页

为了解苦参碱对人粒系白血病细胞系HL 60细胞的诱导分化作用并探讨其机制 ,采用MTT法、光镜观察、S AP免疫组织化学法、硝基蓝四氮唑 (NBT)还原试验、流式细胞仪检测、逆转录酶 /多聚酶链反应 (RT PCR)检测 ,观察苦参碱对HL 60细胞的增... 为了解苦参碱对人粒系白血病细胞系HL 60细胞的诱导分化作用并探讨其机制 ,采用MTT法、光镜观察、S AP免疫组织化学法、硝基蓝四氮唑 (NBT)还原试验、流式细胞仪检测、逆转录酶 /多聚酶链反应 (RT PCR)检测 ,观察苦参碱对HL 60细胞的增殖抑制作用、分化诱导作用及其对细胞周期移行和癌基因表达的影响。结果表明 :苦参碱明显地抑制HL 60细胞的增殖 ,并诱导其向成熟粒系分化 ;苦参碱对HL 60细胞的诱导分化作用与其下调c myc基因表达、阻滞细胞在G1 展开更多

关键词 苦参碱 白血病 HL-60细胞 抑制增殖 诱导分化

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沙棘黄酮制备及体外抑制人前列腺癌PC-3细胞作用研究 被引量：18

2

作者 赵波 向晓玲 +3 位作者 王微 李春松 吴晓琴 沈建福 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期27-32,160,共7页

采用AB-8大孔树脂纯化沙棘黄酮初提物,用10%、30%、50%乙醇溶液梯度洗脱,以总黄酮含量和黄酮苷元含量为指标,筛选纯化样品;采用MTT法、实时无标记细胞分析技术检测沙棘黄酮样品体外对人前列腺癌PC-3细胞的增殖抑制作用,流式细胞技术检... 采用AB-8大孔树脂纯化沙棘黄酮初提物,用10%、30%、50%乙醇溶液梯度洗脱,以总黄酮含量和黄酮苷元含量为指标,筛选纯化样品;采用MTT法、实时无标记细胞分析技术检测沙棘黄酮样品体外对人前列腺癌PC-3细胞的增殖抑制作用,流式细胞技术检测细胞凋亡和细胞周期情况,Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达情况。实验结果表明50%乙醇梯度洗脱样品(S50)中,总黄酮含量达到25.42%;水解后得到SH50样品,其槲皮素、异鼠李素含量分别达到5.03%、18.64%;25μg/m L的SH50样品对PC-3细胞即有增殖抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;同时25μg/m L的SH50样品作用48 h即可显著诱导细胞凋亡(P<0.01),并将细胞周期阻滞在G2/M期,此外,样品可提高Bax蛋白和降低Bcl-2蛋白的表达。说明沙棘黄酮SH50样品对体外人前列腺癌PC-3细胞具有抑制增殖并诱导细胞凋亡作用,其机制可能与阻滞细胞周期,调节Bax和Bcl-2蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 沙棘黄酮 人前列腺癌 PC-3细胞 抑制增殖

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蟾酥抗肿瘤有效成分的作用研究 被引量：11

3

作者 毕琳琳 缪珊 王四旺 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第16期3185-3187,共3页

蟾酥(Venenum Bufonis)一词源自《本草衍义》,为我国名贵的传统中药。其含有多种化学成分,具有镇痛、强心、升压、局麻、抗炎和抗肿瘤等药理活性,临床应用广泛。蟾酥中抗肿瘤的有效成分为蟾毒配基类化合物,包括脂蟾毒配基、华蟾毒配基... 蟾酥(Venenum Bufonis)一词源自《本草衍义》,为我国名贵的传统中药。其含有多种化学成分,具有镇痛、强心、升压、局麻、抗炎和抗肿瘤等药理活性,临床应用广泛。蟾酥中抗肿瘤的有效成分为蟾毒配基类化合物,包括脂蟾毒配基、华蟾毒配基和蟾毒灵等。抗肿瘤活性主要包括诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞分化等。近年来,有关蟾酥中活性成分在抗肿瘤方面的作用越来越成为国内外学者研究的热点。 展开更多

关键词 蟾酥 化学成分 诱导凋亡 抑制增殖 诱导分化 细胞周期阻滞

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人参总皂甙对白血病细胞KG1α增殖、凋亡的影响 被引量：5

4

作者 刘晓岩 李静 +2 位作者 王建伟 姜蓉 陈地龙 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第24期2599-2603,共5页

