iTRAQ技术分析无乳链球菌牛源株与人源株差异表达蛋白 被引量：5

1

作者 郭长明 袁橙 +6 位作者 朱善元 王安平 吴双 王永娟 左伟勇 洪伟鸣 秦枫 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1119-1125,共7页

为了分析无乳链球菌牛源株ATCC13813与人源株A909差异蛋白质组，提取ATCC13813与A909全菌蛋白，iTRAQ技术标记后，进行液相色谱串联质谱（LC-MS／MS）鉴定和定量，质谱数据通过Mascot2．2和Proteome discoverer 1．4软件分析，并对差异... 为了分析无乳链球菌牛源株ATCC13813与人源株A909差异蛋白质组，提取ATCC13813与A909全菌蛋白，iTRAQ技术标记后，进行液相色谱串联质谱（LC-MS／MS）鉴定和定量，质谱数据通过Mascot2．2和Proteome discoverer 1．4软件分析，并对差异蛋白进行GO功能注释和KEGG pathway通路分析。结果显示，共鉴定出差异表达蛋白350个（P〈0．05），与ATCC13813相比，在A909中上调表达蛋白174个（比值〉1．5），下调表达蛋白176个（比值〈0．667）。生物信息学分析预测这些蛋白主要涵盖28个生物学功能，14个通路。本研究为阐明不同宿主来源株无乳链球菌致病性差畀奠定基础。 展开更多

关键词 无乳链球菌 牛源株 人源株 ITRAQ 差异蛋白质组

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应用iTRAQ定量蛋白质组学技术筛选无乳链球菌鱼源株与人源株差异表达蛋白 被引量：3

2

作者 郭长明 袁橙 +4 位作者 武彩红 朱善元 刘广锦 陆承平 刘永杰 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期442-451,共10页

以斑马鱼和巨噬细胞作为体内、外感染模型,比较无乳链球菌鱼源株GD201008-001与人源株A909的致病性差异,利用iTRAQ技术和质谱分析技术进行差异表达蛋白鉴定,以期为揭示无乳链球菌不同宿主来源株致病机制提供新思路。实验通过测定菌株GD2... 以斑马鱼和巨噬细胞作为体内、外感染模型,比较无乳链球菌鱼源株GD201008-001与人源株A909的致病性差异,利用iTRAQ技术和质谱分析技术进行差异表达蛋白鉴定,以期为揭示无乳链球菌不同宿主来源株致病机制提供新思路。实验通过测定菌株GD201008-001、A909的斑马鱼半数致死量和巨噬细胞吞噬率,比较二者致病性差异;提取全菌蛋白,经iTRAQ试剂标记后进行质谱鉴定,质谱数据用软件Mascot 2.2和Proteome Discoverer 1.4进行查库(Uni Prot数据库)鉴定及定量分析,并对差异蛋白进行GO功能注释和KEGG通路分析。结果显示,GD201008-001毒力显著高于A909;通过iTRAQ分析两株菌差异表达蛋白,发现差异蛋白涉及的生物学功能较为广泛,在鉴定出的368个差异表达蛋白中,GD201008-001中上调表达蛋白193个(比值>1.5),下调表达蛋白175个(比值<0.667)。生物信息学分析预测这些蛋白主要涉及26个生物学功能,14个通路,推测Clp X、Glm S和Cps IVK可能在两株菌致病性差异中发挥重要作用。本研究为阐明无乳链球菌不同宿主来源株致病性差异奠定了基础。 展开更多

关键词 无乳链球菌 鱼源株 人源株 ITRAQ 蛋白质组学

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新疆弓形虫人株的超微结构观察 被引量：1

3

作者 金根源 任德坤 +2 位作者 黄星 赵华竹 刘永德 《地方病通报》 1991年第4期33-34,129,共2页

使用电子显微镜扫描及透射技术对从新疆人体中分离出的弓形虫进行超微结构观察。结果表明:本株弓形虫外形较宽,虫体内含有较多的致密颗粒,其他结构基本同国内常见的弓形虫。

关键词 弓形虫 人株 超微结构 新疆

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白刺花生物碱的体外抑瘤作用 被引量：35

4

作者 王秀坤 李家实 +2 位作者 魏璐雪 闫玉凝 王瑞卿 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 1996年第2期59-60,共2页

