漆赛尔桑当松汤通过抑制NOTCH/TLR4改善成纤维滑膜细胞炎症反应

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作者 陶乙文 刘佳 +2 位作者 曾勇 张艺 苏锦松 《中药与临床》 2023年第4期58-61,共4页

目的:探讨漆赛尔桑当松汤对人体类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)中NOTCH和TLR4mRNA相对表达量的影响。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TNF-α诱导的HFLS-RA中NOTCH1、NOTCH3和TLR4mRNA表达。分为空白组、模型组、漆赛... 目的:探讨漆赛尔桑当松汤对人体类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)中NOTCH和TLR4mRNA相对表达量的影响。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TNF-α诱导的HFLS-RA中NOTCH1、NOTCH3和TLR4mRNA表达。分为空白组、模型组、漆赛尔桑当松汤含药血清组。结果:造模后NOTCH1、NOTCH3、TLR4的mRNA相对表达量与空白组相比有上升(P<0.05);治疗后漆赛尔桑当松汤含药血清组中的NOTCH1、NOTCH3、TLR4有降低趋势,且有显著性差异(P<0.05)。结论:漆赛尔桑当松汤能抑制TNF-α诱导的HFLS-RA中NOTCH和TLR4基因的表达。 展开更多

关键词 漆赛尔桑当松汤 成纤维滑膜细胞 NOTCH TLR4 RT-PCR

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雷公藤甲素对TNF-α诱导的滑膜细胞增殖的影响及对Ras-MAPKs信号转导通路的调控作用 被引量：29

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作者 王建竹 连金饶 +1 位作者 孔祥英 林娜 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期888-891,共4页

目的:探讨雷公藤甲素(TP)对肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导的类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞(RA-HFLS)增殖的影响及对Ras-MAPKs信号转导通路的调控作用。方法:不同浓度的TP(0.28,2.8,28,140 nmol.L-1)与RA-HFLS共孵育,采用MTS比色法检测... 目的:探讨雷公藤甲素(TP)对肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导的类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞(RA-HFLS)增殖的影响及对Ras-MAPKs信号转导通路的调控作用。方法:不同浓度的TP(0.28,2.8,28,140 nmol.L-1)与RA-HFLS共孵育,采用MTS比色法检测细胞增殖活性,并通过Western blot检测不同浓度的TP对TNF-α诱导的RA-HFLS Ras-MAPKs信号转导通路相关蛋白(Ras,p-P38,p-ERK,p-JNK)表达水平的影响。结果:MTS结果显示,TP可以剂量依赖性抑制RA-HFLS的增殖,其抑制率分别为0.28%,5.05%,30.83%,43.77%;Western blot结果提示TP可剂量依赖性抑制Ras-MAPKs信号转导通路相关蛋白的表达。结论:TP能抑制RA-HFLS增殖、减轻滑膜炎症,其分子机制可能与调控了Ras-MAPKs信号转导通路的异常活化有关。 展开更多

关键词 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 雷公藤甲素 MAPKS

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苗药黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类部位对人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞MH7A增殖及炎症因子分泌的影响 被引量：22

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作者 王霞 杨健 +5 位作者 宋菲 董莉 刘亭 郑林 马雪 李勇军 《中国药房》 CAS 北大核心 2017年第28期3949-3952,共4页

目的:研究苗药黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类部位(CADF)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞MH7A增殖及炎症因子分泌的影响,探讨CADF抗RA的作用机制。方法:将MH7A细胞分为空白组、TNF-α模型组、甲氨蝶呤组... 目的:研究苗药黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类部位(CADF)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞MH7A增殖及炎症因子分泌的影响,探讨CADF抗RA的作用机制。方法:将MH7A细胞分为空白组、TNF-α模型组、甲氨蝶呤组(阳性对照,20 mg/L)和CADF不同质量浓度组(50、100、200、400 mg/L),除空白组外,其余各组均以50μg/L TNF-α刺激活化MH7A细胞。以TNF-α与相应药物的混合液共同作用24 h后,检测细胞的增殖情况和培养液中一氧化氮(NO)、前列腺素E_2(PGE_2)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的含量。结果:与空白组比较,TNF-α模型组细胞增殖活性显著增强(P<0.01),培养液中NO、PGE2、IL-1β、IL-6含量显著增加(P<0.01);与TNF-α模型组比较,各给药组细胞的增殖均受到显著抑制(P<0.05或P<0.01),培养液中NO、PGE2、IL-1β、IL-6含量均显著减少(P<0.01),且与CADF具有一定的量效关系。结论:CADF可通过抑制TNF-α诱导的MH7A细胞增殖,减少炎症因子NO、PGE2、IL-1β、IL-6的分泌,从而发挥其抗RA的作用。 展开更多