目的探讨人参总皂甙（total saponins of panax ginseng,TSPG）对人急性髓系白血病细胞株KG1α增殖的影响。方法取对数生长期的KG1α细胞,调整密度为5×108/L,空白对照组予以常规培养;人参总皂甙TSPG组分别加入0.1、0.2、0.4、0.6、... 目的探讨人参总皂甙（total saponins of panax ginseng,TSPG）对人急性髓系白血病细胞株KG1α增殖的影响。方法取对数生长期的KG1α细胞,调整密度为5×108/L,空白对照组予以常规培养;人参总皂甙TSPG组分别加入0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 g/L TSPG。采用MTT比色法测定细胞存活率,瑞氏染色法以及光电镜观察细胞形态学改变。流式细胞仪测定细胞周期分布的变化以及细胞的凋亡率。免疫细胞化学的方法检测细胞中β-catenin、NF-κB p65蛋白表达的变化。RT-PCR半定量检测细胞中β-catenin mRNA和NF-κB p65 mRNA水平的变化。结果人参总皂甙TSPG在体外对KG1α增殖具有明显抑制作用。在0.1~0.8 g/L TSPG浓度范围内,其抑制作用呈浓度依赖性,在浓度0.4 g/L处达到细胞的半数抑制率,且在48 h抑制率达到高峰。0.4 g/L TSPG作用48 h后,可见细胞分散生长,数量明显减少;细胞明显分化或凋亡,产生核分裂象,胞质中产生凋亡小体以及空泡;与对照组相比,加药组KG1α细胞周期分布无明显变化（P〉0.05）;与对照组相比,加药组细胞凋亡率显著增高,其改变具有统计学意义（P〈0.05）;与对照组相比,加药组细胞内β-catenin蛋白因子表达降低其表达区域由胞核向胞膜转移,NF-κB p65因子的表达也明显减弱其表达区域由胞核向胞膜转移;与对照组相比,加药组β-catenin和NF-κB p65 mRNA的水平降低,其改变具有统计学意义（P〈0.05）。结论 TSPG可抑制KG1α细胞增殖诱导细胞凋亡,且TSPG抑制KG1α细胞增殖的作用机制可能与其抑制β-catenin及NF-κB p65蛋白表达,降低β-catenin和NF-κB p65 mRNA的水平有关。 展开更多

关键词 人参总皂甙 KG1α细胞 增殖抑制 凋亡

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马钱子复合生物碱成分抑制成年大鼠海马神经前体细胞的分裂作用 被引量：5

5

作者 龚芝 孙丽荣 +3 位作者 曹雄 李树基 朱心红 高天明 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2121-2125,共5页

目的探讨马钱子复合生物碱成分对成年大鼠海马神经前体细胞增殖的影响。方法提取马钱子生物碱,分离去除其中的士的宁和马钱子碱,制备马钱子复合生物碱成分。分别在HEK293和PC12细胞系上,采用MTT法观察马钱子复合生物碱成分对细胞存活的... 目的探讨马钱子复合生物碱成分对成年大鼠海马神经前体细胞增殖的影响。方法提取马钱子生物碱,分离去除其中的士的宁和马钱子碱,制备马钱子复合生物碱成分。分别在HEK293和PC12细胞系上,采用MTT法观察马钱子复合生物碱成分对细胞存活的影响。然后在培养的成年大鼠海马神经前体细胞上,采用BrdU免疫荧光技术,研究不同浓度的马钱子复合生物碱成分对成年大鼠海马神经前体细胞增殖的影响。结果马钱子复合生物碱成分对HEK293细胞的存活无明显抑制作用,当其浓度>0.5mg/ml时,对HEK293细胞产生毒性作用(P<0.0001),但在PC12细胞中,马钱子复合生物碱成分在5μg/ml的浓度下即可明显抑制PC12的存活(P<0.0001)。在培养的成年大鼠海马神经前体细胞上,50μg/ml马钱子复合生物碱成分能够显著减少BrdU阳性细胞的数量(P<0.01),当浓度增加到100μg/ml时则能够产生明显的细胞毒性(P<0.001)。结论马钱子复合生物碱成分能够显著抑制PC12细胞的存活及成年大鼠海马神经前体细胞的分裂,并且这种抑制作用可能具有细胞选择性。 展开更多

关键词 马钱子复合生物碱成分 成年大鼠海马神经前体细胞 抑制 增殖

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没食子体外抗结肠癌活性提取物的筛选研究

6

作者 阿丽亚·依拉木 白姣姣 +2 位作者 阿布都艾则孜·艾尔肯 艾尔菲丁·艾尼瓦尔 木巴拉克·伊明江 《世界中医药》 CAS 2023年第13期1862-1866,共5页

