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Mago nashi:一个日本血吸虫性别决定基因的发现与鉴定 被引量:7
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作者 汪学龙 沈继龙 +1 位作者 沈际佳 蒋作君 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第1期34-36,40,共4页
目的 运用免疫学方法筛选日本血吸虫 (中国大陆株 )童虫cDNA文库 ,寻找血吸虫新基因 ,并克隆和鉴定一个日本血吸虫决定性别的Magonashi样蛋白基因。方法 用混合的血吸虫感染者血清免疫学筛选日本血吸虫童虫cDNA文库 ,随机挑取阳性重... 目的 运用免疫学方法筛选日本血吸虫 (中国大陆株 )童虫cDNA文库 ,寻找血吸虫新基因 ,并克隆和鉴定一个日本血吸虫决定性别的Magonashi样蛋白基因。方法 用混合的血吸虫感染者血清免疫学筛选日本血吸虫童虫cDNA文库 ,随机挑取阳性重组克隆进行测序 ,以获得血吸虫基因 ,并通过BLAST程序进行比较及同源性分析 ,根据分析结果设计合成引物 ,用PCR法扩增出日本血吸虫Magonashi样蛋白基因 (SiM)编码序列 ,将其克隆入pGEM T载体和 pBKCMV载体 ,用双酶切、以质粒为模板进行PCR扩增和测序进行鉴定。结果 本研究共挑取 7个阳性克隆 ,通过测序获得了 5个有表达序列标签(ExpressedSequenceTag .EST)价值的序列 ,并进行了同源性分析 ;用PCR法扩增出大小为 4 4 1bpSjM开放阅读框 ,重组质粒pGEM SjM和 pBKCMV SjM经双酶切均可获得一条为PCR产物一致的DNA片段。 结论 本实验获得了 5个有EST价值的序列 ,并成功地克隆了其中SjM编码基因。 展开更多
关键词 日本血吸虫 CDNA文库 免疫学筛选 Mago mshi样蛋白 基因克隆
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日本血吸虫尾蚴66~68kD单特异性血清对尾蚴cDNA文库的免疫学筛选 被引量:2
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作者 秦永华 周帅锋 +3 位作者 汪世平 高冬梅 余路新 李林 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1076-1081,共6页
目的:获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)尾蚴66~68 kD抗原的编码基因,为日本血吸虫疫苗和诊断研究提供材料。方法:以Sj尾蚴66~68 kD抗原免疫家兔获得的单特异性血清为探针,对Sj尾蚴cDNA文库进行免疫筛选,将所获阳性克隆的插... 目的:获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)尾蚴66~68 kD抗原的编码基因,为日本血吸虫疫苗和诊断研究提供材料。方法:以Sj尾蚴66~68 kD抗原免疫家兔获得的单特异性血清为探针,对Sj尾蚴cDNA文库进行免疫筛选,将所获阳性克隆的插入片断进行PCR扩增、琼脂糖电泳初步鉴定,并挑选出4个强阳性克隆进行测序,通过互联网NCBI/BLAST进行核苷酸序列分析。结果:共获得21个持续阳性克隆,其中10个阳性克隆初步鉴定显示为单一扩增条带,且插入的cDNA片段大小分布于0.5~3.0 kb之间;4个强阳性克隆分别与日本血吸虫SJCHGC05187,SJCHGC05173,SJCHGC06989,SJCHGC01894显著同源。结论:获得了4种日本血吸虫相关的编码基因。 展开更多
关键词 日本血吸虫 尾蚴 CDNA文库 免疫筛选 基因
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免疫PCR检测HIV-p24抗原的实验研究 被引量:1
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作者 郑姬 府伟灵 +1 位作者 蒋天伦 杨雅康 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期19-22,共4页
目的建立检测HIV-p24抗原的高灵敏度免疫PCR方法。方法以金磁微粒为免疫PCR载体、鼠抗HIV-p24单抗为捕获抗体、生物素化的羊抗p24多克隆抗体为检测抗体,通过链亲和素的桥联标记生物素化的多抗,被双抗体夹心捕获的人重组HIV-p24抗原通过... 目的建立检测HIV-p24抗原的高灵敏度免疫PCR方法。方法以金磁微粒为免疫PCR载体、鼠抗HIV-p24单抗为捕获抗体、生物素化的羊抗p24多克隆抗体为检测抗体,通过链亲和素的桥联标记生物素化的多抗,被双抗体夹心捕获的人重组HIV-p24抗原通过PCR扩增报告DNA的方式予以检测;用方阵滴定法确定最适链亲和素和标记DNA浓度,用Quantity One凝胶定量软件分析电泳图像。结果链亲和素浓度和用于标记的DNA的浓度分别控制在0.1mg/L和10ng/L;免疫PCR检测的灵敏度为0.1ng/L,比传统ELISA法检测的灵敏度高。结论高灵敏度的免疫PCR适用于早期筛检HIV-p24抗原。 展开更多
关键词 免疫PCR 灵敏度 HIV—p24抗原 艾滋病 献血者 早期筛检
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胶体染料试纸条法用于血吸虫病低度流行区化疗对象筛查的研究 被引量:15
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作者 宋鸿焘 梁幼生 +4 位作者 戴建荣 纪长生 神学慧 李龙根 殷芳 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2003年第2期102-104,共3页
