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免疫磁珠富集技术联合选择性培养基快速检测单增李斯特菌 被引量：24
1
作者 闻一鸣 李志清 +1 位作者 童吉宇 向军俭 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期672-680,共9页
单增李斯特菌是一种危害极大的食源性致病菌，建立快速及特异的检测方法对于食品安全监控尤为重要。丈中联合免疫磁珠与选择性培养基对不同浓度（10^1～10^5CFU／mL）单增李斯特菌进行检测，并对3种李斯特菌、金黄色葡萄球菌及副溶血弧... 单增李斯特菌是一种危害极大的食源性致病菌，建立快速及特异的检测方法对于食品安全监控尤为重要。丈中联合免疫磁珠与选择性培养基对不同浓度（10^1～10^5CFU／mL）单增李斯特菌进行检测，并对3种李斯特菌、金黄色葡萄球菌及副溶血弧菌进行交叉试验；同时模拟食物污染，探索免疫磁珠．平板法检测样品的检测限以及该方法的最快检测时间。结果显示特异性免疫磁珠联合选择性平板法可检出浓度为10^3 CFU／mL及以上的单增李斯特菌；牛奶样品仅需6h增菌能被检出，检测限为0．7CFU／mL。联合使用免疫磁珠富集技术与选择性培养基，能在30h内完成对牛奶样品的检测，较国标法减少38h以上，且具有同等的灵敏度。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 免疫磁珠 选择性培养基 检测限
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免疫磁珠分离技术在食源性致病菌检测中的应用 被引量：18
2
作者 林吉恒 黄朱梁 +1 位作者 彭志兰 孙瑛 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第18期5998-6005,共8页
免疫磁珠(immunomagnetic beads,IMB)是一种均匀、具有超顺磁性及保护性壳的球形小粒子,由载体微球和免疫配基结合而成。免疫磁珠分离技术(immunomagnetic beads separation techniques,IMBS)则是利用免疫磁珠上包被的特异性抗体与抗原... 免疫磁珠(immunomagnetic beads,IMB)是一种均匀、具有超顺磁性及保护性壳的球形小粒子,由载体微球和免疫配基结合而成。免疫磁珠分离技术(immunomagnetic beads separation techniques,IMBS)则是利用免疫磁珠上包被的特异性抗体与抗原发生亲和反应,从复杂的样品中分离到目标抗原。再利用磁珠的磁响应性,实现对目标抗原的富集。在食源性致病菌检测方面,该技术通过与其他检测手段相结合而得到广泛应用,具有灵敏度高、检测时间短、操作简单等优势。本文综述了免疫磁珠的结构特点、免疫磁珠分离技术的原理,着重阐述了该技术在食源性致病菌检测方面的应用进展,以期为免疫磁珠分离技术的广泛应用提供参考。 展开更多
关键词 免疫磁珠 免疫磁珠分离技术 食源性致病菌
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免疫磁珠富集结合酶联免疫吸附法检测酱油中黄曲霉毒素B_1 被引量：20
3
作者 谢芳 赖卫华 +3 位作者 史爱武 邓省亮 熊勇华 余扬帆 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第18期165-169,共5页
将活泼酯法活化后的羧基化超顺磁珠与辛酸一硫酸铵法纯化的抗黄曲霉毒素B，单克隆抗体偶联，获得黄曲霉毒素B，（AFB。）免疫磁珠。比较不同粒径大小的免疫磁珠的富集效率，优化磁珠偶联抗体的条件以及富集AFB。的反应条件，初步建立了... 将活泼酯法活化后的羧基化超顺磁珠与辛酸一硫酸铵法纯化的抗黄曲霉毒素B，单克隆抗体偶联，获得黄曲霉毒素B，（AFB。）免疫磁珠。比较不同粒径大小的免疫磁珠的富集效率，优化磁珠偶联抗体的条件以及富集AFB。的反应条件，初步建立了以免疫磁珠富集结合酶联免疫吸附法检测酱油基质中的AFB，的方法。结果表明：酶联免疫吸附法在0．05～0．3gg／kg范围内具有良好的线性关系，相关系数为0．9842。在酱油中添加加1-7μg／kgAFB，的平均加标回收率为83．6％～104％，相对标准偏差为7．2％～13．7％。该方法具有快速简便、设备简单、灵敏度高、准确性好等优点，可很好地应用于酱油中的AFB，的快速检测。 展开更多
