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骨桥蛋白-CD44配体受体反应对人膝骨关节炎软骨细胞透明质酸表达的影响 被引量:5
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作者 袁宇豪 刘擎 +1 位作者 张方杰 罗伟 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1015-1023,共9页
目的:通过干预体外培养人膝骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞中的骨桥蛋白(osteopontin,OPN)与CD44配体受体反应,观察其对软骨细胞透明质酸(hyaluronic acid,HA)表达的影响。方法:分别从膝OA患者和恶性肿瘤患者的膝关节软骨组织中获... 目的:通过干预体外培养人膝骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞中的骨桥蛋白(osteopontin,OPN)与CD44配体受体反应,观察其对软骨细胞透明质酸(hyaluronic acid,HA)表达的影响。方法:分别从膝OA患者和恶性肿瘤患者的膝关节软骨组织中获取OA软骨细胞和正常软骨细胞,对正常软骨细胞和OA软骨细胞进行检测,然后对OA软骨细胞进行干预分析。将OA软骨细胞分为如下4组:阴性对照组,用完全培基正常培养,不加任何干预试剂;OPN干预组,以人重组OPN(recombinant human OPN,rhOPN)干预24 h;CD44阻断组,预先采用CD44受体特异性拮抗剂干预软骨细胞1 h以阻断OPN-CD44结合后,再加入rhOPN干预23 h;CD44同型组,预先采用CD44干预软骨细胞1 h后,加入rhOPN干预23 h。此外,在OPN-CD44轴线的研究中,OA软骨细胞又分为OA阴性对照组、沉默OPN(si-OPN)干预组、rhOPN干预组和rhOPN+CD44抗体组(rhOPN+CD44 Ab组)。采用蛋白质印迹法、real-time PCR和ELISA分别对OPN,CD44,透明质酸合酶(hyaluronate synthase,HAS)和HA的表达水平进行检测。结果:OA软骨细胞中OPN,CD44和HAS1的蛋白质表达水平及HA的分泌水平均高于正常软骨细胞;与OPN干预组相比,CD44阻断组HAS1,HAS2,HAS3和HA的表达水平均降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);与OPN干预组相比,CD44同型组HAS1,HAS2,HAS3和HA的表达水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。对OPN-CD44轴线的研究结果显示:与OA阴性对照组相比,rhOPN干预组CD44的表达降低,但HAS1的蛋白质和m RNA水平却显著上调,差异均有统计学意义(均P<0.05);与OA阴性对照组相比,si-OPN干预组CD44的表达上调,但HAS1的蛋白质和mRNA水平却受到抑制,差异均有统计学意义(均P<0.05);与OA阴性对照组相比,rhOPN+CD44 Ab组HAS1的蛋白质和mRNA水平也受到显著抑制,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:OA软骨细胞内OPN对HAS1的表达具有促进作用,且OPN是通过与CD44配体受体反应刺激软骨细胞HA 展开更多
关键词 骨桥蛋白 CD44 软骨细胞 透明质酸 透明质酸合酶 膝骨关节炎
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Correlation Between Hyaluronic Acid,Hyaluronic Acid Synthase And Human Renal Clear Cell Carcinoma 被引量:2
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作者 Jian-liang Cai Ming Li Yan-qun Na 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2011年第1期59-63,共5页
Objective:To study the correlation between hyaluronic acid(HA),hyaluronic acid synthase(HAS) and human renal clear cell carcinoma(RCCC).Methods:The expression of three HAS isoforms' gene and HA in 93 RCCC tis... Objective:To study the correlation between hyaluronic acid(HA),hyaluronic acid synthase(HAS) and human renal clear cell carcinoma(RCCC).Methods:The expression of three HAS isoforms' gene