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题名淀粉酶基因的克隆及其在工业啤酒酵母中的表达
被引量：4
- 1
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作者
刘增然
何秀萍
龙章富
张博润
刘世贵
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机构
四川大学生命科学院
中科院微生物研究所
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出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2004年第9期78-82,共5页
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文摘
以扣囊复膜孢酵母菌总DNA为模板, 通过PCR扩增克隆到约1.5kb的α-淀粉酶基因(AMY)。用酵母菌穿梭载体YEp352为出发质粒,磷酸甘油酸激酶基因1(PGK1)启动子和乙醇脱氢酶基因1(ADH1)终止子为调控元件构建了含α-淀粉酶基因编码序列的酵母菌重组表达质粒pLA8。pLA8导入工业啤酒酵母菌,在以淀粉为唯一碳源的YNBS培养基上筛选阳性转化子,转化子培养液中α-淀粉酶活性为1.1U/ml,细胞破碎液的酶活性为0.3U/ml,而受体菌培养液及细胞破碎液中未检测到α-淀粉酶活性。
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关键词
淀粉酶基因
啤酒酵母
基因表达
PCR扩增克隆
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Keywords
industrial strain of S. cerevisiae
amylase
gene cloning and expression
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分类号
TS261.11
[轻工技术与工程—发酵工程]
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题名后熟期短的酿酒酵母工程菌构建
被引量：4
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作者
刘增然
张光一
鞠国泉
冉会来
蔡亚男
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机构
河北经贸大学生物科学与工程学院
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出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2006年第8期83-86,共4页
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基金
河北省科技厅研究课题(18505215503)
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文摘
借助质粒pBluescriptM13-,以淀粉酶基因(AMY)为筛选标记构建乙酰乳酸合成酶基因(ILV2)的重组整合质粒pMGI。用重组质粒pMGI所含ilv2∷AMY嵌合基因片段转化工业酿酒酵母菌Sc11,获得转化子(Sc11-ilv)。Sc-11-ilv不含细菌载体序列和酵母抗药性标记,所表达的乙酰乳酸合成酶活性降低30%;模拟发酵实验表明Sc11-ilv发酵液的双乙酰含量降低70%,Sc11-ilv发酵性能保持不变,遗传稳定性为100%,可以比较安全地用于啤酒生产。
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关键词
工业酿酒酵母菌
α-乙酰乳酸合成酶基因(ILV2)
基因破坏
双乙酰
发酵
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Keywords
industrial strain of S.cerevisiae： acetolactate synthase gene （ILV2）
gene disruption
diacetyl
fermentation
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分类号
Q539
[生物学—生物化学]
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