关键词 苗药 黑骨藤 咖啡酰基奎宁酸类部位 人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞MH7A 炎症因子

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马钱子生物碱组分对类风湿性关节炎滑膜细胞增殖作用的比较研究 被引量：21

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作者 方芳 陈海波 +3 位作者 马凤森 张静若 池细绿 方剑乔 《浙江中医药大学学报》 CAS 2013年第1期1-4,共4页

[目的]比较观察马钱子总生物碱不同组分对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜细胞增殖的影响。[方法]体外培养人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA),加入不同浓度的马钱子总生物碱、马钱子碱和士的宁,采用溴脱氧尿苷(br... [目的]比较观察马钱子总生物碱不同组分对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜细胞增殖的影响。[方法]体外培养人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA),加入不同浓度的马钱子总生物碱、马钱子碱和士的宁,采用溴脱氧尿苷(bromodeoxyuridine,BRDU)比色法观察马钱子不同生物碱组分对细胞增殖的影响。[结果]不同浓度的马钱子总生物碱对HFLS-RA细胞增殖表现出良好的抑制作用。同浓度水平组比较,仅在浓度水平为0.22mg.mL-1时,马钱子碱组对细胞增殖的抑制率明显低于士的宁组(P<0.05),其余各浓度水平时均高于士的宁组。以马钱子总生物碱对细胞增殖的抑制率减去士的宁的抑制率,间接反应非士的宁生物碱对该细胞增殖的抑制率,在士的宁和马钱子碱浓度水平均为0.22mg.mL-1或0.11mg.mL-1时,明显低于士的宁组(P<0.01,P<0.05)与马钱子碱组(P<0.01,P<0.01),其余浓度水平时,均高于士的宁组的抑制率(P<0.01),低于马钱子碱组的抑制率但无显著性差异。[结论]马钱子总生物碱、士的宁、马钱子碱对类风湿性关节炎滑膜细胞的增殖均有良好的抑制作用;随着浓度的降低,马钱子碱对滑膜细胞增殖的抑制作用优于士的宁;在马钱子总生物碱中存在的非马钱子碱、非士的宁的生物碱组分未表现出对HFLS-RA细胞增殖的抑制作用。 展开更多

关键词 人类风湿性关节炎滑膜细胞 细胞增殖 马钱子总生物碱 马钱子碱 士的宁

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蕲蛇煮散剂的最佳粉碎粒度优选及其对人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的影响 被引量：8

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作者 刘芳 董改英 +1 位作者 瞿晶田 柴士伟 《中国药房》 CAS 北大核心 2017年第28期3935-3941,共7页

目的:优选蕲蛇煮散剂的最佳粉碎粒度,并研究其对人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的影响。方法:采用柱前衍生化反相高效液相色谱法,以煎煮1次后4种主要氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸、L-羟脯氨酸和甘氨酸)的总煎出量为指标,对蕲蛇饮片及... 目的:优选蕲蛇煮散剂的最佳粉碎粒度,并研究其对人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的影响。方法:采用柱前衍生化反相高效液相色谱法,以煎煮1次后4种主要氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸、L-羟脯氨酸和甘氨酸)的总煎出量为指标,对蕲蛇饮片及过1~8号筛部分进行筛选,优选蕲蛇煮散剂的最佳粉碎粒度。将人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞分为阴性对照组、阳性对照组(1μmol/L甲氨蝶呤)和最佳粉碎粒度蕲蛇煮散剂组(2.0 mg/mL),分别作用48 h后,采用流式细胞术测定细胞凋亡率。结果:蕲蛇煮散剂的最佳粉碎粒度为过6号筛,此时4种主要氨基酸总煎出量为(61.27±0.02)mg/g(n=3)。与阴性对照组比较,最佳粉碎粒度蕲蛇煮散剂组细胞凋亡率显著升高(P<0.05),且略高于阳性对照组。结论:蕲蛇煮散剂的最佳粉碎粒度为过6号筛;蕲蛇煮散剂具有诱导人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 蕲蛇 煮散剂 粉碎粒度 人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞 凋亡

