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鸭疫里氏杆菌OmpA基因真核表达载体构建及免疫效果初步评价 被引量:6
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作者 余波 李婷 +4 位作者 徐景峨 张亚楠 姜玲玲 周思旋 卜仕金 《畜牧与兽医》 北大核心 2021年第3期84-88,共5页
为构建鸭疫里氏杆菌外膜蛋白A(OmpA)基因真核表达重组质粒,同时验证其在DF-1细胞中的表达和对雏鸭的免疫保护效果,以pVAX1为真核表达载体,构建真核表达质粒pVAX1-OmpA,通过质粒PCR、双酶切和测序进行鉴定,将鉴定后的阳性质粒pVAX1-OmpA... 为构建鸭疫里氏杆菌外膜蛋白A(OmpA)基因真核表达重组质粒,同时验证其在DF-1细胞中的表达和对雏鸭的免疫保护效果,以pVAX1为真核表达载体,构建真核表达质粒pVAX1-OmpA,通过质粒PCR、双酶切和测序进行鉴定,将鉴定后的阳性质粒pVAX1-OmpA转染至DF-1细胞,采用间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot方法检测OmpA基因在DF-1细胞中的表达;将pVAX1-OmpA DNA免疫雏鸭,采集血清检测免疫抗体,并进行攻毒保护试验。结果,成功构建真核表达质粒pVAX1-OmpA,两种免疫学方法均检测到ompA蛋白的特异性表达,免疫雏鸭后14、28、35、49、63 d抗体水平与灭活疫苗组差异不显著,对雏鸭的免疫保护率达到100%。结果表明,pVAX1-OmpA重组质粒免疫雏鸭后能够诱导产生特异性的免疫抗体,能够产生较强的免疫保护效果,可作为新型DNA疫苗的候选。 展开更多
关键词 鸭疫里氏杆菌 OmpA基因 真核表达 免疫保护效果 DNA疫苗
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HBsAg阳性母亲所分娩婴儿完成主被动免疫后的免疫保护效果及其持久性研究 被引量:6
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作者 邹怀宾 赵梦鱼 +3 位作者 陈煜 郑素军 张华 段钟平 《北京医学》 CAS 2019年第10期888-891,共4页
目的明确HBsAg阳性母亲所分娩婴儿完成主被动免疫后7月龄至3岁期间的免疫保护效果与持久性。方法选取从2015年6月1日开始入组的在首都医科大学附属北京佑安医院完成了出生后主被动联合免疫[于出生后6 h内注射100 IU的乙型肝炎免疫球蛋白... 目的明确HBsAg阳性母亲所分娩婴儿完成主被动免疫后7月龄至3岁期间的免疫保护效果与持久性。方法选取从2015年6月1日开始入组的在首都医科大学附属北京佑安医院完成了出生后主被动联合免疫[于出生后6 h内注射100 IU的乙型肝炎免疫球蛋白(hepatitis B immunoglobulin,HBIG)及接种重组酵母乙型肝炎疫苗10μg,然后在1月龄及6月龄分别注射第2次及第3次乙肝疫苗]的婴儿并进行随访,在7月龄、1岁、2岁和3岁时采用进口罗氏试剂检测乙肝5项(部分婴儿采用进口罗氏试剂检测HBV DNA定量)。结果入组婴儿550例,548例完成了出生后7个月的随访与检测,其中528例(96.4%)获得保护性抗体(HBsAb≥10 IU/L),低应答者(10 IU/L≤HBsAb<100 IU/L)有31例(5.8%)、中应答者(100 IU/L≤HBsAb<1 000 IU/L)有196例(36.6%)、高应答者(HBsAb≥1 000 IU/L)有301例(56.3%);此外,无应答者7例(1.3%),阻断失败者8例(1.5%),隐匿HBV感染者5例(0.9%)。1例7月龄时为中应答者,随访至3岁时,不但HBsAb转阴,并发生HBV再感染。随着年龄的增长,婴儿HBsAb水平逐渐下降,从7月龄至1岁的随访,528例获得保护性抗体婴儿中仅有12例(2.3%)HBsAb水平升高,其余516例(97.7%)抗体水平均下降,部分婴儿下降明显甚至转为阴性。