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急性期川崎病患儿CD4^+CD25^highFOXP3^+调节性T细胞亚群改变及意义 被引量:6
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作者 温鹏强 赵俊山 +5 位作者 齐中香 唐根 崔冬 张民 李成荣 王国兵 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期91-96,共6页
目的 探讨急性期川崎病患儿CD4^+CD25^highFOXP3^+调节性T细胞亚群改变及其在川崎病免疫发病机制中的作用.方法 急性期川崎病患儿36例,同年龄健康对照组32名,川崎病患儿治疗前、后取血备检.采用流式细胞术检测外周血CD4^+CD25^highFO... 目的 探讨急性期川崎病患儿CD4^+CD25^highFOXP3^+调节性T细胞亚群改变及其在川崎病免疫发病机制中的作用.方法 急性期川崎病患儿36例,同年龄健康对照组32名,川崎病患儿治疗前、后取血备检.采用流式细胞术检测外周血CD4^+CD25^highFOXP3^+、可诱导性T细胞共刺激分子(ICOS)^+调节性T细胞、ICOS-调节性T细胞比例及IL-10、TGF-β、IL-35p35、IL-35EBI3、TGF-βRⅡ、ICOS、CD28蛋白表达水平;实时荧光定量PCR检测CD4^+T细胞Smad3/4、TGF-β诱导的早期反应基因1(TIEG1)、痒同源物E3泛素蛋白连接酶(hch)等mRNA表达;ELISA检测血浆中TGF-β浓度.采用t检验进行统计分析.结果 ①急性期川崎病患儿调节性T细胞比例[(3.2±1.8)%]明显低于对照组[(7.3±2.9)%,t=6.9,P<0.05],其中ICOS^+调节性T细胞和ICOS^-调节性T细胞比例[(2.3±1.0)%,(0.9±0.3)%]均明显低于健康对照组[(4.7±1.4)%,(2.6±0.9)%,t=11.7,9.8;P均<0.05],且ICOS+调节性T细胞/ICOS^-调节性T细胞比值(2.6±0.7)高于对照组[(1.8±0.5),t=9.4,P< 0.05],治疗后均明显恢复[(5.9±2.3)%,(3.9±1.6)%,(2.0±0.8)%,(1.9±0.5)%;t=5.5,5.0,8.2,4.9;P均<0.05];②急性期川崎病患儿ICOS+调节性T细胞FOXP3、IL-10、TGF-β、IL-35p35和IL-35EBI3表达水平明显低于对照组(t=5.5,4.8,8.0,6.6,9.6;P均<0.05),而ICOS-调节性T细胞FOXP3、mTGF-β表达亦低于对照组(t=7.5,10.0;P均<0.05),治疗后上述分子表达显著上调(t=3.7,3.7,8.5,6.1,7.7,5.3,7.0;P均<0.05);③急性期川崎病患儿血浆TGF-β浓度及CD4+T细胞TGF-βRⅡ、Smad3、Smad4、TIEG1、Itch表达水平明显低于对照组,调节性T细胞表面ICOS、CD28表达亦低于健康对照组,治疗后均明显恢复.结论 TGF-β、ICOS、CD28信号异常可能是导致急性期川崎病患儿CD4^+CD25^highFOXP3^+调节性T细胞及其亚群比例失调的重要因素. 展开更多
关键词 黏膜皮肤淋巴结综合征 T淋巴细胞 调节性 抗原 CD28 FOXP3 可诱导性T细胞共刺激分子
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T细胞可诱导共刺激分子配体胞外段基因的克隆与表达 被引量:1
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作者 汲翔 郭勋 +2 位作者 范丹丹 康巧珍 袁维堂 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2020年第2期233-236,共4页
目的:克隆T细胞可诱导共刺激分子配体胞外段(ICOSL-N)基因,构建pET22b-ICOSL-N-Ig原核表达载体,实现ICOSL-N与IgG4体外融合表达。方法:设计并合成T细胞ICOSL-N和IgG4基因特异性引物,RT-PCR法从小鼠脾脏中克隆出ICOSL-N,PCR重叠延伸技术... 目的:克隆T细胞可诱导共刺激分子配体胞外段(ICOSL-N)基因,构建pET22b-ICOSL-N-Ig原核表达载体,实现ICOSL-N与IgG4体外融合表达。方法:设计并合成T细胞ICOSL-N和IgG4基因特异性引物,RT-PCR法从小鼠脾脏中克隆出ICOSL-N,PCR重叠延伸技术将ICOSL-N与IgG4基因融合,构建原核表达载体pET22b-ICOSL-N-Ig,转化E.coli BL21(DE3)工程菌,筛选鉴定阳性克隆,IPTG诱导阳性重组子,SDS-PAGE法鉴定融合蛋白ICOSL-N-Ig的表达。结果:融合基因ICOSL-N-Ig的PCR扩增产物大小约1425 bp,符合理论值;原核表达载体pET22b-ICOSL-N-Ig经酶切、PCR和测序鉴定结果符合预期;在诱导后的菌体中检测出大小为53800的蛋白诱导条带,且与目标蛋白的大小一致。结论:成功克隆ICOSL-N基因,实现ICOSL-N在E.coli BL21(DE3)工程菌中与IgG4的融合表达。 展开更多