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基于PI3K/AKT信号通路探究红景天-鬼箭羽药对对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的作用机制及配伍规律 被引量：1

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作者 郑秋含 杜连云 +3 位作者 张众 朴松兰 王颖航 潘志 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期875-881,共7页

目的:基于高效液相色谱法和体外实验探究红景天-鬼箭羽药对(下称“天羽”药对)抗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的配伍规律及作用机制。方法:通过高效液相色谱法测定“天羽”药对的单煎液以及不同配伍比例的合煎液(2∶1,1∶1,1... 目的:基于高效液相色谱法和体外实验探究红景天-鬼箭羽药对(下称“天羽”药对)抗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的配伍规律及作用机制。方法:通过高效液相色谱法测定“天羽”药对的单煎液以及不同配伍比例的合煎液(2∶1,1∶1,1∶2)中红景天苷的含量。通过体外实验CCK-8、PCR和Western Blot法检测肿瘤坏死因子α诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(human fibroblast-like synoviocyte rheumatoid arthritis,HFLS-RA)增殖、mRNA及蛋白表达。结果:“天羽”药对不同配伍比例(2∶1,1∶1,1∶2)的合煎液中红景天苷的含量均高于红景天单煎液,且配伍比例为1∶1时红景天苷的含量最高。CCK-8实验结果表明,“天羽”药对可对HFLS-RA细胞的增殖起到抑制作用。PCR和Western blot实验结果表明,“天羽”药对可显著降低HFLS-RA细胞中p-PI3K、p-AKT、MMP1、MMP3和MMP9 mRNA和蛋白的表达,增加TIMP1 mRNA和蛋白表达。结论:“天羽”药对可有效抑制HFLS-RA细胞增殖,其最佳的配伍比例为1∶1,作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路,进而调节MMPs/TIMPs平衡有关。 展开更多

关键词 “天羽”药对 人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 高效液相色谱法 配伍规律 作用机制

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苦皮藤对类风湿性关节炎成纤维滑膜细胞增殖和相关细胞因子表达的影响 被引量：7

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作者 陈彦伶 何金英 +3 位作者 胡成刚 唐娟 莫雅蜜 朱睿香 《中国民族民间医药》 2020年第4期14-20,共7页

目的:观察苦皮藤不同提取部位对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)增殖的影响,及其对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的HFLS-RA中细胞因子表达的影响。方法:制备苦皮藤水提物(A)及其醇提物(B),对醇提物根据极性大小进行萃取,得到石油... 目的:观察苦皮藤不同提取部位对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)增殖的影响,及其对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的HFLS-RA中细胞因子表达的影响。方法:制备苦皮藤水提物(A)及其醇提物(B),对醇提物根据极性大小进行萃取,得到石油醚部位(C)、二氯甲烷部位(D)、乙酸乙酯部位(E)、正丁醇部位(F)、剩余层部位(G)。噻唑蓝(MTT)法检测苦皮藤各部位不同浓度(10、20、40、80、160μg/mL)干预细胞24 h、48 h、72 h,对细胞增殖的抑制作用;TNF-α(20 ng/mL)体外诱导HFLS-RA增殖,加入不同浓度的各个提取部位(10,40,160μg/mL)作用72 h后,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞上清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、前列腺素E 2(PGE 2)的含量。结果:MTT结果表明,苦皮藤的B、C、D(80,160μg/mL)能显著抑制HFLS-RA细胞的增殖(P<0.01),呈时间和剂量依赖性;A、E、F、G四组对细胞的活力均无明显影响。ELISA结果显示,与空白组比较,TNF-α组细胞上清中IL-1β、IL-6、MMP-3、PGE 2含量均显著提高(P<0.01);与TNF-α组比较,B、C、D(40,160μg/mL)能显著抑制IL-1β的表达(P<0.05,P<0.01),具有剂量依赖性;C(40,160μg/mL)能显著抑制IL-6的表达(P<0.05),D(160μg/mL)能显著抑制IL-6的表达(P<0.05);C、D(160μg/mL)能显著降低MMP-3含量(P<0.05);A、B、D(160μg/mL)可抑制PGE 2的表达(P<0.05),C(40、160μg/mL)能显著抑制PGE 2的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:苦皮藤可抑制HFLS-RA增殖及其分泌IL-1、IL-6、MMP-3、PGE 2的能力。 展开更多