and HA in 93 RCCC tissues,27 nephridial tissues by the side of RCCC from two hospitals were measured with Real-Time RT-PCR、Western Blot and immunohistochemical methods and analyzed.Results:All RCCC and adjacent normal tissues expressed three HASs' mRNA protein;at the mRNA level,both RCCC and adjacent normal tissues,expressed more HAS3 than HAS1 or HAS2,their differences were statistically significant(all P values 0.05);but,at the protein level,all HAS isoforms presented the equivalent expression.Compared with the adjacent non-neoplastic kidney tissues,the expression of all HAS isoforms' mRNA in RCCC tissues were increased evidently and their differences were significant(all P values 0.0001);but at the protein level,only the expression of HAS3 increased evidently(P=0.022).In all adjacent normal tissues,more than 80% renal tubular cells strongly expressed HA,however,only the minority RCCC cases(16/93) presented weakly positive HA staining in few cancer nests(5%-30%),the difference were significant(P0.0001).In RCCC tissues subgrouped according to clinical stage,pathological grade,lymphatic metastasis or not and distant metastasis or not,the HASs' mRNA protein differential expression all had no statistical significance(all P values 0.05).Conclusion:Different from other malignancy,HA and HASs(except for HAS3) may not play important roles in the biological progress of human RCCC. 展开更多
关键词 Renal clear cell carcinoma hyaluronic acid hyaluronic acid synthase GENE
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膀胱移行细胞癌组织中透明质酸合成酶基因家族差异表达的临床意义 被引量:2
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作者 蔡建良 李鸣 那彦群 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期121-125,共5页
目的研究透明质酸合成酶(HAS)家族基因在膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中的差异表达情况,并探讨其潜在的临床意义。方法运用实时定量聚合酶链反应(PCR)方法,检测78例不同恶性程度的BTCC组织中各HAS亚型mRNA的表达。运用Western blo... 目的研究透明质酸合成酶(HAS)家族基因在膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中的差异表达情况,并探讨其潜在的临床意义。方法运用实时定量聚合酶链反应(PCR)方法,检测78例不同恶性程度的BTCC组织中各HAS亚型mRNA的表达。运用Western blot方法,检测78例BTCC组织和12例正常人膀胱黏膜中各HAS亚型的蛋白表达。分析BTCC组织中各HAS亚型mRNA和蛋白表达与临床病理特征的关系。结果78例BTCC组织中,HAS2、HAS2和HAS3的mRNA中位表达水平分别为0.0123、0.0353和0.0717,三者差异有统计学意义(P〈0.01)。12例正常膀胱黏膜组织未见任何HAS亚型的蛋白表达。78例BTCC组织中,HAS2、HAS2和HAS3的蛋白表达量分别为0.5685±0.2510、1.005±0.5159和0.5040±0.3604,其中HASl和HAS2、HAS2和HAS3的蛋白表达差异有统计学意义(P=0.004,P=0.001),而HASl和HAS3的蛋白表达差异无统计学意义(P=0.654)。HASlmRNA的表达与肿瘤发病、T分期、病理分级有关,HAS2mRNA的表达与肿瘤大小、肿瘤数量、肿瘤发病、T分期、病理分级有关,HAS3mRNA的表达水平与各临床病理特征均无关。HASl蛋白表达与肿瘤发病、T分期和病理分级有关,HAS2蛋白的表达与肿瘤大小有关,HAS3蛋白表达与各临床病理特征无关。结论膀胱移行细胞癌组织中,3种HAS亚型均明显异常高表达,提示透明质酸作为一种尿源性膀胱癌标记物比较可靠。相对于HASl和HAS3,HAS2在BTCC的发生、发展过程中可能具有更为重要的作用。 展开更多
