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新型冠状病毒RNA标准物质 被引量:8
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作者 许丽 梁文 +15 位作者 杨雪 闻艳丽 李兰英 杨镇州 李妍 邓敏 陆青 丁敏 任淑贞 孙洁林 左小磊 王丽华 曹程明 胡钧 刘刚 樊春海 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第22期2363-2370,共8页
研制了一种新型冠状病毒(coronavirus, SARS-CoV-2)体外转录RNA标准物质,用于SARS-CoV-2病毒RNA检测的量值溯源.目标基因范围涵盖已公布的SARS-CoV-2病毒检测的3个主要靶标基因:核壳蛋白N基因全长(基因组坐标:28274-29533, GenBank:MT02... 研制了一种新型冠状病毒(coronavirus, SARS-CoV-2)体外转录RNA标准物质,用于SARS-CoV-2病毒RNA检测的量值溯源.目标基因范围涵盖已公布的SARS-CoV-2病毒检测的3个主要靶标基因:核壳蛋白N基因全长(基因组坐标:28274-29533, GenBank:MT027064.1)、包膜蛋白E基因全长(基因组坐标:26245-26472, GenBank:MT027064.1)、开放阅读框1ab(ORF1ab)基因片段(基因组坐标:13321-15540, GenBank:MT027064.1).通过采用数字聚合酶链式反应(digital PCR, dPCR)方法进行多实验室联合定值,确定了该标准物质的量值为N、E和ORF1ab基因的拷贝数浓度.研究结果表明,该RNA标准物质量值可靠,均匀性良好,稳定性可满足运输要求.进一步地,通过在临床检验、多家不同原理的病毒检测试剂盒生产企业、方法开发实验室等试用,验证了RNA标准物质的普适性.这一RNA标准物质的研制为新型冠状病毒检测试剂盒的质量控制提供了计量学依据,为防控流行性疾病提供了便利. 展开更多
关键词 新型冠状病毒 体外转录rna 标准物质 数字PCR 实时荧光反转录PCR
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新型冠状病毒标准物质研究进展 被引量:5
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作者 高颖 杨怡 +3 位作者 欧阳艳艳 米薇 董莲华 戴新华 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2021年第5期590-595,共6页
新型冠状病毒(简称新冠病毒,2019n-CoV)标准物质是具有确定的新冠病毒序列和量值信息的一类足够均匀稳定的物质。国内外新冠病毒相关标准物质主要包括体外转录和基因组RNA标准物质、假病毒和灭活病毒标准物质,以及蛋白质类标准物质。它... 新型冠状病毒(简称新冠病毒,2019n-CoV)标准物质是具有确定的新冠病毒序列和量值信息的一类足够均匀稳定的物质。国内外新冠病毒相关标准物质主要包括体外转录和基因组RNA标准物质、假病毒和灭活病毒标准物质,以及蛋白质类标准物质。它相当于一把"标尺",可用于新冠病毒检测试剂盒的量值溯源和方法验证、试剂盒性能评价和实验室能力验证,还可作为质控物质保证检测结果的准确性。此外,在确保全球新冠病毒测量的国际等效和国际互认中,新冠病毒标准物质也发挥了重要作用。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 标准物质 体外转录rna 灭活病毒 假病毒 单克隆抗体 核酸检测 免疫检测
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无需逆转录的高通量多重呼吸道病毒RNA检测技术的建立 被引量:2
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作者 杨丹丽 田晓怡 +1 位作者 石伟先 郑直 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期24-28,共5页
目的建立一种无需逆转录等复杂样品前处理步骤,只需简单样品裂解便可同时检测多种呼吸道病毒RNA的高通量核酸检测系统,为大规模流行病学监测提供新的技术手段。方法直接以裂解液中病毒RNA作为检测靶标,利用夹层杂交信号放大技术,结合以L... 目的建立一种无需逆转录等复杂样品前处理步骤,只需简单样品裂解便可同时检测多种呼吸道病毒RNA的高通量核酸检测系统,为大规模流行病学监测提供新的技术手段。方法直接以裂解液中病毒RNA作为检测靶标,利用夹层杂交信号放大技术,结合以Luminex微球为基础的多指标同步分析(xMAP)多重检测平台,对一个样品同时检测A和B型流感病毒、A和B型呼吸道合胞病毒、1、2和3型副流感病毒,及偏肺病毒等8种病毒的靶标RNA,可一次实验并行检测96个样品。对该高通量检测系统进行了特异性、灵敏度评价。结果该检测方法可以特异性区分8种病毒的RNA靶标分子,检测下限均低于或等于4695个RNA拷贝。结论初步建立了可靠、灵敏、操作简便、高通量的多种呼吸道病毒RNA并行检测方法,为进一步实现在临床呼吸道样品中高通量检测呼吸道病毒提供了技术基础。 展开更多
关键词 呼吸道病毒 体外转录rna 多指标同步分析技术 信号放大
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