报道了从白刺花种子中分得的６种生物碱单体对人体１１种癌瘤株体外抑瘤作用。结果表明，该类生物碱对白血病瘤株有较强的抑制作用，对表皮癌瘤株也有一定的抑制作用，而且抑瘤作用呈现出较强的选择性。

关键词 白刺花 生物碱 抑瘤作用 中草药

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裙带菜多糖抗肿瘤作用的研究 被引量：29

5

作者 王雪 邹向阳 +3 位作者 郭莲英 邢嵘 毕向东 侯林 《大连医科大学学报》 CAS 2006年第2期98-100,共3页

[目的]观察裙带菜多糖的体内、外抗肿瘤作用,并对其机制进行讨论。[方法]采用MTT法观察裙带菜多糖体外对人肝癌细胞HepG-2的抑制作用;通过对615荷瘤小鼠瘤重及免疫器官脾脏的研究,观察了裙带菜多糖的体内抗肿瘤作用。[结果]与阴性对照... [目的]观察裙带菜多糖的体内、外抗肿瘤作用,并对其机制进行讨论。[方法]采用MTT法观察裙带菜多糖体外对人肝癌细胞HepG-2的抑制作用;通过对615荷瘤小鼠瘤重及免疫器官脾脏的研究,观察了裙带菜多糖的体内抗肿瘤作用。[结果]与阴性对照组相比裙带菜多糖各浓度组体外对人肝癌细胞HepG-2均有很强的抑制作用(P<0.01),其中15、10 mg/mL组的抑制率分别为57.20%、51.79%,略低于5-FU组;在荷瘤小鼠实验中,与空白对照组相比裙带菜多糖各浓度组均有很强的肿瘤抑制作用,其中400、200 mg/kg组抑瘤率分别为69.13%、42.11%,与5-FU组相近。[结论]裙带菜多糖对人肝癌细胞HepG-2抑制效果显著,小鼠体内实验也证实了裙带菜多糖较强的抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 裙带菜多糖 HepG-2人肝癌细胞株 抗肿瘤活性

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半夏生物总碱对人肝癌细胞增殖的影响 被引量：13

6

作者 陈芳 邓惠玲 张宜 《中国药师》 CAS 2011年第10期1449-1451,共3页

目的:研究半夏生物总碱对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响。方法:采用MTT比色法以及集落形成率来测定半夏生物碱对Bel-7402生长抑制作用。结果:半夏生物碱400,200,100μg·ml^(-1)对肝癌细胞Bel-7402有明显抑制作用(P<0.05或0.01)... 目的:研究半夏生物总碱对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响。方法:采用MTT比色法以及集落形成率来测定半夏生物碱对Bel-7402生长抑制作用。结果:半夏生物碱400,200,100μg·ml^(-1)对肝癌细胞Bel-7402有明显抑制作用(P<0.05或0.01),随着半夏生物碱浓度的增加和共同培养时间的延长,抑制作用逐渐增强。结论:半夏生物碱对人肝癌细胞Bel-7402生长有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 半夏生物碱 Bel-7402肿瘤细胞

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半夏生物碱对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响 被引量：9

7

作者 陈芳 杨李 +1 位作者 王晓昆 张宜 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2011年第43期4048-4050,共3页

目的:研究半夏生物碱对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响。方法:将Bel-7402与半夏生物碱(400、200、100μg·mL-1)共同培养,采用MTT比色法测定半夏生物碱对Bel-7402增殖的影响,TUNEL技术检测其对Bel-7402细胞凋亡的影响,免疫组化SABC... 目的:研究半夏生物碱对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响。方法:将Bel-7402与半夏生物碱(400、200、100μg·mL-1)共同培养,采用MTT比色法测定半夏生物碱对Bel-7402增殖的影响,TUNEL技术检测其对Bel-7402细胞凋亡的影响,免疫组化SABC染色法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达情况。结果:作用24h后,半夏生物碱高、中、低剂量(400、200、100μg·mL-1)对Bel-7402增殖有显著抑制作用,且抑制作用随着药物浓度增加而加强,最高抑制率可达到36.98%。TUNEL结果显示,半夏生物碱高、中、低剂量(400、200、100μg·mL-1)能有效诱导Bel-7402细胞凋亡,且呈量效关系。半夏生物碱高、中、低剂量(400、200、100μg·mL-1)可使Bax表达显著升高而Bcl-2表达显著下降。结论:半夏生物碱对Bel-7402生长有一定的抑制作用,可诱导其凋亡,其作用机制可能为上调Bax和下调Bcl-2。 展开更多