目的:采用不同极性溶剂提取回流得到4种没食子(QIG)提取物,筛选出最佳抑制结肠癌细胞活性的没食子提取物。方法:8倍溶剂提取回流3次,每次0.5 h,浓缩蒸干制备没食子丙酮、乙醇、甲醇、水提部位浸膏;以化疗药物5-氟尿嘧啶为阳性对照药,CC... 目的:采用不同极性溶剂提取回流得到4种没食子(QIG)提取物,筛选出最佳抑制结肠癌细胞活性的没食子提取物。方法:8倍溶剂提取回流3次,每次0.5 h,浓缩蒸干制备没食子丙酮、乙醇、甲醇、水提部位浸膏;以化疗药物5-氟尿嘧啶为阳性对照药,CCK-8法测定有效提取物和没食子酸在不同浓度以及不同作用时间孵育之后对结肠癌HCT-116、Caco-2细胞的体外抑制作用。结果:没食子4种提取物和没食子酸对2种结肠癌细胞均有不同程度的抑制作用。没食子4种提取物在12、24、48、72 h对HCT-116细胞的半数抑制浓度(IC50值)范围分别为:0.313~0.988 mg/mL、0.131~0.53 mg/mL、0.107~0.379 mg/mL、0.1~0.262 mg/mL;对Caco-2细胞分别为1.093~1.382 mg/mL、0.404~0.53 mg/mL、0.246~0.341 mg/mL、0.134~0.312 mg/mL;综合比较可知其中乙醇提取物对2种细胞活性抑制效果最好,其在作用72 h时HCT-116和Caco-2细胞对应的最大抑制率和IC50值分别为76.55%和0.1 mg/mL、78.8%和0.134 mg/mL。没食子酸在作用72 h时HCT-116和Caco-2细胞对应的最大抑制率和IC50值分别为86.54%和0.07 mg/mL、80.3%和0.083 mg/mL。结论:没食子不同极性溶剂提取物对结肠癌HCT-116、Caco-2细胞具有不同程度的抑制作用,提取物当中没食子乙醇提取物相对其他提取物对2种结肠癌细胞抑制效果最佳。 展开更多

关键词 没食子 没食子酸 5-氟尿嘧啶 不同极性 溶剂 提取物 结肠癌 抑制 增殖

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茶多酚有效成分对淋巴细胞增殖的抑制和抗氧化作用 被引量：2

7

作者 李伟 王遂泉 +4 位作者 吴辛刚 洪为松 傅丽芳 卢良君 许爱娥 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期294-295,共2页

研究表明，茶多酚具有很强的消除有害自由基、抗衰老等多种药理作用，茶多酚临床治疗白癜风具有较明显的效果，但其各类组分在临床治疗白癜风所发挥的作用还未见报道。

关键词 茶多酚 抑制 黑素细胞 抗氧化 CD8^+T淋巴细胞 细胞增殖

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有氧运动联合枸杞多糖在抑制小鼠H_(22)肝肿瘤过程中mTOR作用的研究 被引量：2

8

作者 朱敬生 吴卫东 +1 位作者 任爽 陈杰 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2021年第5期338-343,共6页

目的探讨有氧运动联合枸杞多糖对小鼠H_(22)肝肿瘤模型雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的抑制作用,以及抑制mTOR信号通路对H_(22)肝肿瘤增殖的影响。方法 40只雄性昆明种小鼠,构模成功小鼠随机分为模型组(C组)、枸杞多糖组(L组)、有氧运动... 目的探讨有氧运动联合枸杞多糖对小鼠H_(22)肝肿瘤模型雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的抑制作用,以及抑制mTOR信号通路对H_(22)肝肿瘤增殖的影响。方法 40只雄性昆明种小鼠,构模成功小鼠随机分为模型组(C组)、枸杞多糖组(L组)、有氧运动组(E组)和有氧运动联合枸杞多糖组(EL组)4组,每组10只。观察肝肿瘤体积,计算抑瘤率,HE染色观察,蛋白质印迹法检测肿瘤AMPK、mTOR和Survivin蛋白。结果各组荷瘤小鼠皮下肿瘤抑制率,L组为36.09%,E组为20.19%,EL组为54.55%。HE染色发现,C组肿瘤排列较密集、规则,E组肿瘤排列欠规则并出现较小坏死区,L组肿瘤出现坏死区且比E组明显,EL组肿瘤内部可见明显坏死区。蛋白质印迹法检测提示,L组、E组和EL组肿瘤组织AMPK蛋白表达量分别为1.54±0.23、1.09±0.17和2.03±0.29,均较C组增加,均P<0.001。与C组、L组、E组比较,EL组AMPK蛋白表达最高,均P<0.001。L组、E组和EL组肿瘤组织mTOR蛋白表达量分别为1.98±0.23、2.41±0.29和1.53±0.17,均较C组降低,F=25.876,P<0.001。与C组、L组、E组比较,EL组mTOR蛋白表达最低,均P<0.001。L组、E组和EL组肿瘤组织Survivin蛋白表达量分别为1.64±0.14、2.06±0.23和1.25±0.25,均较C组降低,F=15.457,P<0.001。与C组、L组、E组比较,EL组Survivin蛋白表达最低,均P<0.001。结论有氧运动联合枸杞多糖降通过下调H_(22)肝肿瘤细胞mTOR蛋白的表达抑制小鼠H_(22)肝肿瘤细胞增殖。 展开更多