随访至3岁时,无应答率和低应答率分别由7月龄时的1.3%和5.8%升至49.7%和27.3%,而高应答率和中应答率分别由7月龄时的56.3%和36.6%降至1.1%和21.9%。结论HBsAg阳性母亲所分娩婴儿7月龄至3岁的HBsAb水平不同,呈动态变化;随着年龄的增长,大部分婴儿HBsAb水平下降,随访至3岁时,更多的婴儿抗体水平下降至低应答水平或转为阴性,甚至发生再感染;建议HBsAg阳性母亲所分娩的婴儿在出生后7个月至3年进行积极随访监测,可有效发现处于无应答、低应答状态者,及时采取加强或再次免疫措施,防止此类高危人群出生后再次感染HBV。 展开更多
关键词 HBSAG 主被动联合免疫 免疫保护效果 持久性 婴儿
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江苏省肾综合征出血热灭活疫苗四年期效果评价及免疫增强研究 被引量:4
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作者 朱凤才 吴扬生 +9 位作者 祖荣强 祁洪山 汪勤文 王庆奎 孙曰快 汪杰 李忠典 胡静 顾玲 刘光中 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 1999年第7期582-584,共3页
1994年底,在江苏省3个肾综合征出血热高发地区,分别进行了国产沙鼠肾Ⅰ型苗和地鼠肾Ⅱ型苗的大规模人群接种;一年后,用同一厂家同一型别的疫苗进行了一针次加强接种,并进行了四年期的免疫持久性和防病效果观察,结果显示:沙... 1994年底,在江苏省3个肾综合征出血热高发地区,分别进行了国产沙鼠肾Ⅰ型苗和地鼠肾Ⅱ型苗的大规模人群接种;一年后,用同一厂家同一型别的疫苗进行了一针次加强接种,并进行了四年期的免疫持久性和防病效果观察,结果显示:沙鼠肾Ⅰ型苗的中和抗体在加强后抗体阳性率最高,随后逐年下降,至免后4年(加强后3年),其中和抗体阳性率仍高于免后1年;地鼠肾Ⅱ型苗的中和抗体在基础三针免后,阳转率最高,一年后经一针次加强,阳性率大大提高,至免后4年(加强后3年),其阳性率仍高于免后1年。对各个不同时期两种型别疫苗的同期进行比较,Ⅰ型苗的免后荧光抗体阳性率高于Ⅱ型苗,而中和抗体阳性率,则为Ⅱ型苗高于Ⅰ型苗。2种型别的疫苗在四年观察期间,接种人群共发生4例病人,有3例发生于免后1年内,此4例病人的血清学型别均不与所接种疫苗的型别相同,这些结果提示,免后1年加强接种是必要的,两种疫苗均有较好的防病效果,尤其对同型病例的保护率达100%,二种疫苗的保护期至少4年。另外,通过对全程接种者免后3年流行高峰前后的荧光抗体波动,和对接种与对照人群发生的病例的病情进行比较研究,显示,国产两种型别的HFRS灭活疫苗免后无免疫效果(感染)增强反应。 展开更多
关键词 肾综合征出血热 灭活疫苗 疫苗 免疫效果
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牛源致脑炎大肠杆菌多表位抗原的制备及免疫效果的初步评价
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作者 海永慧 钦倩 +4 位作者 李蓓蓓 任静静 马勋 王鹏雁 蒋建军 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第2期193-197,共5页