关键词 免疫磁珠 酱油 黄曲霉毒素B1 酶联免疫吸附法
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小鼠肺纤维化模型中基质金属蛋白酶-9及其抑制剂表达水平的变化 被引量：16
4
作者 李圣青 张艰 +2 位作者 黎志东 李焕章 戚好文 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期723-726,共4页
目的 :研究小鼠博来霉素在肺纤维化模型中肺泡巨噬细胞(AM)分泌的基质金属蛋白酶 9(MMP 9)和基质金属蛋白酶抑制剂 1(TIMP 1)的表达随着时间的变化 ,观察肺纤维化中MMP 9和TIMP 1的表达是否存在失衡。方法 :以博来霉素诱导建立小鼠肺... 目的 :研究小鼠博来霉素在肺纤维化模型中肺泡巨噬细胞(AM)分泌的基质金属蛋白酶 9(MMP 9)和基质金属蛋白酶抑制剂 1(TIMP 1)的表达随着时间的变化 ,观察肺纤维化中MMP 9和TIMP 1的表达是否存在失衡。方法 :以博来霉素诱导建立小鼠肺纤维化模型 ,采用HE染色观察肺部胶原沉积状况。选用抗CD6 8mAb ,采用微小免疫磁珠法分离纯化肺泡灌洗液中的AM ,用Hoechst 332 5 8染色AM ,在下光镜高倍视野计数法评估AM的纯度和活性 ,用EIA法检测AM上清液中MMP 9和TIMP 1的表达。结果 :肺组织切片HE染色显示小鼠肺部胶原沉积在 1、3、7、14、2 8d呈逐渐加重趋势。粗分离的AM纯度为 (82 .5± 2 .5 ) %。采用微小免疫磁珠法分离肺泡灌洗液中的AM纯度可达到 (99.3± 0 .7) % (P <0 .0 5 )。纯化后的细胞存活率为 (92 .5± 1.8) % ,与纯化前的 (92 .7± 2 .0 ) % ,相差不大 (P >0 .0 5 )。随着小鼠肺间质纤维化的进展 ,MMP 9的分泌量逐渐减少 ,而TIMP 1的表达量逐渐增加。结论 :在小鼠肺纤维化中AM分泌的MMP 9和TIMP 1之间存在失衡 。 展开更多
关键词 肺间质纤维化 肺泡巨噬细胞 免疫磁珠 MMP-9 TIMP-1
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5种结核杆菌检测方法的临床应用价值 被引量：18
5
作者 王震 龚玉华 +6 位作者 钱彩娣 孙春红 王雪梅 施瑜 周丽萍 傅行礼 邵启祥 《检验医学与临床》 CAS 2015年第3期334-336,共3页
目的比较和分析免疫磁珠捕获联合双内标聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验定量检测结核杆菌技术(IMC-PCR-ELISA)与其他几种结核杆菌检测法在结核病诊断中的临床应用价值。方法以102例结核分枝杆菌痰培养阳性的患者作为阳性对照,以48例结核... 目的比较和分析免疫磁珠捕获联合双内标聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验定量检测结核杆菌技术(IMC-PCR-ELISA)与其他几种结核杆菌检测法在结核病诊断中的临床应用价值。方法以102例结核分枝杆菌痰培养阳性的患者作为阳性对照,以48例结核分枝杆菌培养阴性的非结核普通住院患者作为阴性对照。比较抗酸染色涂片法(AFS)、免疫磁珠-抗酸染色涂片法(IMC-AFS)、金标抗结核抗体检测法(DICA)、普通PCR及IMCPCR-ELISA的敏感性及特异性。结果 IMC-PCR-ELISA定量检测结核分枝杆菌全过程约4.5h,最低检测限为5copy/μL,本法的特异性和敏感性均为100.00%,其他4种(AFS、IMC-AFS、DICA、普通PCR)检测方法的敏感性分别为35.29%、43.14%、60.78%、93.14%,特异性分别为95.83%、95.83%、75.00%、91.67%。结论 IMC-PCRELISA与AFS、IMC-AFS、DICA及普通PCR相比,具有快速、灵敏、特异、可定量的特点,是临床快速诊断结核病的有效检测方法。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 免疫磁珠 聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验 检测方法