关键词 膀胱移行细胞癌 透明质酸 透明质酸合成酶
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透明质酸的生物合成及其代谢工程的研究进展
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作者 马艳琴 邱益彬 +1 位作者 李莎 徐虹 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期252-262,共11页
透明质酸(hyaluronic acid,HA)是广泛存在于生物体内的功能性糖胺高分子聚合物,在日化、医疗和食品领域应用前景广阔。随着基因工程与代谢工程等合成生物学技术的发展,人们对HA的生物合成过程和机理解析越发深入的同时,也伴随一些新的... 透明质酸(hyaluronic acid,HA)是广泛存在于生物体内的功能性糖胺高分子聚合物,在日化、医疗和食品领域应用前景广阔。随着基因工程与代谢工程等合成生物学技术的发展,人们对HA的生物合成过程和机理解析越发深入的同时,也伴随一些新的挑战来临。该综述从分子生物学角度总结了HA的关键合成酶基因及合成途径,对不同来源的HA合成酶进行了氨基酸序列比对分析,并详细描述了HA在常用微生物宿主中生产的安全性、底物不平衡性、发酵低溶氧性等瓶颈问题及其相应的合成生物学策略开发,从而归纳出了目前微生物中高产HA的有效策略,为进一步推动HA的绿色生物制造提供了重要的科学依据和理论支撑。 展开更多
关键词 透明质酸 透明质酸合成酶 基因工程 代谢工程 枯草芽孢杆菌 谷氨酸棒状杆菌
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过表达核苷二磷酸激酶对透明质酸的产量和相对分子质量的影响
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作者 虞菊萍 刘玮 +2 位作者 叶萌 唐东洋 高向东 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期232-238,共7页
为了考察核苷二磷酸激酶(NDK)对透明质酸合成过程的影响,将核苷二磷酸激酶基因(ndk)和透明质酸合成酶基因在重组枯草芽孢杆菌细胞内共同进行过表达,成功构建了两株工程菌株Hp8tg及Pn8tg,均获得了均一相对分子质量透明质酸(HA)。通过响... 为了考察核苷二磷酸激酶(NDK)对透明质酸合成过程的影响,将核苷二磷酸激酶基因(ndk)和透明质酸合成酶基因在重组枯草芽孢杆菌细胞内共同进行过表达,成功构建了两株工程菌株Hp8tg及Pn8tg,均获得了均一相对分子质量透明质酸(HA)。通过响应面分析试验对诱导条件进行了优化,通过单糖组成分析、傅里叶红外光谱分析及核磁共振波谱分析对HA进行了鉴定。ndk过表达使HA产量提高了1.3倍,相对分子质量提高了1.1倍。研究结果表明,核苷二磷酸激酶的过表达可消除尿苷二磷酸(UDP)蓄积对Ⅱ型透明质酸合成酶的抑制作用,从而提高了HA的产量及相对分子质量。此策略可以有效提高HA的产量和相对分子质量,也为其他多糖的制备提供了新的思路。 展开更多
关键词 透明质酸 核苷二磷酸激酶 透明质酸合成酶 尿苷二磷酸 产量 均一相对分子质量 枯草芽孢杆菌
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重组生产透明质酸技术中国专利申请分析
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作者 孙永福 郝建欣 王凤山 《药学研究》 CAS 2013年第12期710-713,731,共5页
本文从相关专利申请的申请数量、申请人分布、申请所处法律状态、专利技术概况等角度,对通过基因工程手段重组生产透明质酸领域的中国专利申请状况进行了分析和概述。
关键词 透明质酸 重组 透明质酸合酶 专利申请
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透明质酸三糖模拟物的高效合成
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作者 魏国华 杜宇国 Khushi L. Matta 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2199-2203,共5页
设计合成了2个透明质酸(HA)模拟物1和2,通过最小基团M eO的引入修饰,模拟天然HA片段的特性,用于透明质酸合成酶(HAS)催化机理与抑制剂的研究.
