双酶法制备马鹿茸降血糖肽工艺优化及其对α-葡萄糖苷酶的抑制效果 被引量：22

1

作者 包美丽 杨添植 +1 位作者 张立钢 赵玉红 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第6期88-95,共8页

为探索制备马鹿茸降血糖肽的最佳工艺条件,以α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,从碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶中筛选出两种酶,根据其体外降血糖效果确定酶的作用顺序,再以水解度、α-葡萄糖苷酶抑制率和蛋白质回收率为指标... 为探索制备马鹿茸降血糖肽的最佳工艺条件,以α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,从碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶中筛选出两种酶,根据其体外降血糖效果确定酶的作用顺序,再以水解度、α-葡萄糖苷酶抑制率和蛋白质回收率为指标进行单因素试验和正交试验,优化降血糖肽制备工艺条件。结果表明:碱性蛋白酶和风味蛋白酶比中性蛋白酶和胰蛋白酶更适合用于制备马鹿茸降血糖肽。采用碱性蛋白酶-风味蛋白酶顺序对马鹿茸进行水解,所得酶解产物的α-葡萄糖苷酶抑制率、蛋白质回收率和水解度较高,分别为21.11%、39.12%、19.88%。通过单因素试验和正交试验确定双酶酶解最佳工艺条件为先用碱性蛋白酶在p H 8.0、60℃、底物质量分数12%、加酶量5 000 U/g条件下酶解3 h,再用风味蛋白酶于p H 6.5、45℃、底物质量分数5%、加酶量6 000 U/g条件下酶解1 h。双酶分步水解终产物的α-葡萄糖苷酶抑制率受质量浓度的影响,当质量浓度为3 mg/m L时,α-葡萄糖苷酶抑制率可达94.09%,IC50值为1.82 mg/m L。碱性蛋白酶-风味蛋白酶双酶分步水解马鹿茸可获得高α-葡萄糖苷酶抑制率的降血糖肽。 展开更多

关键词 马鹿茸 酶解 降血糖肽

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响应曲面法优化酶解豆粕蛋白制备降糖肽的工艺 被引量：9

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作者 余敏 黄晶晶 +4 位作者 付瑞燕 谢宁宁 殷俊峰 鄢嫣 张福生 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期108-113,共6页

采用响应曲面法(Response Surface Methodology,RSM)对豆粕蛋白酶解制备降糖肽的工艺进行优化。在单因素实验基础上,选择初始pH、酶解温度和酶解时间,进行三因素三水平的Box-Behnken实验设计,采用响应曲面法分析3个因素对酶解产物抑制... 采用响应曲面法(Response Surface Methodology,RSM)对豆粕蛋白酶解制备降糖肽的工艺进行优化。在单因素实验基础上,选择初始pH、酶解温度和酶解时间,进行三因素三水平的Box-Behnken实验设计,采用响应曲面法分析3个因素对酶解产物抑制活性响应值的影响。结果表明,最佳工艺条件为初始pH9.5,酶解温度49.0℃,酶解时间5.5 h,料液比1∶20(w:v),加酶量2%(w:w)。此条件下,酶解产物的α-葡萄糖苷酶的实际抑制率为14.82%±0.23%,而预测抑制率为14.80%。研究结果为豆粕资源的开发提供了新的思路。 展开更多

关键词 豆粕降糖肽 酶解 响应曲面法

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超声预处理对麦胚蛋白结构的影响 被引量：6

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作者 颜辉 张琦 +4 位作者 聂旭东 朱胜虎 余永建 熊孟 江明珠 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2017年第4期13-17,共5页

采用超声波对麦胚蛋白进行不同时间的预处理,并利用荧光、拉曼光谱分析溶液中蛋白的结构,红外光谱分析冻干后蛋白结构。结果显示,超声预处理会影响酶解法制备降血糖肽的活性,30min时活性最高。荧光光谱分析提示超声预处理能够引起麦胚... 采用超声波对麦胚蛋白进行不同时间的预处理,并利用荧光、拉曼光谱分析溶液中蛋白的结构,红外光谱分析冻干后蛋白结构。结果显示,超声预处理会影响酶解法制备降血糖肽的活性,30min时活性最高。荧光光谱分析提示超声预处理能够引起麦胚蛋白中色氨酸残基由疏水区向亲水区转移,但蛋白结构未发生重大破坏。拉曼光谱分析超声预处理30min时对蛋白结构的影响最大,β-折叠含量降低最多。红外光谱分析显示蛋白结构随时间变化,在35 min时变化最大,α-螺旋含量显著降低,无规则卷曲含量显著升高。拉曼和红外光谱提供的信息比荧光丰富,拉曼光谱能够提供更准确的水溶液酶催化体系中的底物结构,对于蛋白的酶解反应更有指导意义。 展开更多

