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鸭瘟病毒抗体间接ELISA检测试剂盒的研制 被引量:9
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作者 齐雪峰 程安春 +3 位作者 汪铭书 杨晓燕 贾仁勇 陈孝跃 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期690-694,共5页
将鸭瘟病毒(DPV)CHv株经过鸭胚成纤维细胞增殖、反复冻融、差速离心和蔗糖密度介质离心制备纯化抗原,建立了用于检测鸭血清中抗DPV特异性IgG抗体的间接ELISA方法,并对其进行了标准化研究,确定了最佳工作条件,研制了相应的检测试剂盒并... 将鸭瘟病毒(DPV)CHv株经过鸭胚成纤维细胞增殖、反复冻融、差速离心和蔗糖密度介质离心制备纯化抗原,建立了用于检测鸭血清中抗DPV特异性IgG抗体的间接ELISA方法,并对其进行了标准化研究,确定了最佳工作条件,研制了相应的检测试剂盒并对盒内各组分的保存条件、质量控制以及试剂盒的特异性、重复性进行了研究。结果显示,4.75μg/孔的纯化DPV抗原包被反应板可获得良好的特异性和敏感性,1∶100稀释的待检血清样品反应后D405 nm值换算为抗体效价的标准直线方程为y=1.573+3.552x(r=0.953,n=40)。试剂盒在4℃保存3个月或-20℃保存10个月后各项性能都很好。应用该试剂盒对皮下注射、口服和滴鼻免疫DPV弱毒的20日龄樱桃谷鸭血液中抗DPV特异性IgG抗体效价进行了测定,皮下免疫鸭于第6 d,口服和滴鼻免疫鸭于第9 d可在血清中检测到DPV特异性抗体,且至第60 d时依然可检测到高效价抗体。证实,该试剂盒可用于鸭瘟的血清流行病学调查和鸭场免疫抗体水平的监测。 展开更多
关键词 鸭瘟病毒抗体 间接elisa 试剂盒
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传染性法氏囊病病毒抗体检测诊断试剂盒的研制与应用 被引量:6
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作者 伊岚 李健强 +2 位作者 梁荣 张耀相 陈杰 《中国畜禽传染病》 CSCD 1998年第6期361-364,共4页
本文用提纯的IBDV细胞毒为抗原,抗鸡Ig单抗1B7HRP酶结合物为第二抗体建立了检测IBDV抗体的间接ELISA。在此基础上研制出IBDV抗体检测诊断试剂盒。经对1200份血清进行检测,结果表明:本试剂盒特异性... 本文用提纯的IBDV细胞毒为抗原,抗鸡Ig单抗1B7HRP酶结合物为第二抗体建立了检测IBDV抗体的间接ELISA。在此基础上研制出IBDV抗体检测诊断试剂盒。经对1200份血清进行检测,结果表明:本试剂盒特异性强,灵敏度高,重复性好,快速稳定,易于操作,为雏鸡IBDV母原抗体和疫苗注射后特异性抗体检测提供了可靠的诊断工具。 展开更多
关键词 IBDV抗体 IBDV抗体 检测诊断 试剂盒
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布鲁菌OMP28蛋白的原核表达与间接ELISA方法的建立 被引量:5
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作者 张小娟 贾广乐 +5 位作者 廖娟红 梅琳 王慧煜 李桂兰 张映 韩雪清 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第1期6-11,共6页
对布鲁菌Omp28基因进行大肠埃希菌表达,用表达的布鲁菌重组蛋白Omp28作为抗原包被酶标板,建立检测布鲁菌抗体间接ELISA方法,进一步研发试剂盒,用该试剂盒和IDEXX抗体检测试剂盒同时对540份临床牛血清样品进行检测,评价二者的符合率。反... 对布鲁菌Omp28基因进行大肠埃希菌表达,用表达的布鲁菌重组蛋白Omp28作为抗原包被酶标板,建立检测布鲁菌抗体间接ELISA方法,进一步研发试剂盒,用该试剂盒和IDEXX抗体检测试剂盒同时对540份临床牛血清样品进行检测,评价二者的符合率。反应条件优化后,该试剂盒的抗原包被浓度为1μg/mL,作用条件为37℃1h;封闭液为50g/L脱脂乳,作用时间为30min;血清稀释度为1∶200,作用时间为30min;酶标二抗稀释度为1∶3×104,作用时间为30min;与IDEXX抗体检测试剂盒的符合率达96.67%,证明该试剂盒可用于临床牛布鲁菌抗体的检测。 展开更多
关键词 布鲁菌 重组蛋白Omp28 间接elisa 试剂盒
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猪伪狂犬病病毒gE蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量:4
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作者 寇晓晶 高峰 +1 位作者 郭慧琳 刘剑锋 《中国动物检疫》 CAS 2018年第5期91-94,共4页
以原核表达的猪伪狂犬病毒gE蛋白为包被抗原,建立间接ELISA方法并进行相应优化,研制出了猪伪狂犬病毒间接ELISA抗体检测试剂盒,并与国内市场标杆产品进行比较,发现阳性符合率为88.03%,阴性符合率为91.47%,总体符合率达到89.84%。同时,... 以原核表达的猪伪狂犬病毒gE蛋白为包被抗原,建立间接ELISA方法并进行相应优化,研制出了猪伪狂犬病毒间接ELISA抗体检测试剂盒,并与国内市场标杆产品进行比较,发现阳性符合率为88.03%,阴性符合率为91.47%,总体符合率达到89.84%。同时,该试剂盒批间、批内变异系数均小于10%,具有较好的重复性。该检测试剂盒的研制,可为猪场猪伪狂犬病毒野毒感染的检测提供技术支撑。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 gE蛋白 间接elisa试剂盒 符合率
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