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黄芪甲苷调控Nrf2/Bach1/HO-1信号通路抑制缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤 被引量:33
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作者 杨萍 周玉平 +2 位作者 常秀春 王凤 李高文 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2331-2337,共7页
研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及其机制。将H9c2心肌细胞缺氧培养12 h再复氧培养8 h复制心肌细胞缺氧复氧损伤(H/R)模型,AS-Ⅳ干预后检测活性氧(ROS)的产生,细胞活力,细胞上清SOD,MDA... 研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及其机制。将H9c2心肌细胞缺氧培养12 h再复氧培养8 h复制心肌细胞缺氧复氧损伤(H/R)模型,AS-Ⅳ干预后检测活性氧(ROS)的产生,细胞活力,细胞上清SOD,MDA,IL-6,TNF-α等指标水平,以评估AS-Ⅳ的干预效应;进一步通过蛋白印记试验观察AS-Ⅳ对Nrf2,Bach1,HO-1蛋白表达的影响;最后通过siRNA方法敲低HO-1基因表达观察其对AS-Ⅳ干预效应的逆转作用。结果显示,与H/R模型组比较,H/R+AS-Ⅳ组细胞活力显著提高(P<0.01),细胞内ROS显著减少(P<0.01),细胞上清MDA,hs-CRP,TNF-α含量显著减少(P<0.01),SOD含量显著增加(P<0.01);细胞HO-1蛋白表达显著增加(P<0.01),细胞核蛋白Nrf2表达显著增多(P<0.01),细胞核蛋白Bach1表达显著减少(P<0.01);预先采用脂质体转染HO-1 siRNA至H9c2细胞,敲低HO-1的表达后,可部分逆转AS-Ⅳ的上述效应。该研究结果提示,AS-Ⅳ对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤具有显著的保护作用,其机制与调控Nrf2/Bach1/HO-1信号通路有关。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 H9C2心肌细胞 缺氧/复氧 Nrf2/Bach1/HO-1信号通路
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山柰酚和槲皮素对乳鼠心肌缺氧复氧及过氧化损伤的保护作用 被引量:32
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作者 汤喜兰 刘建勋 +4 位作者 李澎 李磊 马彦雷 史跃 李然 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期56-59,共4页
目的:观察山柰酚和槲皮素对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的干预作用并探讨其作用机理。方法:取大鼠新生乳鼠心肌细胞做原代培养,MTT法检测细胞活力,确定药物作用安全范围;考察药物对心肌细胞缺氧复氧损伤模型LDH漏出的改变;复制心肌细胞过... 目的:观察山柰酚和槲皮素对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的干预作用并探讨其作用机理。方法:取大鼠新生乳鼠心肌细胞做原代培养,MTT法检测细胞活力,确定药物作用安全范围;考察药物对心肌细胞缺氧复氧损伤模型LDH漏出的改变;复制心肌细胞过氧化氢损伤模型,观察药物对细胞活力及上清液中LDH含量的影响。结果:山柰酚和槲皮素125μg/ml以下对心肌细胞活力无明显影响。山柰酚或槲皮素100、50、25、12.5μg/ml均可以降低缺氧复氧损伤后心肌细胞的LDH漏出率(P<0.01或P<0.05),其中山柰酚100、50、25μg/ml浓度,槲皮素以50、25、12.5μg/ml浓度作用较佳。山柰酚、槲皮素对心肌细胞过氧化氢损伤均有显著的抑制作用,均呈浓度依赖性,并可显著降低过氧化氢损伤所致的LDH释放。结论:山柰酚和槲皮素具有显著的抗心肌细胞缺氧损伤的能力,与其抗氧化的药理作用有关。 展开更多
关键词 山柰酚 槲皮素 心肌细胞 缺氧复氧 过氧化损伤
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补阳还五汤抗缺氧再给氧乳鼠心肌细胞凋亡的实验研究 被引量:23
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作者 佟丽 沈剑刚 +2 位作者 邱幸生 曲宏达 陈育尧 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期522-524,共3页
目的:观察含补阳还五汤的大鼠血清对缺氧24h再给氧4h后新生乳鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及对一氧化氮(NO)含量的影响。方法:采用Annexin V-PI双标记方法(以流式细胞仪和ELISA法)检测细胞凋亡,以紫外分光光度法测定心肌细胞乳酸脱氢酶... 目的:观察含补阳还五汤的大鼠血清对缺氧24h再给氧4h后新生乳鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及对一氧化氮(NO)含量的影响。方法:采用Annexin V-PI双标记方法(以流式细胞仪和ELISA法)检测细胞凋亡,以紫外分光光度法测定心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放水平,采用改良Yu方法测定NO浓度,用Ohkawa法测定硫代巴比妥酸(TBARS)反应物质含量。结果:补阳还五汤药物血清能显著抑制心肌细胞的凋亡及LDH释放,降低培养细胞上清液中NO和TBARS水平,其效应呈剂量依赖关系。结论:补阳还五汤具有抗缺氧再给氧心肌细胞凋亡作用,其机制与清除氧自由基和NO特性有关。 展开更多