关键词 超声预处理 麦胚蛋白 降血糖肽 荧光光谱 拉曼光谱 红外光谱

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响应面法优化超声辅助酶解制备大豆降血糖肽的研究 被引量：4

4

作者 段双庚 张佳鑫 江明珠 《食品工程》 2020年第1期20-23,50,共5页

超声预处理大豆蛋白,响应面分析(RSA)试验优化酶法制备新型降血糖肽。以酶解产物对α-葡萄糖苷酶的抑制率为评价指标,筛选蛋白酶;在单因素试验的基础上,对超声预处理工艺及酶解过程进行RSA试验。实验结果表明,最佳蛋白水解酶为胰蛋白酶... 超声预处理大豆蛋白,响应面分析(RSA)试验优化酶法制备新型降血糖肽。以酶解产物对α-葡萄糖苷酶的抑制率为评价指标,筛选蛋白酶;在单因素试验的基础上,对超声预处理工艺及酶解过程进行RSA试验。实验结果表明,最佳蛋白水解酶为胰蛋白酶;经过RSA优化得到最佳条件为:酶解时间22.0 min,加酶量6416.61 U/g,酶解底物浓度2.10%;超声预处理时间20.9 min,超声功率245.9 W,超声底物浓度6.27%,在此条件下大豆蛋白源多肽的抑制率64.79%,多肽质量浓度4.15 mg/mL。RSA试验优化后,多肽的α-葡萄糖苷酶抑制率比相同条件未使用超声预处理的提高了19.01%。 展开更多

关键词 超声波 预处理 大豆蛋白 降血糖肽 响应面分析

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溶剂法制备降血糖肽固体分散体及其稳定性 被引量：2

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作者 陈百科 李慧 +1 位作者 金素莱曼 包海蓉 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第5期956-962,共7页

以降血糖肽为模型,尤特奇L-100(EL-100)为载体,羟丙基甲基纤维素(HPMC)为释放调节剂,采用溶剂法制备了降血糖肽固体分散体,并对其稳定性和体外释放进行了研究。以降血糖肽固体分散体2h的累积释放率和二肽基肽酶-Ⅳ(DPP-Ⅳ)抑制率为评价... 以降血糖肽为模型,尤特奇L-100(EL-100)为载体,羟丙基甲基纤维素(HPMC)为释放调节剂,采用溶剂法制备了降血糖肽固体分散体,并对其稳定性和体外释放进行了研究。以降血糖肽固体分散体2h的累积释放率和二肽基肽酶-Ⅳ(DPP-Ⅳ)抑制率为评价指标,对肠溶载体和释放调节剂配比进行了优化,利用SEM、FTIR和TEM对降血糖肽固体分散体进行了表征,并考察了降血糖肽固体分散体不同储存时间和储存温度下的稳定性。结果表明,在m(降血糖肽)∶m(EL-100)∶m(HPMC)=1∶2∶0.2条件下制备的降血糖肽固体分散体2h的累积释放率达到93.54%,且DPP-Ⅳ抑制率具有较高水平。SEM和TEM分析表明,降血糖肽分散在固体分散体中;FTIR表明,降血糖肽二级结构的构象发生了变化。降血糖肽固体分散体能显著增强降血糖肽的稳定性,常温(25℃)储存10 d后累积释放率仍高达90.32%,在高温环境下也表现出较强的稳定性。 展开更多

关键词 降血糖肽 固体分散技术 累积释放率 稳定性 DPP-Ⅳ抑制率 医药原料

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苦瓜蛋白酶抑制剂对苦瓜降糖多肽活性的保护作用 被引量：3

6

作者 付中平 刘红雨 +3 位作者 鲁岚 陈子君 周吉燕 王富军 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1259-1262,共4页