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荧光免疫层析法结合免疫磁珠分离技术快速检测单增李斯特菌 被引量：18
6
作者 张赛 何小维 +2 位作者 刘晓云 彭运平 李文美 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2014年第11期229-234,共6页
为建立单增李斯特菌简单快速、灵敏度高和特异性强的检测方法,本研究以抗单增李斯特菌单克隆抗体偶联磁珠制备免疫磁珠;以羧基荧光微球标记的抗单增李斯特菌多克隆抗体及鼠IgG为标记抗体,抗单增李斯特菌多克隆抗体和羊抗鼠二抗分别作为... 为建立单增李斯特菌简单快速、灵敏度高和特异性强的检测方法,本研究以抗单增李斯特菌单克隆抗体偶联磁珠制备免疫磁珠;以羧基荧光微球标记的抗单增李斯特菌多克隆抗体及鼠IgG为标记抗体,抗单增李斯特菌多克隆抗体和羊抗鼠二抗分别作为检测线和质控线制备荧光免疫层析试纸条。将免疫磁珠分离与荧光免疫层析法相结合应用于单增李斯特菌的现场快速检测中。结果表明:荧光免疫层析试纸条对纯培养单增李斯特菌的检测限为4×105CFU/mL,联合检测方法10倍、100倍浓缩时,检测限分别为4×104CFU/mL和1×104CFU/mL。联合检测体系特异性较好,与实验室保存的10株细菌无交叉反应。人工污染样本检测限为1×104CFU/mL,同纯培养物相比检测灵敏度并没有降低。本方法的建立对于食品中单增李斯特菌的现场快速检测具有重要意义。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 抗体 免疫磁珠 荧光免疫层析 快速检测
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一种快速检测阪崎肠杆菌的新方法——免疫磁性分离荧光标记 被引量：16
7
作者 支援 孟瑾 +4 位作者 郑小平 韩奕奕 李敏 顾鸣 沈鹤柏 《乳业科学与技术》 2010年第5期231-233,245,共4页
阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种,是人和动物肠道内寄生的一种革兰氏阴性无芽胞杆菌。我国于2005年8月批准了阪崎肠杆菌检测的行业标准,此标准改进了美国FDA的推荐方法。本文论述了一种基于免疫磁珠磁性分离、免疫量子点荧光标记联合应用的... 阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种,是人和动物肠道内寄生的一种革兰氏阴性无芽胞杆菌。我国于2005年8月批准了阪崎肠杆菌检测的行业标准,此标准改进了美国FDA的推荐方法。本文论述了一种基于免疫磁珠磁性分离、免疫量子点荧光标记联合应用的检测方法,本方法可灵敏、快速、高特异性的检出乳制品中的阪崎肠杆菌。 展开更多
关键词 免疫磁珠 量子点 阪崎肠杆菌 快速检测
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单增李斯特菌免疫磁珠的制备研究 被引量：15
8
作者 徐金亭 李志清 +2 位作者 向军俭 唐勇 杨红宇 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期323-327,共5页