关键词 透明质酸 透明质酸合成酶 抑制剂 2-萘基甲基(NAP)
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乳房链球菌透明质酸合成酶基因缺失株的构建
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作者 郑六海 吴杰 +2 位作者 李双洁 张金秋 苗晋锋 《畜牧与兽医》 北大核心 2015年第7期21-25,共5页
为构建乳房链球菌(Streptococcus uberis)透明质酸合成酶(has A)基因缺失株,采用PCR方法分别扩增氯霉素抗性基因及乳房链球菌has A基因上游、下游片段并克隆到温敏自杀载体p SET4s中,构建重组载体p EST4s:has A。然后,用电转化方法将p E... 为构建乳房链球菌(Streptococcus uberis)透明质酸合成酶(has A)基因缺失株,采用PCR方法分别扩增氯霉素抗性基因及乳房链球菌has A基因上游、下游片段并克隆到温敏自杀载体p SET4s中,构建重组载体p EST4s:has A。然后,用电转化方法将p EST4s:has A导入乳房链球菌0140J感受态细胞中,通过同源重组获得has A基因敲除突变株。PCR和酶切结果均表明has A基因已被氯霉素抗性基因替换。本研究成功构建了乳房链球菌has A基因缺失株,为进一步探讨has A基因功能及乳房链球菌的致病机理奠定基础。 展开更多
关键词 乳房链球菌 透明质酸合成酶 同源重组 基因敲除
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桃红四物汤对CCl_(4)诱导肝纤维化小鼠模型的干预作用及其机制 被引量:9
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作者 刘旭凌 杨广越 +6 位作者 张玮 孙田甜 马文婷 吴柳 薛冬英 刘成 陶乐 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期2563-2568,共6页
目的探讨桃红四物汤对CCl_(4)诱导肝纤维化小鼠模型的干预作用及其作用机制。方法24只雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组、模型组和桃红四物汤组,每组8只。模型组和桃红四物汤组小鼠腹腔注射10%CCl_(4),第3周开始给予桃红四物汤灌胃给药4周... 目的探讨桃红四物汤对CCl_(4)诱导肝纤维化小鼠模型的干预作用及其作用机制。方法24只雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组、模型组和桃红四物汤组,每组8只。模型组和桃红四物汤组小鼠腹腔注射10%CCl_(4),第3周开始给予桃红四物汤灌胃给药4周,检测肝功能(ALT、AST),观测肝组织病理形态学。实时荧光定量PCR检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、透明质酸合成酶-2(HAS-2)、Ⅰ型胶原(Col1)mRNA的表达,蛋白免疫印迹法检测α-SMA、Col1及HAS-2蛋白的表达。分离小鼠原代肝星状细胞(HSC),应用siRNA沉默HAS-2,检测其对HSC激活的影响。计量资料两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组内进一步两两比较采用SNK或LSD-t检验。结果与正常组相比,模型组血清肝功能指标ALT、AST水平显著升高,桃红四物汤组小鼠血清ALT、AST水平均显著下降(P值均<0.01)。病理学染色显示:模型组炎症细胞浸润明显,增生的胶原纤维形成纤维间隔;桃红四物汤组胶原纤维间隔较疏松及炎症细胞浸润减轻。与模型组相比,桃红四物汤组α-SMA、Col1 mRNA和蛋白的表达水平均显著降低(P值均<0.001)。与正常组比较,模型组肝组织中HAS-2 mRNA表达水平显著升高(t=6.14,P<0.05),桃红四物汤组HAS-2蛋白表达水平(0.29±0.10)较模型组(1.00±0.12)明显减少(t=70.73,P<0.001)。siRNA沉默HAS-2,TGFβ处理后(Si HAS-2+TGFβ组)α-SMA、Col1 mRNA表达水平较NC+TGFβ组显著降低(P<0.01)。结论桃红四物汤通过抑制HAS-2对CCl 4致小鼠纤维化有显著治疗作用。 展开更多
关键词 肝硬化 桃红四物汤 透明质酸合成酶2 小鼠 近交C57BL
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紫笋茶提取液美白及抗衰体外机制初步研究 被引量:4
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作者 方婷欢 霍刚 +2 位作者 马萍 周莹 沈黎玥 《药物生物技术》 CAS 2018年第1期34-38,共5页