目的探讨苦瓜蛋白酶抑制剂对苦瓜降糖多肽口服降糖活性的保护作用。方法单次iv四氧嘧啶80mg/kg给药建立糖尿病小鼠模型。以降糖多肽(20、10、5 mg/kg)iv给药,于0.5、2、4、68、h尾静脉取血测定空腹血糖;测定在不同降糖多肽与蛋白酶抑制... 目的探讨苦瓜蛋白酶抑制剂对苦瓜降糖多肽口服降糖活性的保护作用。方法单次iv四氧嘧啶80mg/kg给药建立糖尿病小鼠模型。以降糖多肽(20、10、5 mg/kg)iv给药,于0.5、2、4、68、h尾静脉取血测定空腹血糖;测定在不同降糖多肽与蛋白酶抑制剂配伍剂量下,ig给药21 d后的空腹血糖值;以降糖作用显著的配伍比例,ig给药7、142、1 d和停止给药7 d后测定血糖。结果降糖多肽于iv给药4 h后,高、中、低3个剂量均表现出显著降血糖效应(P<0.05、0.01);降糖多肽与抑制剂(300+300)(、100+100)、(100+50)(、100+25)mg/kg 4个配伍剂量组ig给药21 d后表现出显著降血糖效应,且以后两个剂量组ig给药的降血糖作用为更佳,停药7 d后给药组血糖值与模型组无显著差异。结论苦瓜蛋白酶抑制剂在ig给药过程中能够使苦瓜降糖多肽免遭消化系统的蛋白水解酶破坏而起保护作用,维持其降血糖药效,该作用与两者间的配伍剂量有关。 展开更多

关键词 苦瓜 降糖多肽 蛋白酶抑制剂 糖尿病

原文传递

响应面法优化辣木籽降糖肽的酶法制备工艺及其体外活性评价 被引量：3

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作者 魏光强 赵娜 +3 位作者 范尧珠 王雪峰 黄艾祥 田洋 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第24期136-143,共8页

为提升辣木籽资源利用度,采用酶法制备辣木籽降糖肽。以蛋白水解度和α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,通过单因素实验筛选和响应面法优化最佳的酶解时间、液料比、酶解pH、酶添加量和酶解温度,通过超滤粗分离酶解液制备分子量<3 kDa的降糖... 为提升辣木籽资源利用度,采用酶法制备辣木籽降糖肽。以蛋白水解度和α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,通过单因素实验筛选和响应面法优化最佳的酶解时间、液料比、酶解pH、酶添加量和酶解温度,通过超滤粗分离酶解液制备分子量<3 kDa的降糖肽,并通过MTT法分析其对人肝癌细胞(HepG2细胞)的抑制作用。结果表明,酶法制备辣木籽降糖肽的最佳酶解时间为4.6 h、液料比40.5:1、pH为8.3、酶添加量5.5%、温度55℃,该条件下酶解产物的α-葡萄糖苷酶抑制率为23.62%±0.14%。超滤组分中分子量<3 kDa组分的α-葡萄糖苷酶抑制率为IC_(50)值为5.56 mg/mL,当其质量浓度为300μg/mL时,作用于HepG2细胞48 h后能显著抑制HepG2细胞的增殖(P<0.05)。研究可为辣木籽降糖肽的进一步分离纯化奠定基础。 展开更多

关键词 辣木籽 降糖肽 酶法制备 工艺优化 α-葡萄糖苷酶抑制率 人肝癌细胞抑制

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麦胚降血糖肽的分离纯化及鉴定 被引量：9

8

作者 颜辉 张琦 +6 位作者 江明珠 朱胜虎 聂旭东 余永建 张佳鑫 贾俊强 熊孟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第20期92-98,共7页

