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兔抗人免疫相关鸟苷三磷酸酶基因多克隆抗体的制备与鉴定
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作者 赵桂宪 吴志英 +2 位作者 陈万金 林毅 王柠 《中国临床神经科学》 2009年第6期601-605,共5页
目的:表达人免疫相关鸟苷三磷酸酶基因(IRGM)a全长融合蛋白,制备高质量的兔抗人IRGM多克隆抗体。方法:将IRGMa全长cDNA片段分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-2和真核表达载体pCMV-myc,测序验证序列正确。在大肠埃希菌Ecoli BL21中表达IRGM... 目的:表达人免疫相关鸟苷三磷酸酶基因(IRGM)a全长融合蛋白,制备高质量的兔抗人IRGM多克隆抗体。方法:将IRGMa全长cDNA片段分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-2和真核表达载体pCMV-myc,测序验证序列正确。在大肠埃希菌Ecoli BL21中表达IRGMa/GST融合蛋白,用纯化的可溶性IRGMa/GST融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗人IRGM抗体,采用ELISA、免疫印迹和竞争抑制等多种方法验证其敏感度和特异度。结果:自制的兔抗人IRGM多克隆抗体的特异度和敏感度均较高,效价更高于市售抗体。结论:成功制备了兔抗人IRGM多克隆抗体,为进一步的功能研究打下基础。 展开更多
关键词 免疫相关鸟苷三磷酸酶基因 融合蛋白 多克隆抗体
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