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土壤原位酶谱技术研究进展 被引量：7
1
作者 刘玉槐 魏晓梦 +3 位作者 祝贞科 葛体达 鲁顺保 吴金水 《土壤通报》 CAS 北大核心 2017年第5期1268-1274,共7页
陆地生态系统中,土壤酶活性是衡量土壤肥力生物功能的重要指标。然而,当前通用的土壤酶学技术存在诸多缺陷,导致测定结果不能准确反映土壤酶活性与分布在环境中的真实情况,限制了土壤酶学的发展和土壤生物过程的研究。原位酶谱技术是以... 陆地生态系统中,土壤酶活性是衡量土壤肥力生物功能的重要指标。然而,当前通用的土壤酶学技术存在诸多缺陷,导致测定结果不能准确反映土壤酶活性与分布在环境中的真实情况,限制了土壤酶学的发展和土壤生物过程的研究。原位酶谱技术是以荧光底物为基础的新兴酶学技术,该技术不需破坏性取样,操作简单,准确度高,能在nm到μm的尺度上反应土壤酶活性的空间联系变化,很大程度上克服了传统土壤酶学技术的不足,近年来在土壤酶学研究中越来越受重视。本文概述了原位酶谱技术的发展过程及其原理与操作,首次综述了原位酶谱技术在土壤元素循环中的应用和成果,并展望了该技术的优化方向,以及与其他分析化学、酶学、分子生物学技术耦合应用在土壤生物过程研究中的价值,以期推动该技术的成熟与推广。 展开更多
关键词 土壤酶 原位酶谱技术 元素循环 根际 土壤热区
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原位酶谱技术在土壤酶学中应用的研究进展与展望 被引量：6
2
作者 蒋萍萍 刘杰 +2 位作者 游少鸿 林华 俞果 《土壤通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期454-461,共8页
土壤酶在土壤生态系统的物质循环和能量流动方面具有重要的作用,对其活性的检测是土壤酶学发展的基础。传统的土壤酶活检测手段可以反映土壤酶的活性,但是不能原位反映土壤酶在土壤中的真实情况以及区分酶活在时间、空间上的连续变化情... 土壤酶在土壤生态系统的物质循环和能量流动方面具有重要的作用,对其活性的检测是土壤酶学发展的基础。传统的土壤酶活检测手段可以反映土壤酶的活性,但是不能原位反映土壤酶在土壤中的真实情况以及区分酶活在时间、空间上的连续变化情况。原位酶谱技术以荧光底物为基础,能原位获取土壤酶活性分布的二维图像,从微观尺度反映其在空间上的连续变化,区分土壤酶活性的热区和非热区,具有准确度高、空间分辨率高和时间分辨率高等优点。本文综述了原位酶谱技术的工作原理、技术优势以及国内外学者应用该技术开展的相关研究,并展望了原位酶谱与其他技术结合的发展方向,以期推动该技术在国内的发展和应用、为土壤酶学的进一步研究提供支持。 展开更多
关键词 原位酶谱 酶活性 土壤 空间分布 土壤酶学
原文传递
原位酶谱技术在土壤酶活性研究中的应用进展 被引量：3
3
作者 郭澍 许佳扬 +4 位作者 魏晓梦 张煦博 杜剑卿 吴伊波 崔骁勇 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期862-871,共10页
原位酶谱可方便、直观地展示土壤中酶活性的二维空间变异,近些年来通过与其他成像技术和分析方法相结合,土壤原位酶谱已发展成为分析土壤微观生态过程及土壤-根系-土壤动物相互作用界面过程的有效方法。然而,土壤原位酶谱技术尚未成熟,... 原位酶谱可方便、直观地展示土壤中酶活性的二维空间变异,近些年来通过与其他成像技术和分析方法相结合,土壤原位酶谱已发展成为分析土壤微观生态过程及土壤-根系-土壤动物相互作用界面过程的有效方法。然而,土壤原位酶谱技术尚未成熟,亟待深入分析其技术不足、完善技术方法,梳理其在不同领域中的应用现状,拓展并深化其在更多领域研究中的应用前景。基于此,综述并分析了该技术在土壤酶相关研究领域的应用现状,结合原位酶谱技术在底物载体选择与酶活定量方法的优化历程,分析了其存在的问题,发现:(1)可供研究的酶种类较少;(2)结果准确性仍有质疑;(3)在除根际研究外其他领域的研究较少、缺乏系统性,难以直接借鉴。这三者仍是阻碍原位酶谱技术在多领域中推广的最大障碍。综上所述,土壤原位酶谱技术虽仍存在缺陷,但其具有操作简便、测量结果的时空分辨率高等优势,在未来土壤酶学领域研究中仍潜力巨大,研究旨在为推进原位酶谱技术在土壤学和生态学等学科研究中的应用和发展提供理论指导。 展开更多
关键词 土壤酶活性 原位酶谱技术 根际 胁迫
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大豆苗期根系根际酶谱原位分析 被引量：2
4
作者 姜振峰 李珊珊 +3 位作者 温明星 孙亚男 赵宛瀛 刘志华 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1-9,共9页
利用室内根盒培养建立的原位根际酶活检测方法,分析生长习性不同的Charleston(有限生长习性)、东农594(亚有限生长习性)和DN50(亚有限生长习性)3个大豆品种在正常土壤(有机质含量高)和退化土壤(有机质含量低)条件下根系表型特征,分析大... 利用室内根盒培养建立的原位根际酶活检测方法,分析生长习性不同的Charleston(有限生长习性)、东农594(亚有限生长习性)和DN50(亚有限生长习性)3个大豆品种在正常土壤(有机质含量高)和退化土壤(有机质含量低)条件下根系表型特征,分析大豆根系碳代谢途径关键酶(β-葡萄糖苷酶)活性变化,明确不同类型土壤影响大豆根系生长发育的规律。结果表明,不同生长习性大豆品种对土壤适应性存在基因型差异,根系表型和土壤环境关系密切。大豆根际β-葡萄糖苷酶活性较土壤中β-葡萄糖苷酶活性高。活性表现为沿根系基部逐渐增加,到根尖活性最大的分布规律,在根尖形成酶活性热点。沿根系生长方向的β-葡萄糖苷酶扩散宽度与酶活性强度在不同类型土壤中分布规律一致,均为由基部到根尖逐渐增加。研究结果明确大豆根际碳代谢关键酶活性变化特点,可为大豆生长发育及高产新品种选育提供根系角度理论支持。 展开更多