关键词 补阳还五汤 缺氧再给氧损伤 细胞凋亡 一氧化氮 心肌缺血 氧自由基 实验研究
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黄精多糖对缺氧复氧诱导H9c2心肌细胞损伤的保护作用 被引量:28
4
作者 雷升萍 龙子江 +3 位作者 施慧 高华武 朱永恒 王靓 《中药药理与临床》 CSCD 北大核心 2017年第1期102-106,共5页
目的:探究黄精多糖(Polygonatum sibiricum polysaccharides,PSP)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia-reoxygenation,H/R)损伤的保护作用。方法:体外无菌培养H9c2心肌细胞,制备缺氧/复氧损伤模型。应用A0-EB和Hoechst33324染色法观察心肌... 目的:探究黄精多糖(Polygonatum sibiricum polysaccharides,PSP)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia-reoxygenation,H/R)损伤的保护作用。方法:体外无菌培养H9c2心肌细胞,制备缺氧/复氧损伤模型。应用A0-EB和Hoechst33324染色法观察心肌细胞凋亡形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用MTT法检测心肌细胞存活率,Westen Blot法检测H9c2心肌细胞Caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白表达。结果:缺氧/复氧模型组中H9c2细胞存活率明显降低,细胞核浓染致密、固缩,细胞凋亡率明显增加,Caspase-3的表达和Bax/Bcl-2比率显著上调;与模型组比较,黄精多糖1.0、1.5、2.0mg/ml药物组中细胞存活率均明显升高,细胞核淡染,轻微缩小,细胞凋亡率降低,Bax/Bcl-2比率明显下调,Caspase-3表达水平被显著抑制。结论:黄精多糖对H/R诱导的H9c2心肌细胞具有保护作用,其作用可能与抑制心肌细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 黄精多糖 缺氧/复氧损伤 H9C2心肌细胞 凋亡 BAX/BCL-2 Caspase-3
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基于中药血清化学及血清药理学方法探讨香青兰保护心肌细胞缺氧/复氧损伤物质基础 被引量:28
5
作者 田友清 尚靖 +2 位作者 何婷 蔡旻煊 阿布卡德 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期620-624,共5页
目的:利用中药血清化学及血清药理学方法探讨香青兰保护心肌细胞缺氧/复氧损伤的物质基础。方法:测定和比较香青兰提取物及其灌胃给药前后大鼠空白血清和含药血清的HPLC,寻找香青兰入血成分;体外培养乳大鼠原代心肌细胞及H9c2细胞,用Na2... 目的:利用中药血清化学及血清药理学方法探讨香青兰保护心肌细胞缺氧/复氧损伤的物质基础。方法:测定和比较香青兰提取物及其灌胃给药前后大鼠空白血清和含药血清的HPLC,寻找香青兰入血成分;体外培养乳大鼠原代心肌细胞及H9c2细胞,用Na2S2O4或N2为缺氧剂建立缺氧/复氧损伤模型,以细胞活力、LDH释放量、T-SOD活力、MDA产量及细胞凋亡为指标,考察香青兰提取物及其含药血清、香青兰提取物不同给药剂量及不同给药时间段所采血清的处理物对细胞损伤的影响。结果:香青兰在血清中出现4个移行成分,其中3个为原型成分,1个可能为代谢产物;与模型组或空白血清组相比,香青兰提取物、含药血清及不同因素影响下的血清处理物显著降低缺氧/复氧心肌细胞LDH释放量和MDA产量(P<0.05,P<0.01),显著升高T-SOD及细胞活力(P<0.05,P<0.01),明显抑制细胞凋亡。结论:香青兰提取物4个入血成分可能为香青兰保护心肌细胞缺氧/复氧损伤的物质基础。 展开更多
关键词 香青兰 血清药物化学 血清药理学 缺氧/复氧损伤 原代心肌细胞 H9c2细胞
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红景天苷对大鼠急性心肌缺血和乳鼠心肌细胞的保护作用 被引量:24
6
作者 颜天华 马莹 +3 位作者 杨伟 王秋娟 贾莹 潘志伟 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期693-695,共3页
目的研究红景天苷对大鼠急性心肌缺血的保护作用,以及对乳鼠心肌细胞于缺氧/复氧损伤和氧化损伤下的影响。方法以垂体后叶素(pituitrin)制备大鼠急性心肌缺血模型,观察急性心肌缺血大鼠Ⅱ导联心电图的变化。体外培养原代乳鼠心肌细胞,... 目的研究红景天苷对大鼠急性心肌缺血的保护作用,以及对乳鼠心肌细胞于缺氧/复氧损伤和氧化损伤下的影响。方法以垂体后叶素(pituitrin)制备大鼠急性心肌缺血模型,观察急性心肌缺血大鼠Ⅱ导联心电图的变化。体外培养原代乳鼠心肌细胞,采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)诱导心肌细胞缺氧/复氧损伤和过氧化氢(H2O2)诱导造成氧化损伤模型。MTT法测定细胞存活率并测定乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)浓度。结果红景天苷能显著抑制垂体后叶素所造成的心电图T波抬高和J点升高;能明显提高缺氧/复氧模型和氧化损伤模型下的细胞存活率,降低培养液中的LDH和CK浓度。结论红景天苷对急性心肌缺血损伤、缺氧/复氧损伤和氧化损伤均有较好的保护作用。 展开更多
关键词 红景天苷 急性心肌缺血 心肌细胞 缺氧/复氧 氧化损伤