关键词 半夏生物碱 Bel-7402肿瘤细胞 细胞凋亡 B细胞淋巴瘤/白血病-2 B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白

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人体热应变预测方法标准在热安全评价中的应用 被引量：5

8

作者 张超 秦挺鑫 刘阳 《中国安全生产科学技术》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期118-122,共5页

工业生产中存在着大量的高温工作环境,如高温生产车间或夏季露天作业环境等。高温工作环境可能导致人体体温升高、出汗脱水,对人体安全造成危害。建立人体热生理响应模型,通过计算得出人体生理指标变化,从而判断人体安全状态,是有效的... 工业生产中存在着大量的高温工作环境,如高温生产车间或夏季露天作业环境等。高温工作环境可能导致人体体温升高、出汗脱水,对人体安全造成危害。建立人体热生理响应模型,通过计算得出人体生理指标变化,从而判断人体安全状态,是有效的人体安全评价方法。ISO 7933是人体热应变计算方法的国际标准。在考虑了环境和人体的多种情况下,给出人体相关生理参数的计算方法。基于此方法,与人体热安全阈值相结合,建立人体热安全评价方法,并给出了典型热环境下的算例。该方法也可用于评价热防护服的有效性。 展开更多

关键词 高温作业 人体安全评价 人体热应变预测

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狂犬CTN-1V株在人二倍体细胞Walvax-2株上的病毒收获液制备工艺研究 被引量：5

9

作者 徐道俊 段清堂 +5 位作者 鲁卫东 杨燕羽 马波 李子财 李宛馀 刘馨 《药物生物技术》 CAS 2017年第5期381-385,共5页

采用狂犬病病毒株CTN-1V株接毒于人二倍体细胞Walvax-2株进行病毒收获液制备工艺研究。接毒时,采用不同的人二倍体细胞量、不同的接毒方式及不同的moi进行比较;接毒后,待带毒细胞长至致密单层即95%以上,采用直接换病毒维持液和带毒传一... 采用狂犬病病毒株CTN-1V株接毒于人二倍体细胞Walvax-2株进行病毒收获液制备工艺研究。接毒时,采用不同的人二倍体细胞量、不同的接毒方式及不同的moi进行比较;接毒后,待带毒细胞长至致密单层即95%以上,采用直接换病毒维持液和带毒传一代后再换维持液的方式进行比较;同时采用不同培养基维持液、不同pH值的维持液及对不同的病毒收获时间进行比较;通过测定病毒收获液的滴度来确定狂犬病病毒株CTN-1V株接毒于人二倍体细胞Walvax-2株上的病毒收获液最适制备工艺条件。接毒时,采用人二倍体细胞量≥2亿,37℃悬浮混合吸附30 min的方式及0.05 moi;接毒后采用美迪DMEM+0.3%人血白蛋白作为病毒维持液、pH为7.8~8.0的维持液及从换维持液d 3开始收获病毒液,并换上新的维持液,之后再进行5 d及7 d病毒液的收获,通过动物法和细胞法测定收获液的病毒滴度,3次收获液的病毒滴度均大于7.0 lg LD50/m L。建立起了稳定的狂犬病病毒株CTN-1V株在人二倍体细胞Walvax-2株上的病毒收获液制备工艺。 展开更多

关键词 人二倍体细胞Walvax-2株 狂犬病病毒株CTN-1V株 病毒维持液 病毒收获液 病毒滴度 moi

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芍药甙对人肝癌细胞株Bel-7402增殖的影响 被引量：5

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作者 晏雪生 李瀚旻 +2 位作者 彭亚琴 明安萍 甄春芳 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2001年第5期287-288,共2页