关键词 苦皮藤 类风湿关节炎 类风湿性关节炎成纤维滑膜细胞 肿瘤细胞因子-α 细胞因子

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红景天含药血清对肿瘤坏死因子α诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响 被引量：6

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作者 田乐 朴松兰 +1 位作者 何艳新 潘志 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期287-292,共6页

目的探讨红景天含药血清对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)增殖的影响。方法制备空白组、模型组、雷公藤多苷组(9.45 mg·kg^(-1))及红景天低、中、高剂量组(1.05、2.1、4.2 g·kg^(-1))... 目的探讨红景天含药血清对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)增殖的影响。方法制备空白组、模型组、雷公藤多苷组(9.45 mg·kg^(-1))及红景天低、中、高剂量组(1.05、2.1、4.2 g·kg^(-1))大鼠含药血清;体外培养HFLS-RA,以20 ng·mL^(-1)TNF-α及10%不同组含药血清对HFLS-RA进行干预。采用MTT法检测各组含药血清对HFLS-RA细胞的增殖作用;ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素10(IL-10)的含量;PCR法检测细胞中维甲酸受体相关孤儿受体γt(ROR-γt)、信号转导及转录激活因子3(Stat3)、叉头样转录因子3(Foxp3)mRNA表达;Western Blot法检测细胞中ROR-γt、Stat3、Foxp3蛋白表达。结果与空白组比较,模型组培养HFLS-RA 24、48 h后细胞增殖水平明显升高(P<0.01),ROR-γt、Stat3 mRNA及蛋白表达上调(P<0.01),IL-6、IL-17水平升高(P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达下调(P<0.01),TGF-β、IL-10水平降低(P<0.01)。与模型组比较,红景天各剂量组HFLS-RA细胞增殖水平降低(P<0.01),ROR-γt、Stat3mRNA及蛋白表达下调(P<0.05,P<0.01),IL-6、IL-17水平降低(P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达上调(P<0.01),TGF-β、IL-10水平升高(P<0.01)。结论红景天含药血清可抑制TNF-α诱导的HFLS-RA细胞的异常增殖,其机制可能与下调ROR-γt、Stat3表达及上调Foxp3表达有关。 展开更多

关键词 红景天含药血清 人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 维甲酸受体相关孤儿受体γt 信号转导及转录激活因子3 叉头样转录因子3 细胞增殖 肿瘤坏死因子Α

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黄芩苷对人成纤维细胞样滑膜细胞(类风湿关节炎)的影响研究 被引量：6

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作者 王宏志 葛存兴 +2 位作者 王广志 赵晶 姜楠 《齐齐哈尔医学院学报》 2017年第2期129-131,共3页