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川芎内酯A预处理对心肌微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤保护作用及机制研究 被引量:13
7
作者 高伟 梁日欣 +3 位作者 肖永庆 李丽 王岚 杨庆 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期133-137,共5页
目的:探讨川芎内酯A预处理对心脏微血管内皮细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及作用机制。方法:采用体外培养的大鼠乳鼠心脏微血管内皮细胞,空白组不加任何处理;单纯H/R组缺氧4 h/复氧2 h;单纯预处理组低氧25 m in/复氧30 m in,然后缺... 目的:探讨川芎内酯A预处理对心脏微血管内皮细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及作用机制。方法:采用体外培养的大鼠乳鼠心脏微血管内皮细胞,空白组不加任何处理;单纯H/R组缺氧4 h/复氧2 h;单纯预处理组低氧25 m in/复氧30 m in,然后缺氧4 h/复氧2 h,各给药组分别加1×10-7,1×10-9,1×10-11mol.L-1的川芎内酯A孵育55 m in,然后缺氧4 h/复氧2 h;实验结束后取细胞上清液测一氧化氮(NO),一氧化氮合酶(NOS),内皮素(ET),取造模后的且固定在盖玻片的细胞,用原位杂交法检测iNOSmRNA和ETmRNA的基因表达。结果:H/R组细胞存活数降低明显,细胞培养液中NO和NOS活性显著降低,ET的活性明显升高,iNOSmRNA表达量减少,ETmRNA表达量增加;川芎内酯A 3个剂量组与H/R组比较,细胞存活数均明显增加,细胞培养液中NO和NOS活性增加,ET活性降低,iNOSmRNA表达量增加而ETmRNA表达量则减少。结论:川芎内酯A预处理能减轻内皮细胞损伤,对心脏微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤可能具有保护作用,其作用机制可能与上调内皮细胞中iNOSmRNA的表达和下调ETmRNA的表达有关。 展开更多
关键词 川芎内酯A 心脏微血管内皮细胞 缺氧/复氧损伤 基因表达
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麦冬皂苷D对大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及机制研究 被引量:21
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作者 赵玲琳 张勇 +1 位作者 薛慧 刘洁 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2022年第2期178-184,共7页
目的:探讨麦冬皂苷D对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及机制。方法:体外培养心肌细胞H9c2,实验分为心肌细胞未行任何干预的对照组、缺氧复氧组(H/R组)、缺氧复氧+麦冬皂苷D组(H/R+OpD组)、缺氧复氧+麦冬皂苷D+磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)... 目的:探讨麦冬皂苷D对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及机制。方法:体外培养心肌细胞H9c2,实验分为心肌细胞未行任何干预的对照组、缺氧复氧组(H/R组)、缺氧复氧+麦冬皂苷D组(H/R+OpD组)、缺氧复氧+麦冬皂苷D+磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)过表达组(H/R+OpD+PI3K组)、缺氧复氧+麦冬皂苷D+pcDNA空载体对照组(H/R+OpD+pcDNA组)。噻唑蓝法检测心肌细胞存活率,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,试剂盒法检测丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力,酶联免疫吸附试验检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测各组心肌细胞中PI3K的表达量。结果:与对照组相比,H/R组心肌细胞中CK-MB、TNF-α、IL-1β、LDH和MDA含量、凋亡率和PI3K的表达量均明显升高,心肌细胞存活率和SOD活力明显降低(P均<0.05);与H/R组相比,H/R+OpD组上述指标均发生逆转(P均<0.05);与H/R+OpD组比,H/R+OpD+PI3K组心肌细胞中CK-MB、TNF-α、IL-1β、LDH和MDA含量、凋亡率及PI3K的表达量升高,心肌细胞存活率和SOD活力降低(P均<0.05),而H/R+OpD+pcDNA组以上各指标均无明显变化(P均>0.05)。结论:麦冬皂苷D对心肌细胞缺氧复氧损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制PI3K基因的表达有关。 展开更多
关键词 麦冬皂苷D 磷脂酰肌醇-3激酶基因 缺氧复氧 心肌细胞损伤 缺血再灌注损伤
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附子多糖保护缺氧/复氧乳鼠心肌细胞及其抗内质网应激的机制研究 被引量:22
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作者 刘颖 纪超 吴伟康 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期459-463,共5页