目的:制备可高效、特异地分离单增李斯特菌的免疫磁珠。探讨羧基修饰磁珠与多克隆抗体的不同偶联条件和免疫磁珠捕获单增李斯特菌的能力。方法:以单增李斯特菌作为抗原,免疫新西兰兔,获得兔源多克隆抗体,鉴定其与单增李斯特菌体的结合能... 目的:制备可高效、特异地分离单增李斯特菌的免疫磁珠。探讨羧基修饰磁珠与多克隆抗体的不同偶联条件和免疫磁珠捕获单增李斯特菌的能力。方法:以单增李斯特菌作为抗原,免疫新西兰兔,获得兔源多克隆抗体,鉴定其与单增李斯特菌体的结合能力;选择6种不同的偶联缓冲溶液,设置了6个主要偶联时间和6组偶联温度,通过比较磁珠与抗体偶联后上清中剩余的抗体量来确定最佳偶联条件。结果:制备的多克隆抗体效价为1.3×105,该抗体与单增李斯特菌体有较好的结合,抗体与1mg羧基修饰磁珠在pH6.0的0.01mol/L一水吗啉乙磺酸缓冲溶液(MES)中,37℃偶联2h,偶联抗体的量为160μg;制得的免疫磁珠的捕获率可达77.0%。结论:获得羧基磁珠与抗体偶联的最佳条件,该免疫磁珠用于食品中单增李斯特菌的检测,与常规的平皿增菌培养显色法比较,检测时间至少缩短20h。 展开更多
关键词 免疫磁珠 单增李斯特菌 偶联
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基于免疫磁珠的胶体金免疫层析法快速检测水产品中地西泮残留 被引量：15
9
作者 桑丽雅 陈笑笑 +4 位作者 王扬 陈青舟 周钦 李诗言 叶茂 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第20期255-260,284,共7页
本研究针对水产品中地西泮残留的问题,建立了一种快速、灵敏的免疫磁珠-胶体金免疫层析法。采用链霉亲和素磁珠与生物素化地西泮单克隆抗体偶联制备的免疫磁珠,快速富集、分离水产品中地西泮残留,并结合胶体金免疫层析法进行半定量检测... 本研究针对水产品中地西泮残留的问题,建立了一种快速、灵敏的免疫磁珠-胶体金免疫层析法。采用链霉亲和素磁珠与生物素化地西泮单克隆抗体偶联制备的免疫磁珠,快速富集、分离水产品中地西泮残留,并结合胶体金免疫层析法进行半定量检测。结果表明,经过优化后试剂卡最佳工艺为金标抗体标记量25μg/mL、T线抗原包被量0.6 mg/mL、C线羊抗鼠二抗包被量1.5 mg/mL、金标喷量3.0μL/cm,地西泮加标浓度为1.0、5.0、10.0和15.0μg/kg时回收率为78.34%~90.40%,相对标准偏差(RSD)为5.03%~8.96%。本方法特异性强、稳定性好,可在25 min内完成单个样本检测,对水产品中地西泮残留检出限为0.5μg/kg,优于常规前处理法。经验证,对40份水产品样本检测结果与GC-MS法结果一致,证明免疫磁珠-胶体金免疫层析法可作为水产品中地西泮残留快速检测的有效手段。 展开更多
关键词 地西泮 免疫磁珠 胶体金免疫层析 水产品
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基于化学发光磁酶免疫分析技术检测单增李斯特菌 被引量：15
10
作者 范龙兴 宁保安 +7 位作者 孙智勇 白家磊 彭媛 曲晓辰 刘超 乌恩琦 高志贤 刘颖 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2017年第3期124-129,共6页
探索化学发光磁酶免疫分析技术在单核细胞增生性李斯特菌检测中的应用,并初步建立和优化检测方法及条件。将抗LM兔多抗与磁性微球偶联构建免疫磁分离原件,应用双抗夹心法ELISA检测LM全菌抗原,应用化学发光法进行定量检测,应用正交设计... 探索化学发光磁酶免疫分析技术在单核细胞增生性李斯特菌检测中的应用,并初步建立和优化检测方法及条件。将抗LM兔多抗与磁性微球偶联构建免疫磁分离原件,应用双抗夹心法ELISA检测LM全菌抗原,应用化学发光法进行定量检测,应用正交设计优化主要反应条件,建立标准曲线,测试灵敏性与特异性。通过正交试验优化的反应条件为37℃条件下,免疫磁珠用量20μL、含0.1%BSA的PBS封闭15 min,捕获抗原2 h,HRP标记的抗LM单抗稀释至1∶10 000(体积比)特异性结合反应30 min后进行化学发光检测,标准曲线拟合优度0.954,最低检出限10~4 CFU/m L,特异性良好,检测时限为3 h^4 h。 展开更多
关键词 化学发光 免疫磁珠 单增李斯特菌
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人循环内皮细胞的分离和鉴定 被引量：12