紫笋茶作为较为独特的一类小茶种,至今为止在护肤领域未有相应研究报道,前期研究发现其提取液在体外能够抑制酪氨酸酶活性及促进成纤维细胞增殖。为进一步研究紫笋茶提取液是否对黑色素生物合成及转移途径具有相应作用以及其对透明质酸... 紫笋茶作为较为独特的一类小茶种,至今为止在护肤领域未有相应研究报道,前期研究发现其提取液在体外能够抑制酪氨酸酶活性及促进成纤维细胞增殖。为进一步研究紫笋茶提取液是否对黑色素生物合成及转移途径具有相应作用以及其对透明质酸合成的影响。以体外培养的人角质形成细胞(Ha Ca T细胞),人成纤维细胞(HSF细胞),人黑色素瘤细胞(A375细胞)为研究对象,通过Cell-based ELISA、Western blot、细胞免疫组化等实验方法研究及验证相应机制。紫笋茶提取液在适当浓度范围内(0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 g/L)具有抑制黑色素生物合成和转运途径中一系列关键受体表达的作用,尤其浓度为0.6~1.0 g/L时,包括酪氨酸相关蛋白2(TRP-2),黑素细胞黑素皮质素受体1(MC1R),蛋白酶激活受体2(PAR-2),同时发现在适当浓度下(0.8~1.0 g/L)能够促进透明质酸合成酶1(HAS1)的表达。结果表明,紫笋茶提取液在体外水平能够显著的抑制促黑激素与黑素细胞结合、黑色素的生物合成以及转移至角质细胞途径中关键受体,并且能够显著促进天然保湿因子透明质酸的合成,即在体外水平具有一定美白和抗衰作用。 展开更多
关键词 紫笋茶提取液 黑色素 酪氨酸相关蛋白2 蛋白酶激活受体2 黑素细胞黑素皮质素受体1 透明质酸合成酶1 透明质酸
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血清HAS2、GDF3及CEACAM1在乳腺癌患者行根治术前后的变化特征及其与术后切口部位感染、局部复发的相关性分析
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作者 柯贤锋 向辉 李强 《临床和实验医学杂志》 2024年第15期1630-1634,共5页
目的探讨血清透明质酸合成酶2(HAS2)、人生长分化因子3(GDF3)及癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)在乳腺癌患者行根治术前后的变化特征及其与术后切口部位感染、局部复发的相关性。方法回顾性选取商洛市中心医院2020年10月至2022年10... 目的探讨血清透明质酸合成酶2(HAS2)、人生长分化因子3(GDF3)及癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)在乳腺癌患者行根治术前后的变化特征及其与术后切口部位感染、局部复发的相关性。方法回顾性选取商洛市中心医院2020年10月至2022年10月收治的乳腺癌患者80例作为研究对象,所有患者均采取根治性手术治疗,对所有患者进行1年随访,分别记录所有患者手术前、术后1周、术后1个月及术后1年HAS2、GDF3及CEACAM1水平变化情况。根据患者术后切口部位感染情况分为感染组(n=15)和非感染组(n=65),分析HAS2、GDF3及CEACAM1与术后切口部位感染的关系,并分析影响术后切口部位感染的危险因素。对所有患者进行1年随访,依照其术后1年内局部复发情况分为复发组(n=20)与非复发组(n=60),分析HAS2、GDF3及CEACAM1与术后局部复发的关系,并分析影响术后局部复发的危险因素。结果乳腺癌患者行根治术后1周、术后1个月及术后1年,HAS2表达水平分别为(211.80±23.82)、(173.69±19.75)、(171.43±22.64)pg/mL,均明显低于手术前[(256.57±38.24)pg/mL],GDF3表达水平分别为(121.23±25.16)、(98.27±13.35)、(95.85±17.84)pg/mL,均明显低于手术前[(157.19±26.24)pg/mL],CEACAM1水平分别为(21.57±5.24)、(34.46±4.46)、(25.34±3.75)μg/L,均高于手术前[(7.80±3.82)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。感染组与非感染组患者HAS2水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);感染组GDF3表达水平为(166.35±23.61)pg/mL,高于非感染组[(148.83±30.68)pg/mL],CEACAM1水平为(5.65±1.14)μg/L,低于非感染组[(8.15±2.36)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。GDF3与术后切口部位感染呈正相关(r=0.425,P<0.05),CEACAM1与术后切口部位感染呈负相关(r=-0.537,P<0.05)。且经多因素Logistics回归分析发现,GDF3为乳腺癌根治术后切口部位感染的独立危险因素(P<0.05)。复发组HAS2、GDF3表达水平分别为(315.63±42.63)pg/mL、(17 展开更多