目的:观察附子多糖对缺氧/复氧后心肌细胞的保护,并探讨附子多糖的保护机制是否与其抑制内质网应激反应有关。方法:建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,将乳鼠心肌细胞分为正常对照组、缺氧/复氧组(缺氧3 h后复氧6 h)和不同浓度附子多糖(0.1... 目的:观察附子多糖对缺氧/复氧后心肌细胞的保护,并探讨附子多糖的保护机制是否与其抑制内质网应激反应有关。方法:建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,将乳鼠心肌细胞分为正常对照组、缺氧/复氧组(缺氧3 h后复氧6 h)和不同浓度附子多糖(0.1g/L、1g/L、10g/L、20g/L)+缺氧/复氧组。MTT法测定心肌细胞存活率,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,Western blotting分析葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及caspase-12的表达,荧光定量。PCR进一步检测CHOP及caspase-12 mRNA表达。结果:缺氧复氧后,心肌细胞中内质网应激反应标志蛋白GRP78表达增加,内质网应激凋亡相关蛋白CHOP及caspase-12蛋白和mRNA表达亦明显升高。与缺氧/复氧组相比较,附子多糖预处理24 h后可以有效抑制缺氧/复氧引起的GRP78、CHOP和caspase-12的表达上调,增加心肌细胞的存活率,抑制心肌细胞凋亡的发生。附子多糖的保护效应呈剂量依赖形式,10 g/L剂量时达到峰值。结论:附子多糖保护缺氧/复氧后心肌细胞的可能机制与其抑制内质网应激所介导的细胞凋亡途径相关。 展开更多
关键词 附子多糖 内质网应激 缺氧/复氧损伤 心肌细胞
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玉郎伞两种黄酮单体对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用 被引量:19
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作者 简洁 刘曦 +1 位作者 黄仁彬 蒋伟哲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期942-945,共4页
目的研究从玉郎伞(Yulangsan,YLS)中首次分离的两种黄酮单体对体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法建立体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,倒置显微镜下观察加入YLS两种单体的含药血... 目的研究从玉郎伞(Yulangsan,YLS)中首次分离的两种黄酮单体对体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法建立体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,倒置显微镜下观察加入YLS两种单体的含药血清(10%、5%、2.5%)后,各组缺氧/复氧心肌细胞形态学和搏动频率的变化;以MTT法检测各组细胞的存活率;用ELISA法测定心肌细胞Na+,K+-ATP酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶活性及细胞培养上清液中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)活性和丙二醛(MDA)含量。结果与模型组相比,YLS两种单体含药血清的高、中剂量均能明显增加心肌细胞的存活率,增强Na+,K+-ATP酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶活性,降低细胞培养上清液LDH、NOS活性、MDA含量,提高T-SOD活性并呈剂量依赖性(P<0.05)。结论两种YLS单体对体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,其机制可能与清除自由基、抑制心肌细胞Ca2+超载有关。 展开更多
关键词 玉郎伞 黄酮单体 心肌细胞 缺氧/复氧损伤
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人参皂苷Rg_(1)对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制研究 被引量:19
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作者 李千会 葛卓望 +3 位作者 田丁 相银 陈昱 张亚臣 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1460-1466,共7页
探讨人参皂苷Rg1对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation, H/R)损伤的保护作用及其信号通路。建立H9c2心肌细胞的H/R模型,分成不同的处理组,利用CCK-8(cell counting kit-8)法检测心肌细胞的活性,Brdu法检测H9c2细胞的增殖,检... 探讨人参皂苷Rg1对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation, H/R)损伤的保护作用及其信号通路。建立H9c2心肌细胞的H/R模型,分成不同的处理组,利用CCK-8(cell counting kit-8)法检测心肌细胞的活性,Brdu法检测H9c2细胞的增殖,检测心肌细胞caspase-3的活性,Western blot法检测蛋白表达。利用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡水平。人参皂苷Rg1可抑制H/R导致的心肌细胞凋亡和caspase-3的活性;可促进核因子红细胞2相关因子2 (nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)核转录,同时可增强下游基因血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)表达;可随着浓度的增加(10,20,40,60μmol·L^(-1)) Nrf2核转录和HO-1表达增加;然而,心肌细胞转染Nrf2-siRNA后人参皂苷Rg1保护心肌细胞的作用明显减弱。人参皂苷Rg1可通过激活Nrf2/HO-1信号通路保护心肌细胞。 展开更多