11
作者 李宏伟 王春玲 修瑞娟 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2006年第6期640-643,共4页
目的建立从外周血中获取循环内皮细胞（CECs）的免疫磁珠分离技术。方法 取1 mL全血按1： 2稀释；加入20 μL抗CD146磁珠抗体；4℃孵育；再加入等体积缓冲液；置于磁架上；吸弃液体；用100 μL缓冲液重悬磁珠。用吖啶橙或Giemsa染色在... 目的建立从外周血中获取循环内皮细胞（CECs）的免疫磁珠分离技术。方法 取1 mL全血按1： 2稀释；加入20 μL抗CD146磁珠抗体；4℃孵育；再加入等体积缓冲液；置于磁架上；吸弃液体；用100 μL缓冲液重悬磁珠。用吖啶橙或Giemsa染色在荧光倒置相差显微镜下计数与磁珠结合的细胞；并用抗-vWF及CD31进行免疫细胞化学鉴定。结果 经抗-vWF及CD31鉴定所分选的CECs是内皮细胞。正常健康体检者的CECs数量为10.5（6～16.5）个/mL。使用此法对正常人脐静脉内皮细胞（HUVECs）混合于正常人全血中的最高回收率为91%。结论 用CD146免疫磁珠技术分离CECs；具有客观、准确、省时、特异性强及回收率高、取血量少和对内皮细胞损伤小的特点；本方法可用于不同疾病患者血液中CECs的定量检测及其功能状态分析。 展开更多
关键词 循环内皮细胞 免疫磁珠 CD146
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3种食源性细菌免疫磁珠联合ATP发光检测技术研究 被引量：13
12
作者 寇晓晶 高峰 谢春 《中国动物检疫》 CAS 2019年第1期85-91,共7页
沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌和金黄色葡萄球菌是食品中常见的致病菌,在国内外常引起食源性疾病。为解决食源性疾病中的微生物检测问题,本研究将免疫磁珠技术和ATP发光技术联合用于食品微生物检测,选择沙门氏菌、单核细胞增生李斯特... 沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌和金黄色葡萄球菌是食品中常见的致病菌,在国内外常引起食源性疾病。为解决食源性疾病中的微生物检测问题,本研究将免疫磁珠技术和ATP发光技术联合用于食品微生物检测,选择沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌病和金黄色葡萄球菌为检测对象,建立快速检测这3种常见食源性病原菌的富集及检测新方法。该方法在显著缩短预增菌时间的条件下,通过免疫磁珠的富集作用获得与常规增菌时间同样的效果,样品中的微生物浓度增加了10倍,大大提高了样本检出率,缩短了检测周期。结果表明,本研究建立的免疫磁珠富集后联合ATP发光技术具有快速、敏感、特异和低廉的优点,可用于检测食品中沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌以及金黄色葡萄球菌,具有较好的推广应用前景。 展开更多
关键词 食源性疾病 免疫磁珠 微生物检测 食品安全 沙门氏菌 单核细胞增生李斯特菌 金黄色葡萄球菌
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免疫磁珠高通量自动净化-超高效液相色谱法测定粮食中玉米赤霉烯酮 被引量：13
13
作者 陈金男 叶金 +4 位作者 郭旭光 李丽 刘洪美 吴宇 王松雪 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第22期318-323,共6页