关键词 大豆 根系 根际酶活性 原位酶谱
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基质金属蛋白酶在大鼠视神经挤压伤后的原位酶谱表达
5
作者 单丽 张水华 马志中 《眼科新进展》 CAS 2008年第2期103-105,共3页
目的观察大鼠视神经(optical nerves,ON)挤压伤后基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2和-9在轴突损伤中的表达及与ON损伤处瘢痕成分的关系。方法建立大鼠ON挤压伤模型,利用原位酶谱和免疫组织化学的方法检测ON组织内MMP-2、... 目的观察大鼠视神经(optical nerves,ON)挤压伤后基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2和-9在轴突损伤中的表达及与ON损伤处瘢痕成分的关系。方法建立大鼠ON挤压伤模型,利用原位酶谱和免疫组织化学的方法检测ON组织内MMP-2、MMP-9、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和硫酸软骨素蛋白聚糖(chondroitin sulphate peoteoglycan,CSPG)在损伤后时间和空间位置的表达。结果正常大鼠ON中有MMP-2的弱阳性表达,ON挤压伤后MMP-2和MMP-9均为强阳性表达,早期在损伤区边缘表达稍高,至损伤后28d时,在损伤区和周围的表达趋于一致。正常大鼠ON有GFAP和CSPG的弱阳性表达。ON挤压伤后CSPG在损伤区中心呈强阳性表达,GFAP在损伤区边缘表达较高,而在损伤区中心缺乏。结论ON挤压伤后胶质细胞增生瘢痕形成,GFAP、CSPG、MMP-2和MMP-9均参与ON的损伤修复过程。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶 原位酶谱 视神经损伤 免疫组织化学
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升主动脉瘤明胶酶活性变化的实验研究 被引量：1
6
作者 李想 柏树令 +2 位作者 范军 王军 佟浩 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期941-943,共3页
目的探讨明胶酶在升主动脉瘤形成过程中的活性变化及意义。方法将35只Wistar大鼠随机分为对照组和实验组。采用升主动脉缩窄鼠制备升主动脉瘤模型。于术后3～5个月取升主动脉,应用明胶酶谱分析及薄膜原位酶谱法检测动脉瘤明胶酶的活性... 目的探讨明胶酶在升主动脉瘤形成过程中的活性变化及意义。方法将35只Wistar大鼠随机分为对照组和实验组。采用升主动脉缩窄鼠制备升主动脉瘤模型。于术后3～5个月取升主动脉,应用明胶酶谱分析及薄膜原位酶谱法检测动脉瘤明胶酶的活性改变。结果正常动脉壁外膜无或极少有明胶酶活性;动脉瘤壁的中膜与外膜明胶酶活性明显增强。结论明胶酶活性升高可能在升主动脉瘤形成过程中起重要作用。 展开更多
关键词 升主动脉瘤 明胶酶谱分析 薄膜原位酶谱法 大鼠
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荧光原位明胶酶谱法对肝组织明胶酶活性的检测 被引量：2
7
作者 陈倩 沈丽 +2 位作者 何琦麟 陶艳艳 刘成海 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第15期1607-1611,共5页
目的:建立荧光原位明胶酶谱法,观察纤维化和急性损伤肝组织明胶酶活性表达特点.方法:复制二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化模型与N-乙酰半乳糖胺/脂多糖急性肝损伤模型,取其肝组织冰冻切片,将绿色荧光明胶底物附着于肝组织冰冻切片上,置于酶反... 目的:建立荧光原位明胶酶谱法,观察纤维化和急性损伤肝组织明胶酶活性表达特点.方法:复制二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化模型与N-乙酰半乳糖胺/脂多糖急性肝损伤模型,取其肝组织冰冻切片,将绿色荧光明胶底物附着于肝组织冰冻切片上,置于酶反应缓冲液中避光孵育8-24h;再以Hoechst液复染细胞核,在荧光显微镜下分别以蓝光激发拍摄明胶酶绿色荧光和紫光激发拍摄细胞核蓝色荧光,并将图像重叠.结果:成功建立荧光原位明胶酶谱法.正常大鼠肝组织仅在肝窦周围少量明胶酶表达,纤维化及急性肝损伤肝组织肝窦处明胶酶活性增强,纤维化肝组织纤维间隔处明胶酶活性也较强.结论:荧光原位明胶酶谱法具有灵敏,直观,简便的优点,可较好分析肝组织明胶酶活性水平与表达位置,对研究肝脏病理与药理具有重要意义. 展开更多
关键词 明胶酶活性 荧光原位明胶酶谱法 肝脏
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