目的 评价胶体染料试纸条法 (DDIA)在血吸虫病低度流行区用于筛查以确定化疗对象的应用价值。方法 在江滩型血吸虫病低度流行区 ,选择一自然人群共 4 6 3人 ,以粪便孵化法和 Ka-to- Katz法阳性为标准确诊病人 ,同时用 DDIA、双面胶纸... 目的 评价胶体染料试纸条法 (DDIA)在血吸虫病低度流行区用于筛查以确定化疗对象的应用价值。方法 在江滩型血吸虫病低度流行区 ,选择一自然人群共 4 6 3人 ,以粪便孵化法和 Ka-to- Katz法阳性为标准确诊病人 ,同时用 DDIA、双面胶纸条环卵沉淀试验 (DGS- COPT)和酶联免疫吸附试验 (EL ISA)对这一自然人群进行检测 ,并进行比较和评价。结果 筛查人群 4 6 3人 ,粪检阳性18例 ,患病率 3.9%。DDIA阳性 73人 ,阳性率为 15 .8% ,18例粪检阳性者中 17例阳性 ,阳性符合率为 94 .4 % ,Youden指数为 0 .81。 DGS- COPT阳性 4 1人 ,阳性率为 8.9% ,18例粪检阳性者中 13例阳性 ,阳性符合率为 72 .2 % ,Youden指数为 0 .6 6。EL ISA阳性 85人 ,阳性率为 18.4 % ,18例粪检阳性者中 15例阳性 ,阳性符合率为 83.3% ,Youden指数为 0 .6 8。结论 胶体染料试纸条法 (DDIA)是一种较适合在低度血吸虫病流行区进行筛查化疗对象的方法。 展开更多
关键词 胶体染料试纸条法 血吸虫病 低度流行区 筛查法
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血源肝炎病毒筛查试验结果的分析 被引量:13
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作者 王迅 贾尧 +1 位作者 伍晓菲 刘晓颖 《微生物与感染》 2008年第3期143-146,共4页
目的探讨血筛酶免疫试剂的质量以及2次化验试剂的合理搭配,最大限度地避免漏检和减少假阳性。方法对随机抽取的73份HBsAg和99份抗-HCV检测不合格的献血标本分别采用与常规筛查相同的2种进口试剂和另1种国产酶免试剂进行复检,并对复检中... 目的探讨血筛酶免疫试剂的质量以及2次化验试剂的合理搭配,最大限度地避免漏检和减少假阳性。方法对随机抽取的73份HBsAg和99份抗-HCV检测不合格的献血标本分别采用与常规筛查相同的2种进口试剂和另1种国产酶免试剂进行复检,并对复检中至少1种试剂为反应性的标本进行HBsAg中和试验或抗-HCV重组免疫印迹试验确证。结果73份HBsAg不合格标本中,20份确证阳性,11份可疑,42份阴性;99份抗-HCV不合格标本中,29份确证阳性,70份阴性。针对研究范围内特定的标本,进口试剂的漏检率可达13.79%~27.59%,且也存在不同程度的假阳性。2种进口试剂间检测结果互补,而国产试剂无法查出进口试剂的漏检。结论无论是进口还是国产血筛酶免试剂,都存在不同程度的漏检和假阳性情况,应选择2种检测结果互补的试剂对血液进行筛查,以保障血液安全。 展开更多
关键词 酶免疫检测 血液筛查 血站
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外周血SEPT9基因甲基化检测在老年结直肠癌筛查中的意义 被引量:7
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作者 康倩 李娜 +3 位作者 金鹏 杨浪 安贺娟 盛剑秋 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2019年第5期503-507,共5页
目的探讨外周血SEPT9基因甲基化检测在老年结直肠癌筛查中的意义。方法筛查对象为1 407例军队退休干部体检者。IFOBT、TF、SEPT9基因甲基化检测三者任一结果为阳性,通知受试者行结肠镜检查。分别计算IFOBT、TF、IFOBT+TF(双联)、SEPT9... 目的探讨外周血SEPT9基因甲基化检测在老年结直肠癌筛查中的意义。方法筛查对象为1 407例军队退休干部体检者。IFOBT、TF、SEPT9基因甲基化检测三者任一结果为阳性,通知受试者行结肠镜检查。分别计算IFOBT、TF、IFOBT+TF(双联)、SEPT9基因甲基化检测和三者联合检测在老年结直肠癌筛查的性能指标。结果 1 407例军队退休干部体检者中1 369例体检者均进行了TF、IFOBT和SEPT9基因甲基化检测,至少1项结果为阳性者有176例(12.9%),其中96例(54.5%)接受了结肠镜检查,共检出9例结直肠癌和15例进展性腺瘤。使用IFOBT、TF、IFOBT+TF(双联)检测、SEPT9基因甲基化和三种方法联合检测对结直肠癌和进展期腺瘤的检出率分别为0.4%、0.1%、0.5%、1.2%、1.8%;SEPT9基因甲基化检测对结直肠癌和进展期腺瘤的检出率优于IFOBT+TF(双联)(1.2%vs 0.5%,P=0.04),但三者联合检出率较单纯SEPT9基因甲基化检测,差异无统计学意义(1.8%vs 1.2%,P=0.27),对筛查对象进行性别和年龄分层分析显示,各项检测指标男女差别不大,但SEPT9基因甲基化检测在70岁以上患者中筛查优势明显。结论 SEPT9基因甲基化是一种简单无创的结直肠癌筛查新技术,单独使用对结直肠癌和腺瘤的检出率显著高于IFOBT和TF联合检测,因此SEPT9基因甲基化检测可作为老年人结直肠癌早期筛查的首选策略。 展开更多
关键词 SEPT9基因 转铁蛋白 粪隐血试验 结直肠癌 进展期腺瘤 筛查
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核酸检测与酶免检测平行筛查血液在基层血站的应用有效性研究 被引量:4