关键词 有氧运动 枸杞多糖 H_(22)肝肿瘤细胞 抑制增殖 AMPK MTOR Survivin

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康艾冻干粉针剂的体内外抗癌活性 被引量：2

9

作者 刘璐 曾凡波 杜光 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期694-698,共5页

目的研究康艾冻干粉针剂体内外抗肿瘤细胞的活性。方法建立小鼠S180、H22肿瘤模型,测定不同浓度康艾粉针溶液体内对荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用。同时进行体外实验,选取小鼠肿瘤细胞S180、人肝癌细胞HepG2,分别以与不同浓度的康艾粉针溶液... 目的研究康艾冻干粉针剂体内外抗肿瘤细胞的活性。方法建立小鼠S180、H22肿瘤模型,测定不同浓度康艾粉针溶液体内对荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用。同时进行体外实验,选取小鼠肿瘤细胞S180、人肝癌细胞HepG2,分别以与不同浓度的康艾粉针溶液体外共同培养作为给药组,与5-Fu共同培养作为阳性对照组,并设空白对照组。MTT法检测待测药物对肿瘤细胞的抑制作用,荧光显微镜下观察药物对HepG2细胞核形态学特征的影响,采用流式细胞仪对HepG2细胞的细胞周期时相及凋亡率进行分析。结果康艾粉针在给药剂量为3~12g/kg时,对S180、H22荷瘤小鼠肿瘤均产生明显的体内抑制作用,且在该剂量范围内呈现一定的量效关系,对小鼠S180肿瘤的抑制率为20.20%~54.55%,对H22肿瘤的抑制率为30.18%~68.65%。康艾粉针对小鼠S180、人肝癌细胞HepG2的增殖均有明显的抑制作用,且具有直接杀死HepG2以及诱导HepG2凋亡的双重作用。结论康艾冻干粉针剂具有良好的体内外抗癌活性。 展开更多

关键词 康艾粉针剂 肿瘤细胞 体内外抗癌活性 增殖抑制

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肝素寡糖抑制血管内皮细胞生长的机制研究 被引量：1

10

作者 孙海娇 何书英 《药物生物技术》 CAS 2014年第6期530-533,共4页

动脉粥样硬化(AS)是一种常见的血管疾病,被认为是脑梗死常见的原因之一。以前的观点认为,AS是机体脂质代谢障碍的结果,但随着深入的研究,目前大多数学者认为AS是血管炎症性损伤的一种表现行为,认为其是内皮细胞功能发生紊乱后的炎症反... 动脉粥样硬化(AS)是一种常见的血管疾病,被认为是脑梗死常见的原因之一。以前的观点认为,AS是机体脂质代谢障碍的结果,但随着深入的研究,目前大多数学者认为AS是血管炎症性损伤的一种表现行为,认为其是内皮细胞功能发生紊乱后的炎症反应并在此基础上形成的一种损伤-修复过程。肝素作为抗凝血和抗血栓药物已被广泛应用。研究发现其还具有降血脂、抗炎、抗过敏抗肿瘤等多种生物学功能。而肝素寡糖被认为是由低分子肝素通过酶法、化学方法等降解得到的低分子肝素,然后再通过分离纯化得到。本实验考察肝素寡糖对内皮细胞增殖的影响及可能的机制。采用MTT法检测肝素寡糖对血清、血管内皮生长因子(VEGF)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响;采用流式细胞仪检测肝素寡糖对HUVEC凋亡的影响;采用Western blot法检测肝素寡糖对HUVEC内VEGF表达的影响。结果显示在血清、血管内皮生长因子诱导下,肝素寡糖对HUVEC的增殖有抑制作用,肝素寡糖可以诱导其凋亡,并且可降低细胞内VEGF的表达。以上结果为研究肝素寡糖抑制HUVEC增殖的可能分子机制奠定一定的理论基础。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 肝素寡糖 人脐静脉内皮细胞 血管内皮生长因子 抑制 增殖 细胞凋亡

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华蟾素通过支链氨基酸氨基转移酶1调控直肠癌细胞增殖的机制研究 被引量：1