关键词 人参皂苷Rg_(1) 缺氧/复氧 缺血再灌注损伤 凋亡
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腺苷对缺氧/复氧心肌细胞的保护作用 被引量:15
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作者 王兴祥 周利龙 +2 位作者 丁家望 冯义柏 程龙献 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期47-52,共6页
本研究旨在探讨腺苷 (adenosine ,ADO)对缺氧 /复氧 (hypoxia/reoxygenation ,H/R)心肌细胞的保护作用及其分子机制。将原代培养的新生大鼠心肌细胞分成H/R对照组和ADO (1 0 μmol/L)保护组。用倒置相差显微镜观察心肌细胞的生长状态。... 本研究旨在探讨腺苷 (adenosine ,ADO)对缺氧 /复氧 (hypoxia/reoxygenation ,H/R)心肌细胞的保护作用及其分子机制。将原代培养的新生大鼠心肌细胞分成H/R对照组和ADO (1 0 μmol/L)保护组。用倒置相差显微镜观察心肌细胞的生长状态。检测两组培养基质乳酸脱氢酶 (LDH)活性和心肌细胞Ca2 + 和丙二醛 (MDA)浓度。用ELISA法检测肿瘤坏死因子 (TNF α)的表达 ,并用凝胶电泳迁移率改变法 (EMSA)测定核因子 (NF κB)结合活性。所得结果如下 :(1)心肌细胞H/R培养后皱缩、变圆 ,伪足减少 ,ADO组心肌细胞的形态变化小于对照组 ;(2 )ADO减少缺氧和复氧期间心肌细胞LDH的漏出 (bothP <0 0 1) ;(3 )ADO降低缺氧和复氧期间心肌细胞内的Ca2 +浓度 (bothP <0 0 1) ;(4)ADO降低缺氧和复氧期间心肌细胞MDA浓度 (bothP <0 0 1) ;(5 )ADO抑制缺氧和复氧期间TNF α的表达 (bothP <0 0 1) ;(6)ADO抑制缺氧和复氧期间心肌细胞NF κB结合活性 (bothP <0 0 1)。以上结果提示 :(1)外源性ADO可减轻心肌细胞的H/R损伤 ;(2 )外源性ADO抑制H/R期间心肌细胞TNF α的表达 ;(3 )外源性ADO可能通过抑制心肌细胞NF κB结合活性下调TNF 展开更多
关键词 腺苷 缺氧/复氧损伤 心肌细胞
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Nrf2-ARE通路在缺氧/吡那地尔后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用 被引量:18
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作者 喻守佳 王海英 +1 位作者 喻田 刘兴奎 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1696-1699,1703,共5页
目的:探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)-抗氧化反应元件(ARE)通路在缺氧后处理和吡那地尔后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用。方法:建立成年大鼠心肌细胞缺氧复氧模型,分离、培养心肌细胞,随机分为6组(n=8):正常组(N组)、模型组(M... 目的:探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)-抗氧化反应元件(ARE)通路在缺氧后处理和吡那地尔后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用。方法:建立成年大鼠心肌细胞缺氧复氧模型,分离、培养心肌细胞,随机分为6组(n=8):正常组(N组)、模型组(M组)、缺氧后处理组(IPO组)和不同浓度吡那地尔后处理组(P25组、P50组和P100组)。分离后的心肌细胞培养20 h后,除N组继续培养外,其余各组均缺氧45 min,复氧60min。IPO组缺氧45 min后复氧、缺氧循环3次,每次各5 min,在继续复氧60 min;P25组、P50组和P100组缺氧45 min后分别以25、50和100μmol/L吡那地尔处理5 min,复氧60 min。采用real-time PCR及Western blotting技术检测复氧末心肌细胞中Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)和超氧化物歧化酶1(SOD1)mRNA及蛋白表达水平。结果:与N组比较,其它各组与Nrf2、NQO1、SOD1及HO-1的mRNA及蛋白质表达均降低(P<0.05);与M组比较,其它各组mRNA及蛋白质表达均显著增高(P<0.05);其中IPO组和P50组mRNA转录量显著高于P25组和P100组(P<0.05);P25组SOD1 mRNA显著高于P100组(P<0.05)。IPO组和P50组Nrf2、SOD1和NQO1蛋白质表达显著高于P25和P100组(P<0.05);P50组HO-1蛋白质表达量显著高于IPO组、P25组和P100组(P<0.05);P25组HO-1和NQO1蛋白质表达显著高于P100组(P<0.05)。结论:缺氧后处理和吡那地尔后处理可能通过激活Nrf2-ARE通路减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤。 展开更多
关键词 核因子E2相关因子2 吡那地尔 缺氧复氧损伤 心肌细胞 后处理