目的探讨黄芩苷对人成纤维细胞样滑膜细胞(类风湿关节炎)(HFLS-RA)分泌IL-1β、TNF-a水平和NF-κB信号转导通路的影响,为黄芩苷应用于类风湿关节炎临床治疗提供实验依据。方法将购买的HFLS-RA细胞进行传代培养,选用4-7代HFLS-RA进行细... 目的探讨黄芩苷对人成纤维细胞样滑膜细胞(类风湿关节炎)(HFLS-RA)分泌IL-1β、TNF-a水平和NF-κB信号转导通路的影响,为黄芩苷应用于类风湿关节炎临床治疗提供实验依据。方法将购买的HFLS-RA细胞进行传代培养,选用4-7代HFLS-RA进行细胞增殖试验(MTT)和药物实验研究。黄芩苷不同浓度组:HFLS-RA无血清的基础培养液中加入不同浓度的黄芩苷(10、20、30μm)及MTX 10μg/ml孵育24小时。对照组:HFLS-RA无血清基础培养液不加任何药物培养24小时。ELISA定量检测细胞培养上清液中TNF-α和IL-1β水平,western blot检测滑膜细胞中NF-κB p65、phospho-NF-κB p65(Ser536)和Acetyl-NF-κB p65(Lys310)蛋白表达。结果黄芩苷能明显降低细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β含量,抑制滑膜细胞中NF-κB p65、phospho-NF-κB p65(Ser536)和Acetyl-NF-κB p65(Lys310)蛋白水平表达。结论黄芩苷抑制人成纤维细胞样滑膜细胞(类风湿关节炎)(HFLS-RA)可能是通过抑制炎性细胞因子产生和NF-κB信号转导途径而发挥治疗作用的。 展开更多

关键词 黄芩苷 类风湿关节炎 人成纤维细胞样滑膜细胞(类风湿关节炎)(HFLS-RA) NF-ΚB

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黄芩苷调节let-7i-3p/PI3K/Akt/NF-κB信号轴减轻类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞NLRP3炎性小体活化 被引量：1

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作者 张炜 王莉 +4 位作者 杨雨欣 马锐 王丽 黄菱 万巧凤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2313-2319,共7页

目的研究黄芩苷减轻类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(human fibroblast like synoviocytes of rheumatoid arthritis,HFLS-RA)NLRP3炎性小体活化的作用及机制。方法为证实黄芩苷减轻HFLS-RA中NLRP3炎性小体活化,采用免疫荧光观察黄芩苷处... 目的研究黄芩苷减轻类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(human fibroblast like synoviocytes of rheumatoid arthritis,HFLS-RA)NLRP3炎性小体活化的作用及机制。方法为证实黄芩苷减轻HFLS-RA中NLRP3炎性小体活化,采用免疫荧光观察黄芩苷处理前后NLRP3的表达;Western blot检测黄芩苷处理48 h后,p-PI3K、p-Akt、NF-κB p65、NLRP3、ASC及caspase-1蛋白的表达;ELISA检测细胞上清中IL-1及IL-18的含量。为探究黄芩苷减轻NLRP3炎性小体活化的机制,采用双荧光素酶及Western blot验证let-7i-3p与PIK3CA的对应关系;RT-qPCR检测黄芩苷干预前后let-7i-3p及PI3K的表达;采用let-7i-3p干扰,验证黄芩苷是否减轻了增强的NLRP3炎性小体的活化。结果50、100 mg·L^(-1)黄芩苷明显减轻了NLRP3炎性小体的活化,抑制p-PI3K、p-Akt、NF-κB p65、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白的表达,抑制IL-1、IL-18的分泌。let-7i-3p与PIK3CA存在靶向对应关系,黄芩苷上调了let-7i-3p的表达、下调了PIK3CA的表达;黄芩苷减轻了因let-7i-3p干扰而增强的NLRP3炎性小体的活化。结论黄芩苷经上调let-7i-3p表达、抑制PI3K/Akt/NF-κB信号转导,从而减轻NLRP3炎性小体的活化。 展开更多

关键词 黄芩苷 类风湿关节炎 类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 NLRP3炎性小体 miRNA 双荧光素酶

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丹皮酚对IL-1β诱导HFLS-RA的保护作用及相关机制研究 被引量：4

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作者 李梅 欧大明 +2 位作者 黄丽芳 谢立虎 张济 《天津医药》 CAS 北大核心 2021年第3期252-257,I0004,共7页