关键词 T细胞可诱导共刺激分子 可诱导共刺激分子配体
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日本血吸虫感染可诱导共刺激分子配体基因敲除小鼠CD154和CD40动态变化及对Th1/Th2偏移的影响 被引量:4
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作者 王瑜 夏超明 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期898-904,共7页
目的:探讨可诱导共刺激分子(inducible costimulator,ICOS)-ICOS配体(ICOS ligand,ICOSL)信号通路对感染日本血吸虫小鼠的CD154、CD40表达及Th1/Th2偏移的影响。方法:建立ICOSL基因敲除(ICOSL knockout,ICOSL-KO)小鼠及野生型C57BL/6J... 目的:探讨可诱导共刺激分子(inducible costimulator,ICOS)-ICOS配体(ICOS ligand,ICOSL)信号通路对感染日本血吸虫小鼠的CD154、CD40表达及Th1/Th2偏移的影响。方法:建立ICOSL基因敲除(ICOSL knockout,ICOSL-KO)小鼠及野生型C57BL/6J小鼠感染日本血吸虫疾病模型,于感染前和感染后4、7、12、16、20周,应用流式细胞术、免疫组织化学法分别检测小鼠脾细胞与肝虫卵肉芽肿周围炎性浸润细胞CD154、CD40的水平;应用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠脾细胞经可溶性虫卵抗原(soluble egg antigen,SEA)诱导72 h后培养的上清液中γ-干扰素(interferon gamma,IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)水平及小鼠血清中SEA特异性抗体Ig G、Ig G1、Ig G2a的水平;应用HE染色观察小鼠肝虫卵肉芽肿病变动态变化。结果:感染后4、7、12、16、20周,ICOSL-KO小鼠脾细胞CD154、CD40水平与野生型小鼠相比,显著降低[CD154为(18.62±4.76)%vs.(27.91±3.94)%、(22.44±4.67)%vs.(40.86±5.21)%、(25.50±6.81)%vs.(43.81±8.41)%、(20.22±5.28)%vs.(40.95±7.34)%、(17.87±4.59)%vs.(33.16±6.31)%,皆P<0.01;CD40为(19.43±3.26)%vs.(24.37±3.59)%、(23.00±4.47)%vs.(31.80±5.86)%、(24.46±5.01)%vs.(35.85±5.32)%、(23.42±4.69)%vs.(33.30±6.14)%、(22.85±3.78)%vs.(30.88±5.94)%,皆P<0.05]。感染后7、12、16、20周,ICOSL-KO小鼠肝虫卵肉芽肿炎性浸润细胞CD154、CD40水平与野生型小鼠相比,亦显著降低[CD154为(0.319±0.066)vs.(0.488±0.086)、(0.389±0.067)vs.(0.596±0.082)、(0.378±0.064)vs.(0.543±0.072)、(0.348±0.069)vs.(0.523±0.076),皆P<0.01;CD40为(0.398±0.066)vs.(0.546±0.079)、(0.461±0.085)vs.(0.618±0.076)、(0.453±0.087)vs.(0.587±0.074)、(0.449±0.065)vs.(0.565±0.082),皆P<0.05]。感染后,ICOSL-KO小鼠IFN-γ表达显著高于野生型小鼠(P<0.05),而IL-4表达水平则显著低于野生型小鼠(P<0.05),其Th2分化指数亦显著低于野生型小鼠(P<0.01)。ICOSL-KO小鼠血清SEA特异性� 展开更多
关键词 可诱导共刺激分子 CD40配体 TH1/TH2平衡 日本血吸虫 小鼠 基因敲除
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B7-H3在急性胰腺炎大鼠血清中的表达及意义 被引量:3
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作者 徐之静 刘永爱 汪良芝 《临床荟萃》 CAS 2013年第12期1374-1376,共3页
目的观察急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)大鼠血清协同刺激分子B7家族3(B7-H3)表达水平的变化及其与肿瘤坏死因子α(TNF-α)、胰腺病理学评分的关系,探讨其在AP发病过程中的作用及意义。方法健康雄性SD大鼠30只,随机分为5组:对照组,A... 目的观察急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)大鼠血清协同刺激分子B7家族3(B7-H3)表达水平的变化及其与肿瘤坏死因子α(TNF-α)、胰腺病理学评分的关系,探讨其在AP发病过程中的作用及意义。方法健康雄性SD大鼠30只,随机分为5组:对照组,AP模型组(分为AP 6h组、AP 12h组、AP 24h组、AP 48h组),每组6只。酶联免疫吸附测定法测定血清B7-H3和TNF-α水平并分析两者表达水平变化的相关性;切取胰腺组织行胰腺病理学评分并分析其与B7-H3表达水平变化的相关性;全自动生化分析仪测定血清淀粉酶水平。结果 AP组血清中B7-H3、TNF-α和淀粉酶水平及胰腺病理学评分均显著高于对照组(P<0.01)。血清B7-H3与TNF-α水平和胰腺病理学评分变化均呈显著正相关(r=0.969、0.952,均P<0.01)。结论协同刺激分子B7-H3在AP血清中的表达水平与AP病情的严重程度有关,B7-H3可能通过影响TNF-α的产生而参与了AP的炎症反应过程。 展开更多