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作者 曲执 《中国医药指南》 2021年第28期113-114,共2页
目的探究在基层血站中应用核酸检测与酶免检测平行筛查血液的临床效果。方法选取我站于2019年4月至2020年5月进行无偿献血者100例,其中有98人接受此次的血液检测,所有无偿献血者的血液样本均给予核酸检测与酶免检测平行筛查,对比两种检... 目的探究在基层血站中应用核酸检测与酶免检测平行筛查血液的临床效果。方法选取我站于2019年4月至2020年5月进行无偿献血者100例,其中有98人接受此次的血液检测,所有无偿献血者的血液样本均给予核酸检测与酶免检测平行筛查,对比两种检测方式实中呈阳性的概率,在酶免检测后对于呈阴性的样本,均进行核酸检测,观察在乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、艾滋病毒(HIV)中检测不合格的情况。结果通过试验可知,经过酶免检测后,筛查出HBsAg、抗-HCV、抗-HIV-1/2无反应性与仅有1种试剂发生反应现象的样本总计88例,经过核酸检测后有阳性反应的样本有7例,阳性概率为7.95%。通过酶免检测后,乙型肝炎病毒(HBV)检测不合格有3例,丙肝病毒(HCV)检测不合格有3例,艾滋病毒(HIV)检测不合格有2例;接受核酸检测,不合格的样本有7例,概率为7.14%。结论在基层血站中,对血液检测进行核酸检测与酶免检测平行筛查,有利于两种检测方式进行相互补充,减少输血过程中的疾病传播,有效预防并控制了血液疾病的传染,保障了输血治疗的安全性、有效性。 展开更多
关键词 基层血站 血液 核酸检测 酶免检测 平行筛查
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Syphilis testing algorithms:A review 被引量:1
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作者 Steven R Binder Elitza S Theel 《World Journal of Immunology》 2016年第1期1-8,共8页
The methods and strategies used to screen for syp-hilis and to confirm initially reactive results can vary significantly across clinical laboratories. While the performance characteristics of these different appro-ach... The methods and strategies used to screen for syp-hilis and to confirm initially reactive results can vary significantly across clinical laboratories. While the performance characteristics of these different appro-aches have been evaluated by multiple studies, there is not, as of yet, a single, universally recommendedalgorithm for syphilis testing. To clarify the currently available options for syphilis testing, this update will summarize the clinical challenges to diagnosis, review the specific performance characteristics of treponemal and non-treponemal tests, and fnally, summarize select studies published over the past decade which have evaluated these approaches. Specifcally, this review will discuss the traditional and reverse sequence syphilis screening algorithms commonly used in the United States, alongside a discussion of the European Centre for Disease Prevention and Control syphilis algorithm. Ultimately, in the United States, the decision of which algorithm to use is largely dependent on laboratory resources, the local incidence of syphilis and patient demographics. Key words: Syphilis; Treponemal infection; Immuno-assay; Reverse sequence screening; Rapid plasma regain; Treponema pallidum particle agglutination test; Automation; Algorithm; Primary infection; Late latent infection 展开更多