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金属硫蛋白介导附子多糖对缺氧复氧心肌细胞的保护 被引量:15
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作者 刘颖 纪超 吴伟康 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2012年第4期172-175,共4页
目的:以金属硫蛋白为着眼点,探讨附子多糖对缺氧复氧后心肌细胞的保护机制。方法:建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,将乳鼠心肌细胞分为正常对照组、缺氧/复氧组、附子多糖组。缺氧/复氧组给予心肌细胞缺氧3 h后复氧6 h;附子多糖组分别给... 目的:以金属硫蛋白为着眼点,探讨附子多糖对缺氧复氧后心肌细胞的保护机制。方法:建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,将乳鼠心肌细胞分为正常对照组、缺氧/复氧组、附子多糖组。缺氧/复氧组给予心肌细胞缺氧3 h后复氧6 h;附子多糖组分别给予10.0,1.0,0.1 g.L-1的附子多糖预处理心肌细胞24 h后再予缺氧3 h后复氧6 h。ELISA检测金属硫蛋白的含量,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,测定心肌细胞内丙二醛(MDA)的含量和细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果:与缺氧/复氧组相比较,附子多糖可以呈剂量依赖形式地增加金属硫蛋白的合成,减少MDA的生成与LDH的的释放,抑制心肌细胞凋亡,在10.0 g.L-1时作用达到峰值。结论:附子多糖对于缺氧复氧心肌细胞损伤具有保护效应,其机制与附子多糖促进金属硫蛋白的合成,对抗氧化应激损伤,抑制心肌细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 附子多糖 金属硫蛋白 缺氧复氧损伤
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太子参抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的活性部位筛选及作用机制研究 被引量:15
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作者 杨馨 张金娟 +3 位作者 宛蕾 邓连力 廖尚高 何迅 《中国药房》 CAS 北大核心 2018年第14期1958-1964,共7页
目的:筛选太子参抗心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的活性部位,并探讨其作用机制。方法:太子参药材水提物经D101大孔吸附树脂柱以水-乙醇梯度洗脱,得水洗脱部位(Fr.A)、30%乙醇洗脱部位(Fr.B)、50%乙醇洗脱部位(Fr.C)、95%乙醇洗脱部位(Fr.D... 目的:筛选太子参抗心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的活性部位,并探讨其作用机制。方法:太子参药材水提物经D101大孔吸附树脂柱以水-乙醇梯度洗脱,得水洗脱部位(Fr.A)、30%乙醇洗脱部位(Fr.B)、50%乙醇洗脱部位(Fr.C)、95%乙醇洗脱部位(Fr.D)。采用化学缺氧法以连二亚硫酸钠复制大鼠H9c2心肌细胞H/R损伤模型,采用MTS法检测经太子参各部位低、中、高剂量(Fr.A、Fr.B、Fr.C低、中、高剂量均分别为750、1 500、3 000 mg/L,Fr.D低、中、高剂量分别为5、10、20 mg/L)预处理后的细胞存活率,筛选活性最强部位。分别采用微板法、硫代巴比妥酸比色法、WST-1法测定经太子参活性最强部位低、中、高剂量预处理后细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性以及细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用蛋白质印迹法检测细胞胱天蛋白酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果:经4个部位预处理后,Fr.A高剂量组,Fr.B高剂量组,Fr.C各剂量组的细胞存活率均较模型组显著升高(P<0.05或P<0.01),且以Fr.C的活性最强。经Fr.C预处理后,各剂量组细胞培养液中LDH活性,中、高剂量组细胞内MDA含量、细胞凋亡率及Caspase-3和Bax蛋白的表达量均较模型组显著下降(P<0.05或P<0.01);高剂量组细胞内SOD活性以及中、高剂量组细胞Bcl-2蛋白的表达量均较模型组显著升高(P<0.05)。结论:太子参Fr.A、Fr.B、Fr.C部位均具有抗心肌细胞H/R损伤的作用,其中以Fr.C的活性最强;Fr.C抗心肌细胞H/R损伤作用可能与其改善细胞的氧化应激状态,提高细胞清除氧自由基的能力,降低细胞脂质过氧化程度,抑制细胞凋亡,上调Bcl-2蛋白表达以及下调Caspase-3、Bax蛋白表达有关。 展开更多
关键词 太子参 活性部位 大鼠H9c2心肌细胞 缺氧/复氧损伤 氧化应激 细胞凋亡 胱天蛋白酶3 B细胞淋巴瘤/白血病-2 Bcl-2相关X蛋白
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lncRNA NEAT1调控miR-206对缺氧复氧大鼠心肌细胞氧化应激损伤和凋亡的影响 被引量:14