11

作者 郭雄图 龚瑾 +2 位作者 练志明 包真 陈元岩 《消化肿瘤杂志（电子版）》 2020年第2期122-127,共6页

目的探究华蟾素通过支链氨基酸氨基转移酶1 (branched-chain amino acid transferase-1,BCAT1)调控直肠癌细胞增殖的机制。方法 SW480细胞分为四组:正常对照组、低浓度华蟾素组(22.5μg/L)、中浓度华蟾素组(45μg/L)、高浓度华蟾素组(90... 目的探究华蟾素通过支链氨基酸氨基转移酶1 (branched-chain amino acid transferase-1,BCAT1)调控直肠癌细胞增殖的机制。方法 SW480细胞分为四组:正常对照组、低浓度华蟾素组(22.5μg/L)、中浓度华蟾素组(45μg/L)、高浓度华蟾素组(90μg/L),分别处理12 h、24 h、48 h。QPCR、蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测SW480细胞中BCAT1表达水平。采用siRNA沉默BCAT1后,观察SW480细胞的生长状态和凋亡率。各组细胞处理后,CCK-8检测华蟾素对细胞的增殖影响;Q-PCR检测各组细胞BCAT1 mRNA表达水平;Western blot检测各组细胞BCAT1蛋白表达水平。JC-1检测各组细胞线粒体膜电位。结果 Western blot和Q-PCR结果显示SW480细胞中BCAT1高表达。不同浓度华蟾素作用直肠癌细胞后,低浓度华蟾素处理后就可以抑制SW480细胞的增殖,且在不同时间点,华蟾素能够以浓度依赖的方式显著抑制SW480细胞的活力,差异有统计学意义(P<0.05)。分别采用不同浓度华蟾素处理SW480细胞48 h后,检测各组细胞线粒体膜电位,结果显示,低浓度的华蟾素处理后,SW480细胞的线粒体膜电位降低,且随着华蟾素浓度的增高,线粒体膜电位下降显著,差异有统计学意义(P<0.05)。Q-PCR检测各组细胞BCAT1 mRNA的表达量,Western blot检测其蛋白表达量,结果显示,与正常对照组细胞相比,低浓度的华蟾素处理48 h后,BCAT1mRNA、蛋白的表达量出现明显下降,且随着华蟾素浓度的升高,BCAT1 mRNA。蛋白的表达量下降更为明显,呈浓度依赖,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默BCAT1后,细胞较正常的SW480细胞增殖率降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论华蟾素可以通过抑制BCAT1的活性来抑制直肠癌细胞的增殖。 展开更多

关键词 华蟾素 支链氨基酸转移酶1 抑制增殖 机制研究

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升气血口服液对K562细胞增殖的影响 被引量：1

12

作者 王静 魏新华 王尉平 《南通大学学报（医学版）》 2010年第1期68-70,F0003,共4页

目的:研究升气血口服液对人慢性髓系白血病细胞株K562细胞增殖的影响。方法:应用MTT法检测升气血口服液对K562细胞增殖的作用。Hoechst33258荧光染色、透射电镜观察细胞形态学变化。结果:MTT结果表明升气血口服液能抑制K562细胞增殖,且... 目的:研究升气血口服液对人慢性髓系白血病细胞株K562细胞增殖的影响。方法:应用MTT法检测升气血口服液对K562细胞增殖的作用。Hoechst33258荧光染色、透射电镜观察细胞形态学变化。结果:MTT结果表明升气血口服液能抑制K562细胞增殖,且呈时间依赖性。Hoechst33258荧光染色发现染色质凝集,着色深而呈亮蓝色,部分细胞核呈分叶、碎片状或边集。透射电镜观察升气血口服液作用的K562细胞胞质出现大量空泡变性,细胞核凝集等细胞凋亡形态学改变。结论:升气血口服液对K562细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用。 展开更多

关键词 升气血口服液 K562细胞 抑制增殖 凋亡

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NDRG2基因抑制肿瘤细胞增殖机制的研究进展

13

作者 苏志航 吴舟 《海南医学》 CAS 2020年第7期918-921,共4页

NDRG2属于NDRG (N-Myc下游调节基因)家族,是我国学者首先从人脑内克隆的一种新型广谱抑癌基因,在多种人类恶性肿瘤中发挥抑制作用。目前,NDRG2抑制肿瘤细胞增殖机制的研究主要涉及信号转换领域,而能量代谢方面的研究则很少,有待进一步... NDRG2属于NDRG (N-Myc下游调节基因)家族,是我国学者首先从人脑内克隆的一种新型广谱抑癌基因,在多种人类恶性肿瘤中发挥抑制作用。目前,NDRG2抑制肿瘤细胞增殖机制的研究主要涉及信号转换领域,而能量代谢方面的研究则很少,有待进一步研究。本文对NDRG2基因抑制肿瘤细胞增殖的机制进行综述。 展开更多