研究芍药甙对人肝癌细胞株Bel-7402增殖的影响。方法:采用人肝癌细胞株Bel-7402和细胞药理学方法,对比观察3种措施(阴性无药对照、阳性阿霉素对照及芍药甙)对Bel-7402细胞增殖的影响。结果:芍药甙(2mg/ml、1mg/ml、0.5mg/ml)对Bel-7402... 研究芍药甙对人肝癌细胞株Bel-7402增殖的影响。方法:采用人肝癌细胞株Bel-7402和细胞药理学方法,对比观察3种措施(阴性无药对照、阳性阿霉素对照及芍药甙)对Bel-7402细胞增殖的影响。结果:芍药甙(2mg/ml、1mg/ml、0.5mg/ml)对Bel-7402细胞增殖均有显著性抑制作用(均P<0.01),其抑制率分别为33.78％、22.22％和11.56％,增殖抑制作用随药物浓度增高而加强,呈显著的量效关系。结论:芍药甙对人肝癌细胞株Bel-7402增殖有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 芍药甙 人肝癌细胞株 BEL-7402 实验研究

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HPV-18型晚期基因L1在宫颈脱落细胞中的表达与突变研究

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作者 汪萍 宛传丹 +5 位作者 赵一琳 崔燕红 宫磊 林爱琴 卜文婕 朱晓蕾 《皖南医学院学报》 CAS 2019年第4期314-317,共4页

目的:研究人乳头瘤病毒HPV-18型晚期基因L1在不同宫颈上皮病变患者脱落细胞中表达分布与基因突变特征。方法:收集单纯感染人乳头瘤病毒HPV-18型宫颈上皮病变组织脱落细胞,免疫细胞化学分析其中L1基因的蛋白表达情况。提取总DNA,特异性... 目的:研究人乳头瘤病毒HPV-18型晚期基因L1在不同宫颈上皮病变患者脱落细胞中表达分布与基因突变特征。方法:收集单纯感染人乳头瘤病毒HPV-18型宫颈上皮病变组织脱落细胞,免疫细胞化学分析其中L1基因的蛋白表达情况。提取总DNA,特异性引物针对HPV-18 L1基因进行PCR扩增检测,所得产物进行Sanger基因测序分析。结果:HPV-18 L1基因在宫颈炎、CINⅠ+Ⅱ级、CINⅢ级和宫颈癌组织中蛋白表达阳性率分别为100%、81.8%、34.6%和12.2%。在不同病理分级宫颈上皮病变患者脱落细胞标本中,HPV-18 L1蛋白表达阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。Sanger法基因测序显示L1基因序列存在突变,突变率9.2%,共发现11类核苷酸变异,其中4类属错义突变。结论:HPV-18型晚期基因L1蛋白表达量与宫颈组织病理病变严重程度呈负相关趋势。HPV-18 L1基因突变较为突出,存在地区流行型突变株。L1基因突变与宫颈恶性病变程度可能存在一定关系。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒18型 晚期基因L1 宫颈脱落细胞 基因突变

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二十碳五烯酸对人肝胆管癌细胞株FRH-0201增殖的影响

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作者 张庆 王向群 +1 位作者 陈丽娟 吴丹 《中华中医药学刊》 CAS 2012年第3期556-558,I0005,I0006,共5页

目的:评价二十碳五烯酸体外对人肝胆管癌细胞株FRH-0201增殖的影响。方法:在处于指数生长期的FRH-0201细胞株培养剂中添加二十碳五烯酸(EPA),通过采用MTT法检测EPA体外对FRH-0201细胞的增殖抑制率及IC50,绘制细胞生长曲线以及流式细胞... 目的:评价二十碳五烯酸体外对人肝胆管癌细胞株FRH-0201增殖的影响。方法:在处于指数生长期的FRH-0201细胞株培养剂中添加二十碳五烯酸(EPA),通过采用MTT法检测EPA体外对FRH-0201细胞的增殖抑制率及IC50,绘制细胞生长曲线以及流式细胞术检测细胞周期来观察EPA对FRH-0201细胞增殖的影响;吖啶橙荧光染色、电镜技术观察FRH-0201细胞凋亡时的形态学特征及超微结构的改变,AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡率。结果:经EPA处理后,FRH-0201细胞增殖受到明显抑制,并且呈明显的量效关系和时效关系。同样条件下正常小鼠成纤维细胞L-929无明显影响。细胞阻滞在G0/G1期。吖啶橙染色细胞内有明显的黄绿色浓染,电镜观察细胞染色质浓缩,EPA 50、70μg/mL作用48h的细胞凋亡率分别为37.3%和62.2%,明显高于正常对照组。结论:EPA体外能通过诱导FRH-0201细胞发生凋亡抑制其增殖。 展开更多

关键词 二十碳五烯酸(EPA) 人肝胆管癌细胞珠 增值 细胞凋亡率

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