目的探讨丹皮酚对白细胞介素(IL)-1β诱导人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)的保护作用及机制。方法将HFLS-RA细胞分为空白对照组,10μg/L IL-1β组及0.1、1、10、100μmol/L丹皮酚组,采用MTT法检测细胞增殖情况;酶联免疫吸附测... 目的探讨丹皮酚对白细胞介素(IL)-1β诱导人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)的保护作用及机制。方法将HFLS-RA细胞分为空白对照组,10μg/L IL-1β组及0.1、1、10、100μmol/L丹皮酚组,采用MTT法检测细胞增殖情况;酶联免疫吸附测定试验(ELISA)法检测HFLS-RA中肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6水平。采用免疫荧光法观察空白对照组、10μg/L IL-1β组及10μmol/L丹皮酚组HFLS-RA中核因子(NF)-κB p65细胞核移位情况;Western blot法检测空白对照组,10μg/L IL-1β组,0.1、1、10μmol/L丹皮酚组及阴性对照组(仅10μmol/L丹皮酚处理)的基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3和Toll样受体-4(TLR4)蛋白表达。将24只雄性DBA/1小鼠随机均分为对照组、CIA组和治疗组,对小鼠进行四肢累计评分,HE染色观察关节组织病理学变化,ELISA法检测滑膜组织中TNF-α、IL-1β水平。结果丹皮酚对IL-1β诱导HFLS-RA细胞增殖无明显抑制作用。与空白对照组相比,10μg/L IL-1β组TNF-α、IL-6、NF-κB p65核移位、MMP-1、MMP-3和TLR4蛋白表达水平均升高,而经丹皮酚干预后可逆转这些改变(P<0.05)。与CIA组相比,治疗组小鼠四肢累计评分明显下降(P<0.05);HE染色结果示丹皮酚治疗48 d时踝关节病理变化有所改善,其中炎性细胞明显下降,软骨破坏减轻。治疗组小鼠滑膜组织中TNF-α、IL-1β水平低于CIA组。结论丹皮酚具有减轻IL-1β诱导HFLS-RA炎性因子表达和缓解CIA小鼠关节炎症状的作用,其机制可能与抑制TLR-4-NF-κB p65通路,减轻炎症反应有关。 展开更多

关键词 关节炎 类风湿 牡丹皮 白细胞介素1Β NF-κB 基质金属蛋白酶类 丹皮酚 人成纤维样滑膜细胞

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has-miR-497-5p靶向CCNE1对类风湿性关节炎滑膜细胞增殖的影响

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作者 范爱玉 骆芳茗 +3 位作者 谢卫勇 范爱霞 杜燕娜 闵水平 《滨州医学院学报》 2023年第1期13-18,共6页

目的 评价has-miR-497-5p对类风湿性关节炎滑膜细胞(HFLS-RA)增殖的影响。方法 利用miRDB、TargetMiner、TargetScan和miRTarBase数据库预测has-miR-497-5p的作用靶基因,然后利用DAVID数据库对靶基因进行GO分析和KEGG信号通路富集,Strin... 目的 评价has-miR-497-5p对类风湿性关节炎滑膜细胞(HFLS-RA)增殖的影响。方法 利用miRDB、TargetMiner、TargetScan和miRTarBase数据库预测has-miR-497-5p的作用靶基因,然后利用DAVID数据库对靶基因进行GO分析和KEGG信号通路富集,String数据库对靶基因进行互作分析;以HFLS-RA为研究对象,MTT检测has-miR-497-5p对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测has-miR-497-5p对细胞周期的影响;利用qRT-PCR检测has-miR-497-5p对HFLS-RA细胞CCNE1、CCND1、CCND2和CDK6 mRNA的影响;MTT评价has-miR-497-5p在沉默CCNE1后对细胞增殖的影响。结果 生物信息学预测has-miR-497-5p的靶基因共计125个,生物学过程主要集中于胸腺发育、蛋白质磷酸化、细胞凋亡和细胞周期等方面;信号途径主要富集于癌症相关的microRNA、PI3K-Akt途径和细胞周期等;细胞周期中的富集蛋白互作分析显示,CCNE1、CCND1、CCND2和CDK6之间存在相互作用;has-miR-497-5p过表达可以显著抑制细胞增殖(P<0.05),明显抑制细胞周期的S期(P<0.05);qRT-PCR结果显示,has-miR-497-5p模拟剂可以显著降低CCNE1、CCND1、CCND2和CDK6 mRNA表达(P<0.05);沉默CCNE1显著抑制细胞增殖(P<0.05)。结论 has-miR-497-5p可能通过靶向CCNE1抑制HFLS-RA增殖。 展开更多