关键词 NDRG2 抑制 肿瘤细胞 增殖 进展

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大蒜提取物对血管平滑肌细胞增殖的影响

14

作者 葛炯杉 陈湛娟 +2 位作者 马静 王旭 崔静瑜 《广东化工》 CAS 2021年第22期28-29,共2页

大蒜具有广泛的食用和药用价值,其中的多种化学成分已被证实具有心血管保护作用。但其机制并未完全阐述清楚。本研究用CCK8法检测大蒜提取物对血管紧张素II诱导大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增值的影响。结果发现,大蒜提取物可显著抑制血... 大蒜具有广泛的食用和药用价值,其中的多种化学成分已被证实具有心血管保护作用。但其机制并未完全阐述清楚。本研究用CCK8法检测大蒜提取物对血管紧张素II诱导大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增值的影响。结果发现,大蒜提取物可显著抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增值。表明大蒜提取物具备通过抑制血管重构而降血压的潜力。 展开更多

关键词 大蒜提取物 胸主动脉平滑肌细胞 血管紧张素Ⅱ 抑制 增殖

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基因重组TNFα衍生物TRSP10的高效制备及其对DU145细胞抑制作用研究

15

作者 方世雄 马义 +2 位作者 沈淑桃 赵绍军 洪岸 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期11-16,共6页

利用基因工程技术表达能够促使肿瘤细胞DU145凋亡的肿瘤坏死因子α(TNFα)的衍生物TRSP10,并在体外研究其对DU145细胞的抑制效应。以重叠延伸PCR方法合成TRSP10基因序列,并插入高效表达的质粒载体p KYB-MCS的NdeⅠ和SapⅠ酶切位点之间,... 利用基因工程技术表达能够促使肿瘤细胞DU145凋亡的肿瘤坏死因子α(TNFα)的衍生物TRSP10,并在体外研究其对DU145细胞的抑制效应。以重叠延伸PCR方法合成TRSP10基因序列,并插入高效表达的质粒载体p KYB-MCS的NdeⅠ和SapⅠ酶切位点之间,优化融合蛋白诱导表达的条件,建立了从载体构建到重组菌表达、制备的工艺技术条件。MTT法检测TRSP10对前列腺癌细胞DU145增殖的抑制作用。实验结果表明:重组菌ER2566诱导表达可溶性融合蛋白的最佳条件是诱导剂IPTG浓度为0.8 mmol/L、诱导表达温度37℃、诱导表达时间8h。利用IMPACT系统及HPLC技术纯化制备TRSP10,得到产物纯度达到96%,质谱鉴定确定其分子质量为3.59k Da,与理论值相符;体外细胞学研究结果表明,TRSP10对前列腺癌细胞DU145有明显的抑制作用,在5,10,20,40μmol/L TRSP10及10μmol/L TNFα阳性对照处理后48h抑制率分别达到11.40%,22.97%,33.26%,48.35%及42.50%。 展开更多

关键词 基因工程 肿瘤坏死因子&alpha 衍生物 表达纯化 抑制增殖

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UO-126对HeLa细胞增殖及对FBW7表达的影响 被引量：6

16

作者 孙迪 沈宜 +3 位作者 汪少华 向自武 谢莹珊 姜歆 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期138-140,144,共4页

目的:观察UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞增殖及对F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用MTT法观察不同浓度的UO-126对HeLa细胞增殖的影响;免疫荧光法检测FBW7在HeLa细胞中的定位和表达;RT-PCR、Western blot检测FBW... 目的:观察UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞增殖及对F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用MTT法观察不同浓度的UO-126对HeLa细胞增殖的影响;免疫荧光法检测FBW7在HeLa细胞中的定位和表达;RT-PCR、Western blot检测FBW7 mRNA及蛋白在UO-126阻断丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein ki-nases,MAPK)信号通路前后的表达情况。结果:MTT结果显示各浓度UO-126具有抑制HeLa细胞增殖的作用,且具有剂量依赖性和时间依赖性(P<0.05)。免疫荧光检测显示UO-126处理HeLa细胞后FBW7阳性表达增强。RT-PCR及West-ern blot结果显示,UO-126作用后HeLa细胞FBW7 mRNA及蛋白表达水平较未处理HeLa细胞明显增高(P<0.05)。结论:MAPK信号通路阻断剂UO-126抑制HeLa细胞增殖,FBW7位于MAPK信号通路的下游。 展开更多