关键词 伤口感染 复发 乳腺癌 透明质酸合成酶2 人生长分化因子3 癌胚抗原相关细胞黏附分子1
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胸外侧动脉彩色多普勒超声血流参数及血清VEGF、HAS2水平联合检测对乳腺癌术后患者复发转移的预测价值
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作者 袁梅 孙改艳 刘芳 《中国民康医学》 2024年第20期123-125,共3页
目的:探讨胸外侧动脉(LTA)彩色多普勒超声血流参数及血清血管内皮生长因子(VEGF)、透明质酸合成酶2(HAS2)水平联合检测对乳腺癌术后患者复发转移的预测价值。方法:回顾性分析2022年5月至2023年6月该院收治的63例行根治术的乳腺癌患者的... 目的:探讨胸外侧动脉(LTA)彩色多普勒超声血流参数及血清血管内皮生长因子(VEGF)、透明质酸合成酶2(HAS2)水平联合检测对乳腺癌术后患者复发转移的预测价值。方法:回顾性分析2022年5月至2023年6月该院收治的63例行根治术的乳腺癌患者的临床资料,根据出院后随访6个月是否出现复发转移分为预后良好组(n=50)和预后不良组(n=13),比较两组LTA彩色多普勒超声血流参数及VEGF、HAS2水平,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析其对乳腺癌术后患者复发转移的预测价值。结果:预后不良组阻力指数(RI)、搏动指数(PI)和收缩末期峰值/舒张末期峰值(S/D)均低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);预后不良组血清VEGF、HAS2水平均高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,RI、PI、S/D及血清VEGF、HAS2水平单项及联合检测预测乳腺癌术后患者复发转移的曲线下面积分别为0.746、0.797、0.818、0.758、0.738、0.932,联合检测预测价值高于各指标单项检测。结论:LTA彩色多普勒超声血流参数及血清VEGF、HAS2水平联合检测预测乳腺癌术后患者复发转移的价值高于各指标单项检测。 展开更多
关键词 胸外侧动脉 彩色多普勒超声 透明质酸合成酶2 血管内皮生长因子 乳腺癌 根治术 复发转移
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透明质酸合成酶2通过调控TGF-β/SMAD4信号通路对肾细胞癌发生发展的影响 被引量:2
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作者 刘军 冉灿 +1 位作者 曾定胜 奉友刚 《遵义医科大学学报》 2023年第4期396-402,共7页
目的探讨透明质酸合成酶2(HAS2)在肾细胞癌(RCC)中的作用及其潜在分子机制。方法收集我院从2019年8月至2021年7月收治的RCC患者接受手术切除的30例RCC组织(RCC组)和30例癌旁组织(NAT组),RT-qPCR和Western blot实验分别检测HAS2 mRNA和... 目的探讨透明质酸合成酶2(HAS2)在肾细胞癌(RCC)中的作用及其潜在分子机制。方法收集我院从2019年8月至2021年7月收治的RCC患者接受手术切除的30例RCC组织(RCC组)和30例癌旁组织(NAT组),RT-qPCR和Western blot实验分别检测HAS2 mRNA和蛋白在RCC组织和细胞中的表达。将NC-siRNA、HAS2-siRNA转染至细胞后,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测RCC细胞的活力;流式细胞术检测RCC细胞凋亡情况;细胞划痕实验检测细胞迁移情况;Western blot检测RCC细胞中上皮-间充质转化(EMT)标志物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白和凋亡蛋白标志物Bax、Caspase-3、Bcl-2蛋白以及TGF-β1、p-Smad4蛋白的表达。结果与NAT组比较,RCC组织中HAS2 mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05);与正常肾近端小管上皮细胞(RPTEC)比较,RCC细胞系中HAS2 mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05)。