基于免疫磁珠高通量自动净化的前处理方法,使用超高效液相色谱仪对粮食中玉米赤霉烯酮的含量进行测定。首先将免疫磁珠与玉米赤霉烯酮的反应时间、样品提取液和不同粮食基质的净化效果进行优化。经方法验证,超高效液相色谱的检出限和定... 基于免疫磁珠高通量自动净化的前处理方法,使用超高效液相色谱仪对粮食中玉米赤霉烯酮的含量进行测定。首先将免疫磁珠与玉米赤霉烯酮的反应时间、样品提取液和不同粮食基质的净化效果进行优化。经方法验证,超高效液相色谱的检出限和定量限分别为3.5μg/kg和12.0μg/kg。在优化条件下,全麦粉和玉米全粉阴性样品的3个添加水平的加标回收率在99.04%~109.26%之间,变异系数不大于6.88%。玉米全粉、全麦粉、糙米粉、小麦粉等粮食基质中玉米赤霉烯酮成分的国家有证标准物质或质控样品的测定结果在标准值及其扩展不确定度范围内,变异系数不大于3.54%,测定结果较为满意。采用Bland-Altman法对免疫磁珠净化法和免疫亲和柱净化法之间的差异进行分析,结果显示这2种净化方法的差异在可接受范围内,因此,这2种方法在净化和富集粮食中玉米赤霉烯酮时可互相代替使用。免疫磁珠净化方法配套使用的真菌毒素全自动净化仪可同时净化10~24个样品,平均每个样品的净化时间约为2~3 min,实现粮食中玉米赤霉烯酮的高通量自动净化。超高效液相色谱分析速度快、灵敏度高、准确性高,可用于检测粮食中玉米赤霉烯酮的含量。 展开更多
关键词 免疫磁珠 超高效液相色谱 粮食 玉米赤霉烯酮
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免疫磁珠体外纯化人胎脑中CD133阳性干细胞的实验研究 被引量：6
14
作者 余爽 张京钟 +2 位作者 张海燕 赵春礼 徐群渊 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期271-274,共4页
为了探讨免疫磁珠体外纯化人胎儿脑内 CD13 3阳性细胞的可行性 ,本研究取人胎儿脑室下区并制备单细胞悬液 ,采用磁珠分选法选择 CD13 3阳性细胞群 ,台盼蓝染色观察活力并采用流式细胞仪鉴定纯化前后 CD13 3的阳性表达率。结果显示 ,分... 为了探讨免疫磁珠体外纯化人胎儿脑内 CD13 3阳性细胞的可行性 ,本研究取人胎儿脑室下区并制备单细胞悬液 ,采用磁珠分选法选择 CD13 3阳性细胞群 ,台盼蓝染色观察活力并采用流式细胞仪鉴定纯化前后 CD13 3的阳性表达率。结果显示 ,分选后所得细胞纯度为 ( 85 .5 7± 1.66) % ,回收率为 ( 62 .3± 18) % ,纯化前后细胞活力无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。结论 :联合应用CD13 3表面标志及免疫磁珠分选系统可有效地从人胎儿脑组织中直接分离得到高纯度的 CD13 3阳性干细胞 。 展开更多
关键词 免疫磁珠 纯化 人胎儿 脑 CD133 阳性干细胞 细胞活力
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免疫磁珠亲和纯化-超高效液相色谱串联质谱法快速检测小麦中多种真菌毒素 被引量：12
15
作者 雷方 李承龙 +3 位作者 张新 周爽 王丹 吴永宁 《食品安全质量检测学报》 CAS 2016年第3期1252-1260,共9页
目的建立免疫磁珠亲和纯化-超高效液相色谱串联质谱法用于小麦中真菌毒素多组分检测。方法用NaIO_4将抗体Fc段的糖残基氧化生成醛基,与磁珠上的氨基共价偶联,实现抗体在磁珠上的定向固定化。以该方法同时偶联多种抗体,获得定向固定多种... 目的建立免疫磁珠亲和纯化-超高效液相色谱串联质谱法用于小麦中真菌毒素多组分检测。方法用NaIO_4将抗体Fc段的糖残基氧化生成醛基,与磁珠上的氨基共价偶联,实现抗体在磁珠上的定向固定化。以该方法同时偶联多种抗体,获得定向固定多种真菌毒素抗体的免疫磁珠。进而对其亲和性能及使用条件进行详细表征和优化,建立免疫磁珠亲和纯化—超高效液相色谱串联质谱检测方法,用于小麦中真菌毒素多组分同时检测。结果本研究制备的免疫磁珠对8种真菌毒素有较好的保留效果,建立的免疫磁珠亲和纯化-超高效液相色谱串联质谱方法能够同时测定小麦中8种真菌毒素,对于各毒素的检出限在0.1~2μg/kg之间,方法回收率为78%~113%。结论该方法灵敏度高、特异性强、操作简单、有机试剂使用较少,适用于小麦样品的检测。 展开更多
关键词 免疫磁珠 小麦 真菌毒素 超高效液相色谱-串联质谱法
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免疫磁珠技术检测胃癌患者腹腔微小转移的研究 被引量：11