关键词 UO-126 宫颈癌细胞株(HeLa细胞) FBW7 MAPK

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二甲双胍对人胰腺癌细胞株PANC-1生长侵袭影响及其机制的探讨 被引量：7

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作者 唐曦平 唐国都 +2 位作者 方春芸 张露艺 梁志海 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第13期963-967,共5页

目的:研究二甲双胍对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖、凋亡及侵袭的影响,并初步探讨其可能机制。方法:体外培养人胰腺癌细胞株PANC-1,给予不同浓度二甲双胍进行干预作为实验组,无药物组作为对照组。MTT法检测二甲双胍对PANC-1细胞存活率的影... 目的:研究二甲双胍对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖、凋亡及侵袭的影响,并初步探讨其可能机制。方法:体外培养人胰腺癌细胞株PANC-1,给予不同浓度二甲双胍进行干预作为实验组,无药物组作为对照组。MTT法检测二甲双胍对PANC-1细胞存活率的影响;流式细胞仪检测二甲双胍对PANC-1细胞周期及细胞凋亡的影响;Transwell小室侵袭实验观察细胞侵袭能力;RT-PCR检测Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cyclin D1、MMP-2和MMP-9mRNA的表达。结果:与对照组相比,用药组细胞增殖活性明显下降,F值分别为70.318、327.201和654.196,P<0.01,且呈时间-浓度依赖性。流式细胞仪检测细胞周期结果显示,随着二甲双胍浓度的增加,G0/G1期细胞所占百分率逐渐增加,S期和G2/M期细胞所占百分率逐渐下降,F值分别为208.365、195.308和48.87,P<0.01;流式细胞仪分析对照组与实验组早期和晚期细胞凋亡率差异无统计学意义,F值分别为0.123和0.298,P>0.05。侵袭实验结果显示,随着二甲双胍浓度的增加,细胞侵袭能力逐渐下降,F=66.131,P<0.01。RT-PCR示,二甲双胍干预组Cyclin D1、MMP-2和MMP-9mRNA表达明显降低,t值分别为6.789、13.452和25.72,P<0.01;Bax、Bcl-2和Caspase-3mRNA与对照组相比差异无统计学意义,t值分别为-0.683、-1.567和0.78,P>0.05。结论:二甲双胍能显著抑制人胰腺癌细胞株PANC-1的增殖和侵袭,机制主要与其阻滞细胞周期以及影响相关基因表达有关;二甲双胍对PANC-1细胞的凋亡无明显诱导作用。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 二甲双胍 人胰腺癌细胞株PANC-1 细胞增殖 细胞凋亡 肿瘤浸润 流式细胞术

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铁皮石斛酶解多糖对姜黄素乳液功能性质的影响 被引量：4

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作者 吴唯娜 冯洁茹 +4 位作者 方静宇 邵平 孙培龙 徐靖 李振皓 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期63-70,共8页

通过酶解法获得低分子质量铁皮石斛多糖,并通过添加该多糖,用于改善乳清蛋白稳定的姜黄素乳液的功能性质。以铁皮石斛酶解多糖/乳清蛋白作为乳化系统制备荷载姜黄素的乳液,评估乳液的物理稳定性和乳液对姜黄素的保护作用;探讨荷载姜黄... 通过酶解法获得低分子质量铁皮石斛多糖,并通过添加该多糖,用于改善乳清蛋白稳定的姜黄素乳液的功能性质。以铁皮石斛酶解多糖/乳清蛋白作为乳化系统制备荷载姜黄素的乳液,评估乳液的物理稳定性和乳液对姜黄素的保护作用;探讨荷载姜黄素的乳液抑制癌细胞的效果及乳液中的姜黄素在模拟胃肠道环境中的释放情况。结果表明,酶解降低了多糖的黏性,增强了多糖的弹性;酶解后的多糖界面压力在1800 s后可增加至11.43 mN/m,能够显著改善其乳化活性;铁皮石斛酶解多糖比酶解前稳定乳液的能力更强;含有铁皮石斛酶解多糖的乳液在紫外照射4 h后,姜黄素含量仅下降了18.4%,氧化实验17 h后,姜黄素保留率为76.9%;乳液处理72 h后,Caco-2细胞活力为27.4%,显著低于只采用乳清蛋白稳定的姜黄素乳液处理的细胞组;体外模拟消化实验表明,乳液包封使得姜黄素仅在胃部少量释放,而在进入肠道后释放率达到63%,表明铁皮石斛酶解多糖的加入不会影响姜黄素在肠道中的吸收利用,而且可以保护姜黄素免受胃部的消化影响。因此,铁皮石斛酶解多糖可提高乳清蛋白稳定的荷载姜黄素的乳液的稳定性及抗癌活性,该乳液体系具有输送疏水性药物的应用价值。 展开更多