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作者 邴艳萍 宋璇 +1 位作者 姜楠 宋丽杰 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2020年第12期1034-1041,共8页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1调控miR-206对缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化应激损伤和凋亡的影响和机制。方法体外培养H9c2心肌细胞,构建心肌细胞缺氧复氧模型。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测缺氧复氧诱导后lncRNA NEAT1和miR-206... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1调控miR-206对缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化应激损伤和凋亡的影响和机制。方法体外培养H9c2心肌细胞,构建心肌细胞缺氧复氧模型。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测缺氧复氧诱导后lncRNA NEAT1和miR-206的表达水平。将lncRNA NEAT1小干扰RNA(si-lncRNA NEAT1)、miR-206模拟物(miR-206 mimics)分别转染H9c2细胞,缺氧复氧诱导后,检测细胞中丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量以及细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved Caspase-3)和cleaved Caspase-9蛋白表达。利用荧光素酶报告基因实验以及RT-qPCR验证lncRNA NEAT1和miR-206的靶向结合关系。结果缺氧复氧诱导后H9c2细胞中lncRNA NEAT1的表达显著升高,miR-206的表达显著降低(P<0.05)。转染si-lncRNA NEAT1或miR-206 mimics处理缺氧复氧H9c2细胞,细胞存活率显著升高,MDA、ROS含量以及LDH活性显著降低,cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9蛋白的表达显著降低,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。lncRNA NEAT1靶向miR-206并负调控miR-206表达。抑制miR-206部分逆转沉默lncRNA NEAT1对缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化损伤和凋亡的影响(P<0.05)。结论沉默lncRNA NEAT1通过上调miR-206可减轻缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化应激损伤和细胞凋亡,进而发挥心肌保护作用。 展开更多
关键词 缺氧复氧 心肌细胞 氧化应激损伤 细胞凋亡 lncRNA NEAT1 miR-206
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瓜蒌皮提取物对缺氧/复氧损伤H9c2心肌细胞的保护作用及其机制研究 被引量:14
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作者 楚冬海 张振秋 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第8期1072-1078,共7页
目的:研究瓜蒌皮提取物对缺氧/复氧损伤H9c2心肌细胞的保护作用及其机制。方法:以采用连二亚硫酸钠(Na_2S_2O_4)为化学缺氧剂,建立大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,筛选不同浓度Na_2S_2O_4(0.625~10 mmol/L)和不同缺氧时间(10~60m... 目的:研究瓜蒌皮提取物对缺氧/复氧损伤H9c2心肌细胞的保护作用及其机制。方法:以采用连二亚硫酸钠(Na_2S_2O_4)为化学缺氧剂,建立大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,筛选不同浓度Na_2S_2O_4(0.625~10 mmol/L)和不同缺氧时间(10~60min)、复氧时间(2~8 h)的造模条件,以及瓜蒌皮提取物给药浓度(12.5~400μg/mL)。将细胞分为正常组、模型组、瓜蒌皮提取物不同剂量组(即TPE低、中、高剂量组,25、50、100μg/mL)和阳性对照组(槲皮素,25μmol/L),加入相应药物进行预处理24 h后,再建立缺氧/复氧损伤模型。采用MTT法检测各组细胞存活率;采用酶联免疫吸附法检测细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;采用流式细胞术观察细胞凋亡情况;采用Western blotting法检测细胞中Bax、Bcl-2的蛋白表达水平。结果:心肌细胞缺氧/复氧损伤造模条件为Na_2S_2O_4造模浓度2.5 mmol/L,缺氧时间30 min,复氧时间4 h;12.5~400μg/mL的瓜蒌皮提取物对细胞均无毒性。分组处理后结果显示,与空白组比较,模型组细胞存活率显著降低、凋亡率显著升高,细胞中CK-MB、LDH、MDA水平均显著升高,SOD水平显著降低,Bax的蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值均显著升高,Bcl-2的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,瓜蒌皮提取物各剂量组细胞上述变化均被逆转(P<0.05或P<0.01)。结论:瓜蒌皮提取物对缺氧/复氧损伤心肌细胞具有一定的保护作用;其机制可能与抑制细胞中脂质过氧化物的增加、提高细胞清除活性氧自由基的能力、上调Bcl-2/下调Bax蛋白表达等,从而抑制细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 瓜蒌皮 连二亚硫酸钠 缺氧/复氧损伤 心肌细胞 机制
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钙拮抗剂对缺氧/复氧心肌细胞早期生长反应基因的作用及抗损伤的研究 被引量:13
