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沙丁胺醇人工抗原的制备及ic-ELISA方法的建立 被引量：6
1
作者 崔芳微 郭东光 +5 位作者 李文明 朱艳平 李鹏 孙国鹏 岳锋 王选年 《动物医学进展》 北大核心 2021年第5期42-49,共8页
以合成沙丁胺醇(SAL)完全抗原为基础获得针对SAL的多克隆抗体,建立检测SAL的间接竞争ELISA(ic-ELISA)检测方法,为进一步开发SAL快速检测试剂盒奠定基础。为此,分别用混合酸酐法和活化酯法制备SAL-BSA免疫原和SAL-OVA检测原,免疫新西兰... 以合成沙丁胺醇(SAL)完全抗原为基础获得针对SAL的多克隆抗体,建立检测SAL的间接竞争ELISA(ic-ELISA)检测方法,为进一步开发SAL快速检测试剂盒奠定基础。为此,分别用混合酸酐法和活化酯法制备SAL-BSA免疫原和SAL-OVA检测原,免疫新西兰大白兔获得SAL多抗血清,建立检测SAL ic-ELISA检测方法。结果显示,成功合成了SAL-BSA和SAL-OVA,其偶联比分别为17∶1和6.4∶1;免疫后兔血清抗体效价为1∶102400,所建立ic-ELISA的半数抑制浓度(IC_(50))为24.84μg/L,最低检测限(IC_(10))为0.78μg/L,线性范围IC_(20)~IC_(80)为3.16μg/L~80.1μg/L;精密度(CV)%<10%,回收率在98%~110%之间。特异性鉴定结果显示,SAL多抗血清除与侧链上含有叔丁基官能团的结构类似物具有较强的交叉反应外,不存在与其他同类分子的交叉反应。以上结果表明,成功建立了检测SAL的ic-ELISA检测方法,为进一步开发SAL快速检测试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 沙丁胺醇 人工抗原 多克隆抗体 间接竞争elisa
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农产品中玉米赤霉醇ELISA检测试剂盒的研制与应用 被引量：2
2
作者 王东 王刚 饶力群 《安徽农业科学》 CAS 2014年第20期6764-6766,6837,共4页
[目的]建立快速、有效检测农产品中玉米赤霉醇（ZER）残留量的方法。[方法]试验以人工合成的ZER为包被原，ZER为竞争半抗原，两者与一定量的抗玉米赤霉醇单克隆抗体反应，应用间接竞争ELISA法建立玉米赤霉醇单克隆抗体快速检测农产品中... [目的]建立快速、有效检测农产品中玉米赤霉醇（ZER）残留量的方法。[方法]试验以人工合成的ZER为包被原，ZER为竞争半抗原，两者与一定量的抗玉米赤霉醇单克隆抗体反应，应用间接竞争ELISA法建立玉米赤霉醇单克隆抗体快速检测农产品中ZER含量的半定量检测，同时对该ELISA试剂盒进行了调试。[结果]试验建立检测ZER的ELISA方法，其最适包被浓度为1：5000，抗体最适工作浓度为1：2500，酶标二抗的最适工作浓度为1：5000。试剂盒检测限为0．5ng／ml，添加回收率在70．0％-116．0％，变异系数小于20％，在2～8℃条件下可保存90d。[结论]该试验建立的方法可应用于玉米、小麦、高粱等中的玉米赤霉醇的检测，应用前景广阔。 展开更多
关键词 玉米赤霉醇 单克隆抗体 间接竞争 检测限 elisa
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氯霉素间接竞争ELISA检测方法的建立 被引量：2
3
作者 郭秀丽 赵丽花 +3 位作者 庞永宏 梁建飞 牛斌 魏东 《河南科技学院学报（自然科学版）》 2020年第3期22-26,共5页
为了对动物性食品中氯霉素(CAP)进行快速检测,以CAP与卵清蛋白(OVA)偶联合成的CAP-OVA为包被抗原,CAP为竞争的半抗原,通过优化反应条件,建立间接竞争ELISA检测方法.结果显示:最佳包被抗原质量浓度为0.25μg/mL,单克隆抗体稀释倍数为1∶3... 为了对动物性食品中氯霉素(CAP)进行快速检测,以CAP与卵清蛋白(OVA)偶联合成的CAP-OVA为包被抗原,CAP为竞争的半抗原,通过优化反应条件,建立间接竞争ELISA检测方法.结果显示:最佳包被抗原质量浓度为0.25μg/mL,单克隆抗体稀释倍数为1∶32000,酶标二抗稀释倍数为1∶4000,最低检测限为1.01 ng/mL,批内和批间变异系数分别为3.80%和6.30%,建立的回归方程为y=-10.7x+66.042(R2=0.9969),建立了快速检测氯霉素残留的间接竞争ELISA法. 展开更多
关键词 氯霉素 残留检测 间接竞争elisa
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牛奶中玉米赤霉烯酮和氯霉素二合一检测芯片的开发研究
4
作者 李丽 张晓龙 +3 位作者 任帅 丁乔棋 宋素泉 闫丽萍 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第3期15-19,23,175,共7页