16
作者 杨宁 王文秀 +2 位作者 赫文 信涛 徐玉清 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第6期486-488,共3页
目的研究免疫磁珠技术检测胃癌患者腹腔微小转移的方法及临床意义。方法收集30例胃癌患者术中的腹腔冲洗液,分别进行免疫磁珠技术及常规腹腔冲洗液细胞学检查,检测腹腔内脱落癌细胞。结果免疫磁珠的阳性检出率(63.3%)高于常规腹腔冲洗... 目的研究免疫磁珠技术检测胃癌患者腹腔微小转移的方法及临床意义。方法收集30例胃癌患者术中的腹腔冲洗液,分别进行免疫磁珠技术及常规腹腔冲洗液细胞学检查,检测腹腔内脱落癌细胞。结果免疫磁珠的阳性检出率(63.3%)高于常规腹腔冲洗液细胞学检查(40.0%)(P<0.05);免疫磁珠的阳性检出率与TNM分期密切相关(P<0.01)。结论免疫磁珠技术是一种有效检测肿瘤细胞的方法,可以从胃癌患者腹腔冲洗液中分离出癌细胞,监测微转移的存在,有助于临床对胃癌的诊断和治疗。 展开更多
关键词 免疫磁珠 胃癌 腹腔冲洗液 微转移
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免疫磁珠捕获-PCR检测牛乳中沙门氏菌的研究 被引量：12
17
作者 王晓闻 杨永莉 《山西农业大学学报（自然科学版）》 CAS 2009年第4期289-293,共5页
实验建立了沙门氏菌的磁捕获-PCR检测方法。筛选了最佳包被液和最适包被条件,用于制备包被有抗沙门氏菌抗体的磁珠。用制备的免疫磁珠捕获样品中的沙门氏菌,用于PCR检测。此方法操作简便,用时短,检出率高。用所建立的免疫磁珠捕获-PCR... 实验建立了沙门氏菌的磁捕获-PCR检测方法。筛选了最佳包被液和最适包被条件,用于制备包被有抗沙门氏菌抗体的磁珠。用制备的免疫磁珠捕获样品中的沙门氏菌,用于PCR检测。此方法操作简便,用时短,检出率高。用所建立的免疫磁珠捕获-PCR技术检测牛乳中的沙门氏菌,检测灵敏度为9cfu/mL,所用时间为7h(包括前增菌时间)。 展开更多
关键词 免疫磁珠 沙门氏菌 富集 PCR
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基于可重复利用免疫磁珠的抗体检测方法的建立 被引量：7
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作者 郭慧芳 张文红 +3 位作者 温冬青 韩锋产 张虎明 阎小君 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期577-579,583,共4页
目的基于可重复利用的免疫磁珠,建立一种简捷快速的特异性抗体检测方法。方法设计人类巨细胞病毒(humancytomegaloviruses,HCMV)PP150蛋白的抗原表位,并合成8分枝多聚抗原肽PP150-8MAPs。将PP150-8MAPs以共价结合形式包被于DynabeadsM-4... 目的基于可重复利用的免疫磁珠,建立一种简捷快速的特异性抗体检测方法。方法设计人类巨细胞病毒(humancytomegaloviruses,HCMV)PP150蛋白的抗原表位,并合成8分枝多聚抗原肽PP150-8MAPs。将PP150-8MAPs以共价结合形式包被于DynabeadsM-450Tosylactivated磁珠表面,制备特异性免疫磁珠。用PP150-8MAPs免疫Balb/c小鼠制备抗此抗原表位的标准抗血清。应用免疫磁珠检测标准抗血清中的抗体,优化检测条件。在抗体检测反应结束后,洗脱抗体-二抗复合物,再生后的免疫磁珠重复用于标准抗血清样品的检测分析,并分析免疫磁珠可重复利用的次数。结果制备免疫磁珠时,PP150-8MAPs的最佳包被量为100μg/mL,包被效率为79%。用PP150-8MAPs免疫小鼠后,得到的抗血清滴度可达到112800。用免疫磁珠法检测小鼠标准抗血清,免疫磁珠可重复进行20次以上的检测分析。结论基于酶联免疫检测方法,包被抗原的免疫磁珠可重复应用于血清样品中特异性抗体的检测分析。此实验为建立一种新的可重复检测的高效清样品中特异性抗体的检测分析。此实验为建立一种新的可重复检测的高效免疫磁珠抗体分析方法奠定了基础,在基础研究与临床检测中具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 抗原表位 多聚抗原肽 免疫磁珠
