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人钠/二羧基转运蛋白2融合蛋白载体的构建及其原核表达
被引量：
1
1
作者
朱晗玉
陈香美
+2 位作者
何娅妮
洪权
孙雪蜂
《军医进修学院学报》
CAS
2004年第1期47-49,共3页
目的 :观测和鉴定人钠 /二羧基转运蛋白 2 (hSDCT2 )在大肠杆菌中的表达 ,并分离、纯化其蛋白产物。方法 :应用DNA重组技术 ,构建重组表达质粒pGEX hSDCT2 ;IPTG诱导其表达。采用谷胱甘肽偶联的Sepharose 4B亲和层析纯化GST hSDCT2 ,经F...
目的 :观测和鉴定人钠 /二羧基转运蛋白 2 (hSDCT2 )在大肠杆菌中的表达 ,并分离、纯化其蛋白产物。方法 :应用DNA重组技术 ,构建重组表达质粒pGEX hSDCT2 ;IPTG诱导其表达。采用谷胱甘肽偶联的Sepharose 4B亲和层析纯化GST hSDCT2 ,经FactorXa酶切和二次亲和层析后 ,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和WesternBlotting进行鉴定。结果 :成功构建hSDCT2基因融合蛋白载体 ,SDS PAGE及WesternBlotting显示GST hSDCT2融合蛋白表达于原核细胞 ,蛋白产量约占菌体总蛋白量的 2 5 %。经酶切及二次纯化后 ,获得纯化的hSDCT2蛋白。结论 :人钠 /二羧基转运蛋白 2可在大肠杆菌中稳定表达。
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关键词
人钠/二羧基转运蛋白
2
hSDCT
2
融合蛋白载体
原核表达
基因融合
菌株
下载PDF
职称材料
人钠依赖性二羧酸转运蛋白2(hSDCT2)的组织表达谱分析
被引量：
1
2
作者
朱晗玉
陈香美
+4 位作者
刘章锁
何娅妮
彭丽霞
洪权
孙雪蜂
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期552-557,共6页
利用DNA重组技术 ,构建重组表达质粒pGEX hSDCT2 .IPTG诱导其表达后 ,采用谷胱甘肽 Sepharose 4B亲和层析 ,获得纯化的谷胱甘肽S 转移酶 (GST) hSDCT2重组融合蛋白 .以此为免疫原免疫兔制备GST hSDCT2融合蛋白抗体 .多组织Northern印...
利用DNA重组技术 ,构建重组表达质粒pGEX hSDCT2 .IPTG诱导其表达后 ,采用谷胱甘肽 Sepharose 4B亲和层析 ,获得纯化的谷胱甘肽S 转移酶 (GST) hSDCT2重组融合蛋白 .以此为免疫原免疫兔制备GST hSDCT2融合蛋白抗体 .多组织Northern印迹法结果显示 ,3 6kb的hSDCT2基因转录产物 ,在心、骨骼肌、胸腺、小肠、肺和外周血白细胞等组织中几乎不表达 ,在脑、结肠、脾、肝和胎盘中仅有少量表达 ,但在肾脏中大量表达 ;并且在肾脏和脾脏中还存在着另一种约 4 3kb的转录产物 .Western印迹法证实 ,hSDCT2蛋白以类似方式于上述组织表达 .免疫组化双重染色结果发现 ,与分布于近端肾小管刷状缘的hSDCT1不同 ,hSDCT2主要分布于近端肾小管的基底膜侧 .这些结果为进一步研究人钠依赖性二羧酸转运蛋白 2的结构和功能奠定了基础 .