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作者 郑付春 黄展勤 石刚刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期777-781,共5页
目的观察钙离子拮抗剂维拉帕米、地尔硫卓和硝苯地平对大鼠缺氧/复氧心肌细胞早期生长反应基因(Egr-1)及抗细胞损伤的作用。方法取生长d 5~6的大鼠心肌细胞分为对照组、缺氧/复氧(H/R)组、DMSO组、维拉帕米(2μmol.L-1)组、地尔硫卓(10... 目的观察钙离子拮抗剂维拉帕米、地尔硫卓和硝苯地平对大鼠缺氧/复氧心肌细胞早期生长反应基因(Egr-1)及抗细胞损伤的作用。方法取生长d 5~6的大鼠心肌细胞分为对照组、缺氧/复氧(H/R)组、DMSO组、维拉帕米(2μmol.L-1)组、地尔硫卓(10μmol.L-1)组和硝苯地平(10μmol.L-1)组,除对照组外其他组制作心肌细胞H/R损伤模型。测定肌酸激酶、乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶及丙二醛的变化,观察心肌细胞损伤情况;RT-PCR方法检测培养心肌细胞中Egr-1mRNA表达水平;Western blot方法检测培养心肌细胞中Egr-1蛋白的表达水平。结果与H/R组相比,维拉帕米组、地尔硫卓组和硝苯地平组Egr-1mRNA及蛋白表达明显减少(P<0.05),心肌细胞损伤程度明显减弱(P<0.01)。结论维拉帕米、地尔硫卓和硝苯地平均可抑制Egr-1的表达,减轻H/R心肌细胞的损伤,这可能是钙离子拮抗剂保护心肌细胞H/R损伤的共同机制之一。 展开更多
关键词 心肌细胞 缺氧/复氧损伤 早期生长反应基因-1 维拉帕米 地尔硫卓 硝苯地平
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SD鼠未成熟心肌细胞缺氧/复氧期c-fos,c-myc mRNA的表达 被引量:9
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作者 康进朝 刘维永 +1 位作者 蔡振杰 李彤 《第四军医大学学报》 2000年第5期586-588,共3页
目的 研究未成熟心肌细胞缺氧 /复氧期间 c- fos,c-myc的表达 .方法 建立 SD大鼠未成熟心肌细胞原代培养及缺氧 /复氧模型 ,应用原位分子杂交技术 ,观察 c- fos,c- myc在心肌细胞核内的表达 .结果 未成熟心肌细胞在缺氧前 c-fos,c- m... 目的 研究未成熟心肌细胞缺氧 /复氧期间 c- fos,c-myc的表达 .方法 建立 SD大鼠未成熟心肌细胞原代培养及缺氧 /复氧模型 ,应用原位分子杂交技术 ,观察 c- fos,c- myc在心肌细胞核内的表达 .结果 未成熟心肌细胞在缺氧前 c-fos,c- myc m RNA无表达 ,对照 ( )组和 ( )组 c- fos,c- mycm RNA在缺氧 12 0 min开始表达 ,复氧 6 0 min表达程度进一步升高 .牛磺酸保护组 ( 组 )在缺氧 12 0 min时 c- fos,c- mycm RNA为阴性表达 ,在复氧 6 0 min时仅有弱阳性表达 .结论  c- fos,c- myc m RNA表达程度与心肌细胞损伤程度以及心肌细胞内游离钙浓度的变化密切相关 ,c- fos,c- myc基因表达可能对心肌细胞的损伤。 展开更多
关键词 原癌基因 心肌细胞 缺氧 复氧损伤 C-FOS C-MYC
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PI3K/Akt信号通路在瓜蒌皮保护心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用 被引量:13
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作者 楚冬海 张振秋 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第4期220-225,共6页
目的研究PI3K/Akt信号通路在瓜蒌皮保护心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用。方法以2.5 mmol/L Na2S2O4诱导心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,实验分为正常组、模型组、瓜蒌皮提取物组及抑制剂组。应用MTT法检测细胞活力;流式细胞术观察细胞... 目的研究PI3K/Akt信号通路在瓜蒌皮保护心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用。方法以2.5 mmol/L Na2S2O4诱导心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,实验分为正常组、模型组、瓜蒌皮提取物组及抑制剂组。应用MTT法检测细胞活力;流式细胞术观察细胞凋亡情况;Western Blot测定Akt、p-Akt(Ser 473)、Bax、Bcl-2的蛋白表达水平。结果与模型组相比,瓜蒌皮提取物预处理24 h后能改善心肌细胞形态,明显提高心肌细胞活力。瓜蒌皮提取物能促进Akt、p-Akt(Ser 473)及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制促凋亡蛋白Bax的表达,减少心肌细胞凋亡。PI3K抑制剂LY294002与瓜蒌皮提取物联合处理后,逆转了瓜蒌皮提取物对心肌细胞的上述作用,导致细胞凋亡率上升。结论瓜蒌皮提取物可能通过激活PI3K/Akt信号通路改善缺氧/复氧损伤诱导的心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 瓜蒌皮 连二亚硫酸钠 缺氧/复氧损伤 心肌细胞 PI3K/AKT
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