目的 为了初步评价基于FimD、PilN和PilV蛋白优势表位设计的重组蛋白免疫保护效果。方法 将FimD、PilN和PilV蛋白的优势B细胞表位串联,构建原核表达载体,然后在BL21(DE3)大肠杆菌中进行原核表达及纯化;用弗氏佐剂与重组蛋白充分混匀后... 目的 为了初步评价基于FimD、PilN和PilV蛋白优势表位设计的重组蛋白免疫保护效果。方法 将FimD、PilN和PilV蛋白的优势B细胞表位串联,构建原核表达载体,然后在BL21(DE3)大肠杆菌中进行原核表达及纯化;用弗氏佐剂与重组蛋白充分混匀后免疫小鼠,收集血清,利用间接ELISA方法检测抗体效价,并进行抗原性的检测;三免后进行攻毒保护实验并对小鼠肝脏、脑和脾脏载菌量进行测定。结果 重组蛋白主要以包涵体形式表达。Western-blot结果显示出现一条特异性条带,与预期的重组蛋白大小相符,表明成功制备出多表位抗原。重组蛋白免疫小鼠后血清特异性抗体效价高达1:204 800。试验组小鼠攻毒后存活率为66%,对照组小鼠肝脏、脑和脾脏载菌量均显著高于试验组。结论 重组蛋白具有良好的抗原性和一定的免疫保护作用,具有研发牛源致脑炎大肠杆菌多表位疫苗的潜在价值。 展开更多
关键词 牛源致脑炎大肠杆菌 B细胞表位 原核表达 免疫保护效果
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沙门菌鞭毛蛋白增强禽流感灭活疫苗的免疫效力研究
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作者 黄秀芬 章振华 +3 位作者 王天坤 孙惠玲 陈小玲 李永清 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第9期6-10,共5页
为研制沙门菌鞭毛蛋白佐剂禽流感疫苗,以盐酸裂解法制备和纯化鸡肠炎沙门菌鞭毛蛋白,将其作为佐剂,包裹灭活的禽流感病毒(H9N2亚型),制备禽流感灭活疫苗并进行动物试验。结果表明,该疫苗分别经滴鼻和肌肉注射接种后,虽然没有明显提高免... 为研制沙门菌鞭毛蛋白佐剂禽流感疫苗,以盐酸裂解法制备和纯化鸡肠炎沙门菌鞭毛蛋白,将其作为佐剂,包裹灭活的禽流感病毒(H9N2亚型),制备禽流感灭活疫苗并进行动物试验。结果表明,该疫苗分别经滴鼻和肌肉注射接种后,虽然没有明显提高免疫鸡的血凝抑制(HI)抗体水平,但显著提高了血清中和呼吸道黏膜分泌液中抗禽流感病毒特异性IgA水平;攻毒试验结果表明,经滴鼻接种后,单独使用灭活的AIV没有产生免疫保护作用(0/15),而鞭毛蛋白佐剂灭活苗免疫组保护率达53.3%(8/15);经肌肉注射接种后,单独免疫灭活的AIV组的保护率为30%(3/10),而鞭毛蛋白佐剂灭活苗免疫组保护率达60%(6/10)。表明沙门菌鞭毛蛋白能够有效促进禽流感灭活疫苗的免疫保护效果。 展开更多
关键词 沙门菌鞭毛 禽流感 免疫佐剂 保护效力
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副鸡禽杆菌荚膜多糖-血凝素蛋白免疫原性的研究
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作者 路迎迎 路明华 +3 位作者 李淑芳 张培君 龚玉梅 王宏俊 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第8期158-160,共3页
为了研究副鸡禽杆菌荚膜多糖(CPS)-血凝素(HA)蛋白的免疫原性,试验采用B型副鸡禽杆菌CPS与HA蛋白分别对SPF鸡进行单独免疫和联合免疫的方法,比较攻毒后的保护效果。结果表明:CPS单独肌肉注射或眶下窦注射免疫对鸡的保护率不超过30%;HA... 为了研究副鸡禽杆菌荚膜多糖(CPS)-血凝素(HA)蛋白的免疫原性,试验采用B型副鸡禽杆菌CPS与HA蛋白分别对SPF鸡进行单独免疫和联合免疫的方法,比较攻毒后的保护效果。结果表明:CPS单独肌肉注射或眶下窦注射免疫对鸡的保护率不超过30%;HA单独肌肉注射或眶下窦注射免疫对鸡的保护率不超过40%;CPS+HA联合肌肉注射免疫的保护率为60%,眶下窦免疫的保护率达80%。CPS+HA联合免疫组血清抗体水平高于相应免疫方式HA、CPS单独免疫组;与肌肉注射相比,攻毒试验结果显示眶下窦免疫的保护效果好。说明副鸡禽杆菌CPS-HA蛋白具有较好的免疫原性。 展开更多
关键词 副鸡禽杆菌 荚膜多糖 血凝素 免疫 保护效果 免疫原性
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浙江省肾综合征出血热纯化灭活疫苗的免疫效果和免疫策略研究 被引量:5