为了开发出能同时检测玉米赤霉烯酮(ZEN)和氯霉素(CAP)的二合一免疫芯片,试验首先制备抗ZEN的单克隆抗体,并结合抗CAP多克隆抗体采用间接竞争ELISA方法进行芯片组装,最终确定定量标准曲线,并进行加标样品的检测。结果表明:共筛选得到3株... 为了开发出能同时检测玉米赤霉烯酮(ZEN)和氯霉素(CAP)的二合一免疫芯片,试验首先制备抗ZEN的单克隆抗体,并结合抗CAP多克隆抗体采用间接竞争ELISA方法进行芯片组装,最终确定定量标准曲线,并进行加标样品的检测。结果表明:共筛选得到3株抗ZEN的单克隆抗体(1C5、2B10、4F3),选择其中的1株杂交瘤细胞1C5制备小鼠腹水,抗体效价为5.12×10~4,半抑制浓度(IC_(50))为6.57 ng/mL。试验建立的免疫芯片对ZEN和CAP的最低检测限分别为2.84 ng/mL、9.49 ng/mL。在牛奶加标回收试验中,ZEN回收率为95.2%～109.8%,CAP回收率为95.1%～100.3%,回收率均较高,且与高效液相色谱(HPLC)法检测结果有良好的相关性,变异系数(CV)小于15.0%。说明该芯片能用于检测实际样品中的ZEN和CAP。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 氯霉素 免疫芯片 单克隆抗体 间接竞争elisa法 化学发光
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同时检测动物样品中四种磺胺药物残留的膜基质免疫分析法 被引量：5
5
作者 曹喜春 许杨 +1 位作者 何庆华 刘星 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期65-69,81,共6页
建立了一种简便、快速、可靠的膜免疫芯片检测牛奶和猪肝样品中磺胺类药物总量的方法。以PVDF膜作为固相基质,通过优化包被抗原浓度和抗体的工作浓度,研究出了检测磺胺药物膜免疫分析法。结果表明,该法检测牛奶和猪肝样品中四种磺胺药物... 建立了一种简便、快速、可靠的膜免疫芯片检测牛奶和猪肝样品中磺胺类药物总量的方法。以PVDF膜作为固相基质,通过优化包被抗原浓度和抗体的工作浓度,研究出了检测磺胺药物膜免疫分析法。结果表明,该法检测牛奶和猪肝样品中四种磺胺药物(磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲嘧啶和磺胺对甲氧嘧啶)总量的检测阈值为50μg/kg,可以用于磺胺药物总量的筛查。此外,分别采用本方法、Ic-ELISA和HPLC测定了市场上随机购买的20份牛奶和8份猪肝样品,三者结果基本一致。本法结果可靠、简便直观、无需特殊的检测仪器,适合于在线监测和收购现场的快速检测。 展开更多
关键词 聚偏氟乙烯膜 磺胺类药物 膜免疫检测 动物样品 间接竞争酶联免疫检测
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食品中黄曲霉毒素M_(1)的间接竞争酶联免疫法的建立
6
作者 侯悦 陈瑞鹏 +3 位作者 芦然 高志贤 周焕英 杨仕平 《食品研究与开发》 CAS 2024年第3期181-186,共6页
该文建立一种间接竞争酶联免疫法(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)快速测定食品中黄曲霉毒素M_(1)(aflatoxin M_(1),AFM_(1))的分析方法。AFM_(1)标准品用甲醇稀释,AFM_(1)标准品与AFM_(1)全抗原竞... 该文建立一种间接竞争酶联免疫法(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)快速测定食品中黄曲霉毒素M_(1)(aflatoxin M_(1),AFM_(1))的分析方法。AFM_(1)标准品用甲醇稀释,AFM_(1)标准品与AFM_(1)全抗原竞争结合AFM_(1)单克隆抗体,利用3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(3,3′,5,5′-tetramethylbenzidine,TMB)单组分显色液显色后,酶标仪测定吸光度。在优化好的条件下,浓度范围为9.743~2.605×10^(3)pg/mL时具有良好的线性关系,相关系数(determination coefficient,R^(2))为0.9927,检出限IC_(10)为3.84 pg/mL,加标回收率为88.43%~105.75%。该方法适用性好、操作简单、灵敏度高,满足食品中AFM_(1)分析检测的需求。 展开更多
关键词 间接竞争酶联免疫法 黄曲霉毒素M_(1) 快速检测 食品 试剂盒
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不同糖与乳清蛋白的美拉德反应对β-乳球蛋白致敏性的影响 被引量：3
7
作者 曹寒馨 汪何雅 钱和 《乳业科学与技术》 2012年第1期1-3,共3页
通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳与间接竞争酶联免疫吸附法研究不同种类糖与乳清蛋白发生美拉德反应后对β-乳球蛋白致敏性的影响。结果显示:五碳糖效果好于六碳糖,单糖效果好于多糖,加热后热降解的多糖效果好于热稳定的多糖;综... 通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳与间接竞争酶联免疫吸附法研究不同种类糖与乳清蛋白发生美拉德反应后对β-乳球蛋白致敏性的影响。结果显示:五碳糖效果好于六碳糖,单糖效果好于多糖,加热后热降解的多糖效果好于热稳定的多糖;综合褐变率与抑制率,低聚木糖对风味的影响较小,褐变率显示低聚木糖对感官影响较小,且降低致敏性效果较好。 展开更多
关键词 Β-乳球蛋白 抗过敏 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 间接竞争酶联免疫吸附
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