建立麦胚降血糖肽的分离纯化方法及鉴定活性多肽的结构组成。采用胰蛋白酶酶解麦胚蛋白,得到降血糖多肽,并进行降血糖动物实验。超滤获得高活性组分,离子交换吸附实验选择最佳的树脂,并对麦胚降血糖肽进行离子交换吸附分离,SephadexG-25... 建立麦胚降血糖肽的分离纯化方法及鉴定活性多肽的结构组成。采用胰蛋白酶酶解麦胚蛋白,得到降血糖多肽,并进行降血糖动物实验。超滤获得高活性组分,离子交换吸附实验选择最佳的树脂,并对麦胚降血糖肽进行离子交换吸附分离,SephadexG-25和SephadexG-15分离,再经过反相高效液相色谱(reverse phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)分离高活性成分。最后采用高效液相色谱-电喷雾-质谱(HPLC-electrospray ionization-massspectrometry,HPLC-ESI-MS)鉴定活性多肽的结构组成。结果显示酶解麦胚蛋白对α-葡萄糖苷酶的抑制性IC_(50)为10.98 mg/mL,能够缓解糖尿病小鼠的症状。超滤获得分子质量小于5 kDa的高活性组分,IC50为1.60 mg/mL。732型阳离子交换树脂的分离效果最好,2.5%氨水的洗脱率为98.13%,通过动态离子交换吸附分离后,活性显著提高,IC_(50)为0.30 mg/mL。通过SephadexG-25和SephadexG-15分离得到高活性组分,经RP-HPLC分离得到8个组分(峰),其中1号峰的活性和含量都最高,IC_(50)为0.098 mg/mL。HPLC-ESI-MS结果显示m/z 274.45的丰度比较高,经离子碎片拼接,共有7种多肽,其中二肽有1种,三肽有6种。本研究对于开发具有降血糖功效的新型功能性食品有一定的作用。 展开更多

关键词 麦胚 降血糖多肽 Α-葡萄糖苷酶 分离纯化 结构鉴定 动物实验

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降糖肽的制备、生物学效应及其构效关系研究进展 被引量：8

9

作者 张廷新 李富强 +2 位作者 张楠 朱丽萍 颜世敢 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第8期433-442,共10页

糖尿病是一个严重的全球性健康问题,其发病率近年来呈上升态势。目前证实已有多种药物可有效治疗糖尿病,但多数药物存在毒副作用。因此,研发出安全有效的降糖药物已经成为全世界关注的焦点。降糖肽具有降血糖作用且毒副作用较小,在功能... 糖尿病是一个严重的全球性健康问题,其发病率近年来呈上升态势。目前证实已有多种药物可有效治疗糖尿病,但多数药物存在毒副作用。因此,研发出安全有效的降糖药物已经成为全世界关注的焦点。降糖肽具有降血糖作用且毒副作用较小,在功能食品和药品领域具有开发价值,应用前景广阔。本文综述了近年来对降糖肽的制备、生物学效应以及构效关系等方面的研究进展,并对降糖肽的研究进行了展望,以期为降糖肽的开发利用及相关产品的深加工提供参考。 展开更多

关键词 糖尿病 降糖肽 制备 生物学效应 构效关系

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响应面法优化香榧降血糖肽制备工艺 被引量：2

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作者 薛加雯 王鹏 +5 位作者 骆晓慧 吴莎萍 朱巧楠 何志平 叶伟华 吴峰华 《中国粮油学报》 CSCD 北大核心 2023年第7期148-154,共7页

以香榧饼粕为原料,α-葡萄糖苷酶抑制率和蛋白水解度为主要考察指标,通过单因素实验和响应面法优化香榧降血糖肽的制备工艺。结果表明,香榧降血糖肽的最优酶解工艺参数为:碱性蛋白酶添加量10440.0 U/g,酶解pH值10.0,酶解温度46.0℃,酶... 以香榧饼粕为原料,α-葡萄糖苷酶抑制率和蛋白水解度为主要考察指标,通过单因素实验和响应面法优化香榧降血糖肽的制备工艺。结果表明,香榧降血糖肽的最优酶解工艺参数为:碱性蛋白酶添加量10440.0 U/g,酶解pH值10.0,酶解温度46.0℃,酶解时间5.2 h,此时酶解制得蛋白水解度为24.38%的香榧降血糖肽,α-葡萄糖苷酶抑制率为59.11%。 展开更多

关键词 香榧饼粕 酶解工艺 降血糖肽 α-葡萄糖苷酶抑制率

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马氏珍珠贝软体酶法制备降糖肽的工艺优化及肽段分析 被引量：3

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作者 李佳芸 王欣之 +3 位作者 韦源青 卞慧敏 刘睿 吴皓 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第22期202-211,共10页