与Control组比较,HAS2-siRNA组细胞中HAS2 mRNA和蛋白水平显著降低,细胞增殖和迁移能力显著降低,细胞凋亡率显著升高,Bax和Caspase-3蛋白水平显著升高,Bcl-2蛋白水平显著降低,E-cadherin蛋白水平显著升高,N-cadherin和Vimentin蛋白水平显著降低,TGF-β1、p-Smad4蛋白水平均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。NC-siRNA组与Control组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论沉默HAS2能抑制肾细胞癌细胞增殖、迁移和EMT,促进肾细胞癌细胞凋亡,其机制可能与调控TGF-β/SMAD4信号通路有关。 展开更多
关键词 肾细胞癌 透明质酸合成酶2 凋亡 增殖 TGF-β/SMAD4信号通路
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构建无抗性标记双拷贝透明质酸合成酶基因工程菌 被引量:1
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作者 蓝小玲 张波 +5 位作者 李学如 李尧 郭泰林 孟涛 任瑶瑶 江南屏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期396-401,共6页
【目的】探讨一种构建无抗生素选择标记链球菌透明质酸合成酶基因工程菌的方法。【方法】PCR扩增链球菌透明质酸合成酶操纵子hasABC基因,用温度敏感载体pJR700构建携带hasABC基因重组质粒pXL32;电转化pXL32质粒到马链球菌兽疫亚种感受... 【目的】探讨一种构建无抗生素选择标记链球菌透明质酸合成酶基因工程菌的方法。【方法】PCR扩增链球菌透明质酸合成酶操纵子hasABC基因,用温度敏感载体pJR700构建携带hasABC基因重组质粒pXL32;电转化pXL32质粒到马链球菌兽疫亚种感受态细胞,卡那霉素(Kanamycin,kan)平板37℃培养筛选重组子,在不含kan液体培养基中30℃传代,37℃平板分离挑取抗生素敏感菌落,RT-PCR检测工程菌染色体hasABC基因表达,Bitter-Muir法测定菌体透明质酸含量。【结果】在无抗生素选择压力条件下,获得透明质酸产率提高34%的马链球菌兽疫亚种透明质酸合成酶基因工程菌。【结论】用pJR700温度敏感载体系统,构建能提高透明质酸产量的无抗生素选择标记的基因工程菌是可行的。 展开更多
关键词 透明质酸合成酶操纵子 温度敏感质粒 菌透明质酸基因工程菌 马链球菌兽疫亚种
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RNAi阻断人膀胱癌组织中成纤维细胞内透明质酸合成酶3的表达研究
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作者 杨为民 蔡建良 +2 位作者 叶章群 杜广辉 胡志全 《临床外科杂志》 2006年第6期366-368,403,共4页
目的探讨RNA干扰技术阻断人膀胱移行细胞癌组织中成纤维细胞内透明质酸合成酶3(hyaluronicacidsynthase3,HAS3)的表达与膀胱移行细胞癌生物学行为之间的关系。方法设计、体外化学合成HAS3mRNA序列特异性、非特异性小干涉双链RNA(smallin... 目的探讨RNA干扰技术阻断人膀胱移行细胞癌组织中成纤维细胞内透明质酸合成酶3(hyaluronicacidsynthase3,HAS3)的表达与膀胱移行细胞癌生物学行为之间的关系。方法设计、体外化学合成HAS3mRNA序列特异性、非特异性小干涉双链RNA(smallinterferencingRNA,siRNA),分别与脂质体LipofectamineTM2000结合后转染体外培养的人膀胱移行细胞癌组织中的成纤维细胞。实验分为A、B、C、D四组:孵育48h后,取各组细胞培养液进行放免法透明质酸浓度测定、免疫细胞化学染色了解透明质酸的合成、RT-PCR法检测HAS3mRNA的表达。结果与A组相比,D组细胞HAS3mRNA表达减少了78.2%,HA染色明显变淡,细胞培养液中HA浓度下降了60.3%(P<0.01);B、C组mRNA表达分别减少了4.7%、5.4%,HA染色几乎无变化,HA浓度分别下降了5.2%、5.8%(P>0.05)。结论RNA干扰技术可以显著地减少膀胱移行细胞癌组织中成纤维细胞的HAS3的表达,从而大幅度地降低该细胞内透明质酸的合成。 展开更多
关键词 RNA干扰技术 膀胱移行细胞癌 成纤维细胞 透明质酸合成酶3
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