关键词 铁皮石斛多糖 酶解 姜黄素 乳液 稳定性 抑制癌细胞增殖

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鸡软骨细胞体外分离培养鉴定以及过表达miR-15a对软骨细胞的影响

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作者 张真真 李建增 +9 位作者 蒋瑞瑞 马岩超 蔡春霞 张露洁 郭玉洁 吉进卿 韩露 田亚东 康相涛 韩瑞丽 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1749-1758,共10页

为分析miR-15a在肉鸡不同组织中的表达情况,并探究过表达miR-15a对体外培养鸡软骨细胞的影响。本研究首先通过倒置显微镜观察、PCR、凝胶电泳和甲苯胺蓝染色对体外分离培养的软骨细胞进行鉴定。通过实时荧光定量PCR检测miR-15a在肢体内... 为分析miR-15a在肉鸡不同组织中的表达情况,并探究过表达miR-15a对体外培养鸡软骨细胞的影响。本研究首先通过倒置显微镜观察、PCR、凝胶电泳和甲苯胺蓝染色对体外分离培养的软骨细胞进行鉴定。通过实时荧光定量PCR检测miR-15a在肢体内外翻畸形(valgus-varus deformity,VVD)组和健康组肉鸡中(各3只)各组织的表达量。之后通过CCK8和EDU方法分析软骨细胞过表达miR-15a后细胞增殖情况。软骨细胞转染miR-15a mimics后,通过qPCR检测软骨细胞的标志基因Collagen-2、Aggrecan、Collagen-10,成熟分化基因Runx2、Sox9、VEGF、MMP9,炎性因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、TGF-β3以及凋亡基因Fas、FasL、Bcl-2的表达量。并构建FKBP53′UTR的野生型载体和突变型载体,通过双荧光素酶检测报告检测miR-15a与FKBP5的靶向关系。结果表明,本研究所用的胰蛋白酶、Ⅱ型胶原酶和透明质酸酶联合消化法成功分离得到状态良好的软骨细胞。荧光定量结果显示,miR-15a在各组织中均有表达,与健康组相比,miR-15a在VVD组的肝(P<0.01)、脾(P<0.05)、胸腺(P<0.01)中的表达量显著升高,在心和胸肌组织中的表达量显著降低(P<0.01)。CCK8与EDU分析结果显示,与NC组相比,过表达miR-15a组软骨细胞增殖速度显著降低(P<0.01),增殖细胞数量显著减少(P<0.01)。qPCR结果显示,与mimics NC组相比,miR-15a mimics组的软骨细胞标志基因Aggrecan、成熟分化基因Sox9、Runx2表达量显著降低(P<0.05),Fas基因表达量极显著上升(P<0.01),FasL基因和抗凋亡基因Bcl-2极显著下降(P<0.01)。成功构建了FKBP53′UTR野生型和突变型载体,双荧光素酶检测报告结果显示预测的靶基因FKBP5与miR-15a没有靶向关系。本研究成功分离并鉴定了鸡软骨细胞,过表达miR-15a抑制鸡软骨细胞增殖、成熟和分化并促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 鸡 软骨细胞体外分离 miR-15a 组织表达谱 抑制细胞增殖 细胞凋亡

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四丁基丙二胺对人前列腺癌PC-3细胞生长、凋亡及迁移能力的影响

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作者 康乐 王凯 +1 位作者 王艳林 盛德乔 《生命科学研究》 CAS CSCD 2016年第1期40-44,49,共6页

多胺类似物干扰正常多胺代谢,耗竭肿瘤快速生长必须的多胺。综合(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT)法、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳、细胞划痕和Transwell技术以及Western-blot分析四丁基丙二... 多胺类似物干扰正常多胺代谢,耗竭肿瘤快速生长必须的多胺。综合(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT)法、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳、细胞划痕和Transwell技术以及Western-blot分析四丁基丙二胺对肿瘤细胞生长、凋亡及侵袭能力的影响。研究发现,四丁基丙二胺可明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的生长,抑制效应呈浓度和时间的依赖性。四丁基丙二胺可诱导人前列腺癌PC-3细胞染色体DNA发生片段化降解,降低细胞内凋亡抑制蛋白(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)水平,但增加促凋亡蛋白细胞色素C在胞浆中的含量,明显抑制细胞周期并降低细胞的转移能力。结果表明四丁基丙二胺可抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖和迁移,其机制与干扰细胞周期和诱导细胞凋亡密切相关。 展开更多

关键词 多胺 多胺类似物 前列腺癌细胞 细胞凋亡 细胞增殖 细胞迁移

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