目的:以二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl peptidase,DPP-Ⅳ)抑制率和葡萄糖消耗量为指标优化马氏珍珠贝软体的酶解工艺,并对酶法制备的降糖肽进行分析。方法:以人肝癌细胞(HepG-2)胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗量、体外二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl... 目的:以二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl peptidase,DPP-Ⅳ)抑制率和葡萄糖消耗量为指标优化马氏珍珠贝软体的酶解工艺,并对酶法制备的降糖肽进行分析。方法:以人肝癌细胞(HepG-2)胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗量、体外二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl peptidase,DPP-Ⅳ)抑制率为评价指标,比较筛选了酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶对马氏珍珠贝软体的酶解效果,通过单因素及正交试验分析酶解温度、料液比、加酶量、酶解时间等因素对酶解物降糖活性的影响,确定最佳酶解工艺,以液相串联质谱(Nano LC-MS/MS)分析酶解物中肽类物质组成。结果:酸性蛋白酶酶解的产物葡萄糖消耗量和DPP-Ⅳ抑制率优于其他种类蛋白酶,马氏珍珠贝软体制备降糖肽的最佳酶解条件为:45℃、3 h、料液比1:3.5(w:w)、加酶量1000 U/g,在此条件下的葡萄糖消耗量为37.53%、DPP-Ⅳ抑制率为74.21%。最佳工艺制备的马氏珍珠贝软体酶解物中93.88%的肽段分子量低于2000 Da,22.63%的肽段为疏水性肽段,74.92%的肽段N端至少有含有一个疏水性氨基酸。结论:本研究酶法制备的马氏珍珠贝软体降糖肽可通过抑制DPP-Ⅳ的活性及减少胰岛素抵抗发挥降糖作用,对功能食品的研发具有一定的指导意义。 展开更多

关键词 马氏珍珠贝软体 酶解 降血糖肽 葡萄糖消耗量 二肽基肽酶-Ⅳ抑制率

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动物源性降糖肽的研究进展 被引量：1

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作者 马昕悦 刘鸣雨 +1 位作者 李熔 薛勇 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第22期438-444,共7页

一些食源性活性肽降糖效果显著,具有开发成功能性食品的潜力,在世界范围内引起广泛关注。其中广泛存在于食物蛋白水解物中的动物源性活性肽具有较好的降血糖特性,其潜在机制包括抑制α-葡萄糖苷酶或二肽基肽酶-4(dipeptidyl peptidase-4... 一些食源性活性肽降糖效果显著,具有开发成功能性食品的潜力,在世界范围内引起广泛关注。其中广泛存在于食物蛋白水解物中的动物源性活性肽具有较好的降血糖特性,其潜在机制包括抑制α-葡萄糖苷酶或二肽基肽酶-4(dipeptidyl peptidase-4,DPP-4)等。本文介绍了动物源性降糖肽的制备方法、作用机理及降糖效果的评价方法,重点综述了来源于畜禽肉、鱼类、血液、乳类和蛋类等动物性食物的降糖肽的现有研究成果,为预防和辅助治疗糖尿病及相关功能性食品的开发提供了理论依据。 展开更多

关键词 动物源性降糖肽 2型糖尿病 二肽基肽酶-4(DPP-4) Α-葡萄糖苷酶

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蛋白多肽类降糖药物口服递送载体的研究现状与临床应用进展

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作者 杨甜甜 王奥华 +1 位作者 俞淼荣 甘勇 《药学进展》 CAS 2022年第4期255-269,共15页

糖尿病是一种常见的慢性疾病,严重影响着人类健康和生活质量。与皮下注射相比,口服递送蛋白多肽类降糖药物如胰岛素是更理想的糖尿病治疗方案。然而,体内存在着多重生理屏障,极大地限制了药物的口服吸收。近年来,基于载体材料和制剂技... 糖尿病是一种常见的慢性疾病,严重影响着人类健康和生活质量。与皮下注射相比,口服递送蛋白多肽类降糖药物如胰岛素是更理想的糖尿病治疗方案。然而,体内存在着多重生理屏障,极大地限制了药物的口服吸收。近年来,基于载体材料和制剂技术的快速发展,多种口服药物递送载体被开发出来,有望解决上述问题。总结口服药物载体在体内面临的共性递药屏障,重点阐述限制蛋白多肽类降糖药物口服递送的特殊屏障;进一步综述目前相关领域的研究现状以及临床应用进展,并对其发展进行展望,以期为蛋白多肽类降糖药物口服递送载体的理性化设计提供新的视角和思路。 展开更多

关键词 蛋白多肽类降糖药物 口服递送 递药屏障 药物载体 临床应用

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