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原核表达MurA蛋白并制备其多克隆抗体用于免疫磁珠快速检测单增李斯特菌 被引量：10
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作者 童吉宇 李志清 +2 位作者 闻一鸣 李雨辰 向军俭 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1234-1242,共9页
【目的】制备MurA多抗,结合免疫磁珠与选择平板进行单增李斯特菌的快速检测,建立单增李斯特菌的免疫磁珠快速检测方法。【方法】构建MurA的原核表达载体,转化大肠杆菌进行优化表达。镍柱纯化表达产物,质谱鉴定重组蛋白,再免疫小鼠,制备... 【目的】制备MurA多抗,结合免疫磁珠与选择平板进行单增李斯特菌的快速检测,建立单增李斯特菌的免疫磁珠快速检测方法。【方法】构建MurA的原核表达载体,转化大肠杆菌进行优化表达。镍柱纯化表达产物,质谱鉴定重组蛋白,再免疫小鼠,制备其多克隆抗体。用所获多抗制备免疫磁珠,建立单增李斯特菌免疫磁珠-选择性培养基检测方法,并对人工污染牛奶样品进行检测。【结果】在大肠杆菌中高效表达了分子量约为72 kD的可溶性融合蛋白,质谱鉴定其为MurA蛋白;免疫小鼠获得的抗血清效价达1:10 000,与伤寒沙门氏菌、副溶血弧菌、大肠杆菌及属内其它病原菌均无交叉;所建立的免疫磁珠-选择性培养基检测法可检出浓度为103 CFU/mL及以上的单增李斯特菌,仅与英诺克李斯特菌存在一定交叉反应;牛奶样品单次仅需9 h增菌就能被检出,较常规增菌时间缩短39 h;检测限为0.4 CFU/mL。【结论】表达并纯化得到高纯度的单增李斯特菌MurA蛋白,制备的鼠源多克隆抗体亲和力高,特异性好;建立了快速检测单增李斯特菌的免疫磁珠联合选择性培养基法,在灵敏度不变的情况下,实现24 h内成功对牛奶样品的检测,较国标法减少42 h以上。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 MurA 多克隆抗体 免疫磁珠
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免疫磁珠体外提纯胚胎大鼠神经干细胞的实验研究 被引量：5
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作者 王彦惠 刘振华 +5 位作者 廖可立 姜晓丹 徐如祥 李留洋 彭杰 柳息洪 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期959-961,共3页
为建立免疫磁珠体外提纯胚胎神经干细胞 (NSC)的方法 ,制备胚胎SD大鼠的大脑皮质组织悬液 ,采用磁珠分选法选择Nestin阳性细胞群 ,台盼蓝染色观察活力 ,扫描电镜下行形态学观察 ,流式细胞仪检测荧光标记细胞的Nestin表达阳性率。结果发... 为建立免疫磁珠体外提纯胚胎神经干细胞 (NSC)的方法 ,制备胚胎SD大鼠的大脑皮质组织悬液 ,采用磁珠分选法选择Nestin阳性细胞群 ,台盼蓝染色观察活力 ,扫描电镜下行形态学观察 ,流式细胞仪检测荧光标记细胞的Nestin表达阳性率。结果发现 ,分选后所得细胞纯度达 (87 8± 2 4 ) % ,细胞活力 (94 8± 2 3) % ,流式细胞仪检测细胞Nestin阳性表达率为 (88 3± 1 0 4 ) % ,符合NSC的特点 ,扫描电镜观察可见细胞表面有数目不等的磁珠紧密结合。研究表明 ,磁性分选系统是一种有效的神经干细胞分离提纯方法 。 展开更多
关键词 神经干细胞 免疫磁珠 扫描电镜 流式细胞仪 神经巢蛋白 体外提纯
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