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关键词
人钠依赖性二羧酸转运蛋白
2
组织表达谱
抗体
表达质粒
跨膜转运蛋白
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职称材料
题名
人钠/二羧基转运蛋白2融合蛋白载体的构建及其原核表达
被引量：
1
1
作者
朱晗玉
陈香美
何娅妮
洪权
孙雪蜂
机构
解放军总医院肾病中心暨重点实验室
出处
《军医进修学院学报》
CAS
2004年第1期47-49,共3页
基金
国家重大基础研究规划"973"资助项目 (G2 0 0 0 0 5 70 0 6)
国家自然科学基金资助项目 ( 3 9870 3 2 3 )
国家自然科学基金创新项目 ( 3 0 12 10 0 5 )
文摘
目的 :观测和鉴定人钠 /二羧基转运蛋白 2 (hSDCT2 )在大肠杆菌中的表达 ,并分离、纯化其蛋白产物。方法 :应用DNA重组技术 ,构建重组表达质粒pGEX hSDCT2 ;IPTG诱导其表达。采用谷胱甘肽偶联的Sepharose 4B亲和层析纯化GST hSDCT2 ,经FactorXa酶切和二次亲和层析后 ,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和WesternBlotting进行鉴定。结果 :成功构建hSDCT2基因融合蛋白载体 ,SDS PAGE及WesternBlotting显示GST hSDCT2融合蛋白表达于原核细胞 ,蛋白产量约占菌体总蛋白量的 2 5 %。经酶切及二次纯化后 ,获得纯化的hSDCT2蛋白。结论 :人钠 /二羧基转运蛋白 2可在大肠杆菌中稳定表达。
关键词
人钠/二羧基转运蛋白
2
hSDCT
2
融合蛋白载体
原核表达
基因融合
菌株
Keywords
human
sodium
-
dependent
dicarboxylate
transporter
2
gene
fusion
kidney
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
R318 [医药卫生—生物医学工程]
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职称材料
题名
人钠依赖性二羧酸转运蛋白2(hSDCT2)的组织表达谱分析
被引量：
1
2
作者
朱晗玉
陈香美
刘章锁
何娅妮
彭丽霞
洪权
孙雪蜂
机构
中国人民解放军肾病中心暨重点实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期552-557,共6页
基金
国家 973重点基础研究发展规划资助项目(No.G2 0 0 0 0 5 70 0 3 )
国家自然科学基金项目 (No .3 0 0 70 2 88
+1 种基金
No.3 0 2 70 5 0 5 )
国家自然科学基金创新研究群体项目(No .3 0 12 10 0 5 )~~
文摘
利用DNA重组技术 ,构建重组表达质粒pGEX hSDCT2 .IPTG诱导其表达后 ,采用谷胱甘肽 Sepharose 4B亲和层析 ,获得纯化的谷胱甘肽S 转移酶 (GST) hSDCT2重组融合蛋白 .以此为免疫原免疫兔制备GST hSDCT2融合蛋白抗体 .多组织Northern印迹法结果显示 ,3 6kb的hSDCT2基因转录产物 ,在心、骨骼肌、胸腺、小肠、肺和外周血白细胞等组织中几乎不表达 ,在脑、结肠、脾、肝和胎盘中仅有少量表达 ,但在肾脏中大量表达 ;并且在肾脏和脾脏中还存在着另一种约 4 3kb的转录产物 .Western印迹法证实 ,hSDCT2蛋白以类似方式于上述组织表达 .免疫组化双重染色结果发现 ,与分布于近端肾小管刷状缘的hSDCT1不同 ,hSDCT2主要分布于近端肾小管的基底膜侧 .这些结果为进一步研究人钠依赖性二羧酸转运蛋白 2的结构和功能奠定了基础 .
关键词
人钠依赖性二羧酸转运蛋白
2
组织表达谱
抗体
表达质粒
跨膜转运蛋白
Keywords
human
sodium
dependent
dicarboxylate
transporter
2,
antibody,
tissue
expression
profile
分类号
Q26 [生物学—细胞生物学]
Q73
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人钠/二羧基转运蛋白2融合蛋白载体的构建及其原核表达
朱晗玉
陈香美
何娅妮
洪权
孙雪蜂
《军医进修学院学报》
CAS
2004
1
下载PDF
职称材料
2
人钠依赖性二羧酸转运蛋白2(hSDCT2)的组织表达谱分析
朱晗玉
陈香美
刘章锁
何娅妮
彭丽霞
洪权
孙雪蜂
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
1
下载PDF
职称材料
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