关键词 SYPHILIS Treponemal infection immunoASSAY Reverse sequence screening Rapid plasma regain Treponema pallidum particle agglutination test AUTOMATION Algorithm Primary infection Late latent infection
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Usefulness of Immuno-Magnetic Beads Conjugated with Anti-EpCAM Antibody for Detecting Endometrial Cancer Cells
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作者 Yoshikatsu Koga Satoshi Katayose +8 位作者 Nobuko Onoda Takahiro Kasamatsu Tomoyasu Kato Shunichi Ikeda Mitsuya Ishikawa Ken Ishitani Yasuo Hirai Hideo Matsui Yasuhiro Matsumura 《Journal of Cancer Therapy》 2013年第8期1273-1282,共10页
A simple and non-invasive method for detecting endometrial cancer in women with abnormal uterine bleeding is required. For this purpose, we prepared immuno-magnetic beads conjugated with anti-human EpCAM rat monoclona... A simple and non-invasive method for detecting endometrial cancer in women with abnormal uterine bleeding is required. For this purpose, we prepared immuno-magnetic beads conjugated with anti-human EpCAM rat monoclonal antibody (mAb) for isolating exfoliated endometrial cells including endometrial cancer cells in vaginal discharge. The affinities of the anti-human EpCAM rat mAbs were analyzed by flow cytometry and immunocytochemistry and then magnetic beads were conjugated with the mAbs. The rate of retrieval of endometrial cells using the immuno-magnetic beads was calculated. Endometrial cells were isolated using the immuno-magnetic beads from the vaginal discharges of 22 patients with endometrial cancer and 16 non-malignant controls. The isolated cells were stained using endometrial cancer specific-mAbs and analyzed by flow cytometry and imaging cytometry. The immuno-magnetic beads conjugated with high-affinity mAb (clone 1456) appeared to have very low auto-fluorescence. Sufficient enrichment of Ep-CAMpositive cells using immuno-magnetic beads was observed in both simulation and clinical samples. The overall sensitivities of flow cytometry and imaging cytometry to detect endometrial cancer cells were 72.7% and 45.5%, respectively. Meanwhile, the overall specificities of flow cytometry and imaging cytometry for healthy controls were 75.0% and 81.3%, respectively. Our immuno-magnetic beads have very low auto-fluorescence, so they could be useful for fluorescent analysis, such as fluorescent immunochemical staining. In the future, these novel immuno-magnetic beads could be used for cytological study. 展开更多
关键词 immuno-Magnetic BEADS Auto-Fluorescence ENDOMETRIAL CANCER CANCER screening
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