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基于Raf/MEK/ERK通路探讨平胃胶囊含药血清对MNNG诱导的人胃黏膜上皮细胞炎癌转化的影响
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作者 汪霞 王丽娟 +4 位作者 牛小英 樊泽坤 牛媛媛 毛兰芳 汪龙德 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2024年第10期1056-1062,共7页
目的从快速加速纤维肉瘤/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶/细胞外信号调节激酶(Raf/MEK/ERK)通路探讨平胃胶囊治疗慢性萎缩性胃炎的可能作用机制。方法15只SD大鼠随机分为空白组5只、平胃胶囊组10只,空白组大鼠给予1 ml/100 g的生理盐... 目的从快速加速纤维肉瘤/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶/细胞外信号调节激酶(Raf/MEK/ERK)通路探讨平胃胶囊治疗慢性萎缩性胃炎的可能作用机制。方法15只SD大鼠随机分为空白组5只、平胃胶囊组10只,空白组大鼠给予1 ml/100 g的生理盐水灌胃,平胃胶囊组大鼠给予平胃胶囊混悬液0.63 g/(kg·d)灌胃,连续3天后采集血清。采用N-甲基-N-硝基-亚硝基胍(MNNG)诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1建立癌前病变细胞模型。将造模成功细胞分为对照组(10%胎牛血清)、空白血清组(10%胎牛血清+10%空白血清)、含药血清组(平胃胶囊含药血清),采用CCK-8法筛选平胃胶囊含药血清干预体积分数及时间。将人胃黏膜上皮细胞GES-1分为正常组、模型组、空白血清组、含药血清组、U0126组、联合组,每组3个复孔。除空白组外其余各组细胞造模成功后,正常组和模型组加入等体积的胎牛血清,空白血清组加入等体积的空白血清,含药血清组加入筛选确认的体积分数的平胃胶囊含药血清,U0126组给予10μmol/L的丝裂原活化的细胞外信号调节激酶1(MEK1)抑制剂U0126,联合组给予等体积的平胃胶囊含药血清+10μmol/L的U0126。培养筛选确认的时间后,ELISA法检测细胞上清中白细胞介素6(IL-6)水平,免疫荧光检测细胞中IL-6、MEK1的表达,RT-qPCR法检测细胞IL-6、Raf、MEK1、ERK mRNA表达,Western Blot法检测细胞IL-6、Raf、MEK1、ERK1/2蛋白表达。结果选取5.35%的体积分数、干预48 h的平胃胶囊含药血清进行后续实验。与正常组比较,模型组、空白血清组细胞上清中IL-6含量,细胞中IL-6、Raf、MEK1、ERK mRNA及IL-6、Raf、MEK1、ERK1/2蛋白表达均升高(P<0.01)。与模型组比较,含药血清组、U0126组、联合组上述各指标均下降(P<0.05或P<0.01)。与含药血清组比较,联合组细胞中IL-6、MEK1表达,IL-6、Raf、MEK1、ERK mRNA表达,IL-6、Raf、MEK1、ERK1/2蛋白表达均降低(P<0.05 展开更多
关键词 慢性萎缩性胃炎 平胃胶囊 人胃黏膜上皮细胞 炎癌转化 快速加速纤维肉瘤 丝裂原活化的细胞外信号调节激酶 细胞外信号调节激酶
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