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作者 夏建华 翁景清 +19 位作者 赵芝雅 龚震宇 朱智勇 兰锦清 陈毓土 徐江荣 季群伟 张庆梅 陈晓峰 吴云高 来庆华 林正渠 余新顺 方春福 王玮 吕跃民 龚晓兰 廖水法 范小钢 汤樟全 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 1997年第5期344-347,共4页
目的:观察HFRS(Ⅰ型)鼠脑纯化灭活疫苗全程和加强免疫后18个月的流行病学。血清学效果。方法:采用免疫荧光法检测微量细胞病变试验,分别检测血清中的特异性抗体及中和抗体。结果:全程免疫后15天,中和抗体阳性率为40%,GMT为4.0... 目的:观察HFRS(Ⅰ型)鼠脑纯化灭活疫苗全程和加强免疫后18个月的流行病学。血清学效果。方法:采用免疫荧光法检测微量细胞病变试验,分别检测血清中的特异性抗体及中和抗体。结果:全程免疫后15天,中和抗体阳性率为40%,GMT为4.06;360天降为阴性,GMT为2.50;加强后2周抗体阳性率为50%,GMT为4.35.全程免疫后15天IFA抗体阳性率为100%,GMT为81.75;至360天阳性率降至12.50%,GMT为5.69;加强后2周阳性率升至81.25%,GMT为1297。加强免疫6363例,仅2例出现弱反应,无中、强反应。免后18个月经流行病学调查,1年内(经春、秋两个流行高峰)接种组发病2例,发病率为19.12/10万;对照组发病12例,发病率为74.06/10万,保护率为74.18%,保护指数为3.87;加强1针后的6个月中,接种组无病例,对照组发病3例,发病率47.15/10万,保护率达100%。结论:该疫苗安全性好;有较好的免疫应答;近期和中期流行病学防病效果良好。 展开更多
关键词 肾综合征出血热 纯化灭活疫苗 免疫效果
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牛病毒性腹泻弱毒活疫苗免疫持续期的研究 被引量:4
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作者 张淑琴 郭利 +3 位作者 王炜 张亭亭 吴永旺 武华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第6期231-234,共4页
为检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)弱毒活疫苗在免疫牛体内抗体产生及其消长规律,评价弱毒疫苗的保护效力,并确定免疫持续期,本试验对免疫试验牛每头颈部肌肉接种BVDV SM株弱毒疫苗104.5 TCID50/头,监测血清抗体效价,进行免疫持续期的确定... 为检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)弱毒活疫苗在免疫牛体内抗体产生及其消长规律,评价弱毒疫苗的保护效力,并确定免疫持续期,本试验对免疫试验牛每头颈部肌肉接种BVDV SM株弱毒疫苗104.5 TCID50/头,监测血清抗体效价,进行免疫持续期的确定。在疫苗免疫后的6、9和12个月分别抽取5头免疫组和5头对照组牛采用BVDV-JL强毒株进行攻毒试验,每头牛攻毒剂量为6×107.0 TCID50/mL。结果显示疫苗免疫后12个月时血清中和抗体效价仍维持在1∶1048以上,攻毒结果显示3个时间点强毒攻击后,免疫组所有动物白细胞数量都没有下降也没有分离到病毒,而对照组动物白细胞数下降均超过30%,6和9个月动物均分离到病毒,而12个月对照组动物由于年龄大,没有分离到病毒,因此暂定此疫苗的免疫持续期为9个月。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 弱毒活疫苗 免疫持续期 保护效果
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