关键词 胰腺炎 急性坏死性 可诱导的T细胞共刺激配体 肿瘤坏死因子Α
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ICOS在结直肠癌组织中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 吕强 李靖 +2 位作者 钟鸣 骆洋 蔡晓燕 《胃肠病学》 2019年第6期335-339,共5页
背景:可诱导T细胞共刺激分子(ICOS)属于B7-CD28免疫球蛋白家族,参与细胞增殖、分化以及免疫应答等多种生物学过程,其表达异常与肿瘤免疫逃逸密切相关。目的:探讨ICOS在结直肠癌中的表达及其临床意义。方法:收集32对新鲜结直肠癌组织和... 背景:可诱导T细胞共刺激分子(ICOS)属于B7-CD28免疫球蛋白家族,参与细胞增殖、分化以及免疫应答等多种生物学过程,其表达异常与肿瘤免疫逃逸密切相关。目的:探讨ICOS在结直肠癌中的表达及其临床意义。方法:收集32对新鲜结直肠癌组织和相应癌旁非癌组织,以及211例石蜡包埋结直肠癌组织,分别采用real-timePCR和免疫组化法检测ICOSmRNA和蛋白表达,分析其表达与患者临床病理特征和预后的相关性。结果:与非癌组织相比,ICOS在结直肠癌组织中呈低表达(P<0.05),其表达与肿瘤大小、血清CEA水平、淋巴结转移、远处转移和TNM分期呈显著负相关(P均<0.05),与肿瘤发生部位无明显相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,结直肠癌患者ICOS表达水平越低,预后越差(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,ICOS表达水平是结直肠癌患者的临床预后指标之一(HR=0.821,95%CI:0.588~0.912,P=0.034)。结论:ICOS低表达可能在结直肠癌的发生、发展中发挥重要作用,并与预后不良相关。ICOS有望成为结直肠癌预后的分子标志物。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 可诱导的T细胞共刺激蛋白 肿瘤分期 预后
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结核杆菌H37Ra对肺的Ⅱ型上皮细胞B7-H2表达的调控 被引量:1
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作者 仝宇红 郑颖 +4 位作者 钱雪松 王欣 张金梁 刘冰慧 邢江涛 《临床荟萃》 CAS 2014年第8期899-902,F0002,共5页
目的探讨结核杆菌H37Ra对诱导共刺激分子(ICOS)的配体B7-H2表达的影响。方法体外培养肺泡Ⅱ型细胞A549并且从人外周血中分离B淋巴细胞,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析hGL50和B7-H2在两种细胞中不同的表达。A549细胞分别用结核杆... 目的探讨结核杆菌H37Ra对诱导共刺激分子(ICOS)的配体B7-H2表达的影响。方法体外培养肺泡Ⅱ型细胞A549并且从人外周血中分离B淋巴细胞,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析hGL50和B7-H2在两种细胞中不同的表达。A549细胞分别用结核杆菌H37Ra,脂多糖(LPS)和白细胞介素4(IL-4)诱导4、8、12小时,用RT-PCR方法分析B7-H2的表达。用免疫荧光方法分析B7-H2分子在A549细胞表面的表达。用流式细胞方法分析H37Ra、干扰素γ(IFN-γ)和IL-4诱导4小时和24小时后A549细胞B7-H2和CD40分子表达情况。结果B7-H2mRNA在A549细胞表达,hGL50mRNA在B细胞高表达。与LPS、IL-4相比,结核杆菌H37Ra可以诱导A549细胞高表达B7-H2。免疫荧光染色可以看到A549细胞高表达B7-H2分子。流式细胞结果显示,与IFN-γ和IL-4相比,结核杆菌H37Ra可以显著诱导A549细胞表面表达B7-H2分子。结论 ICOS配体B7-H2表达于肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,结核杆菌H37Ra诱导可从mRNA和蛋白水平显著提高B7-H2的表达。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 肺泡 上皮细胞 可诱导的T细胞共刺激配体
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