关键词 has-miR-497-5p G1/S特异性细胞周期蛋白E1 类风湿性关节炎滑膜细胞 细胞增殖

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青藤碱对脂多糖诱导的人成纤维滑膜细胞增殖的影响 被引量：3

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作者 王中扬 吴祥 +3 位作者 包东桥 黄艳 李育 卞慧敏 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期46-50,共5页

目的:探讨青藤碱(Sinomenine)对脂多糖诱导的人成纤维样滑膜细胞(Human fibroblast-like synoviocyte,HFLS)增殖的作用及其机制。方法:随机分为空白对照组、脂多糖模型组、青藤碱10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L组。利用脂多糖诱导HFL... 目的:探讨青藤碱(Sinomenine)对脂多糖诱导的人成纤维样滑膜细胞(Human fibroblast-like synoviocyte,HFLS)增殖的作用及其机制。方法:随机分为空白对照组、脂多糖模型组、青藤碱10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L组。利用脂多糖诱导HFLS的增殖,48 h后加入不同浓度的青藤碱,通过MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western Blot检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、P53、细胞周期依赖激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白D(CyclinD)的表达,检测核转录因子-κB(NF-κB)、核因子κB受体活化因子(RANK)、核因子κB受体活化因子配体(RANK-L)蛋白表达;ELISA法检测白介素10(IL-10)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白介素1β(IL-1β)的含量。结果:MTT结果显示与空白对照组比较,模型组细胞增殖明显;与模型组比较,不同浓度的青藤碱均能抑制脂多糖诱导HFLS增殖,结果呈浓度依赖性;流式结果表明青藤碱可促进HFLS的凋亡;Western Blot结果提示与模型组相比,青藤碱组Bax、P53的蛋白表达明显升高,Cyclin D、CDK4、NF-κB、RANK、RANK-L蛋白的表达显著降低。结论:青藤碱可以通过抑制RANK及NF-κB的活化减轻脂多糖诱导的HFLS细胞的炎症反应,促进HFLS凋亡,抑制其增殖。 展开更多

关键词 青藤碱 类风湿关节炎 人成纤维样滑膜细胞 NF-ΚB

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无尾果抗类风湿关节炎的有效部位筛选研究 被引量：2

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作者 高燕萍 吴强 +3 位作者 陈芳有 黄丽萍 李燕珍 钟囯跃 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期467-472,共6页

目的观察无尾果不同提取部位对人风湿性关节炎成纤维滑膜细胞(MH7A)相关细胞因子分泌及凋亡的影响,初步筛选其抗类风湿关节炎(RA)的有效部位。方法采用肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导MH7A细胞建立类风湿关节炎滑膜细胞模型,并以无尾果总提... 目的观察无尾果不同提取部位对人风湿性关节炎成纤维滑膜细胞(MH7A)相关细胞因子分泌及凋亡的影响,初步筛选其抗类风湿关节炎(RA)的有效部位。方法采用肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导MH7A细胞建立类风湿关节炎滑膜细胞模型,并以无尾果总提物、水部位、正丁醇部位、乙酸乙酯部位和石油醚部位进行干预。采用CCK8法检测MH7A细胞的增殖活性,并计算半数抑制浓度(IC_(50));流式细胞术检测MH7A细胞凋亡;ELISA法检测TNF-α诱导MH7A细胞分泌白细胞介素(IL)-6、IL-4、IL^(-1)β、血管内皮生长因子(VEGF)、NF-κB受体活化因子配体(RANKL)水平;Western Blot法检测MH7A细胞的凋亡相关蛋白表达水平。结果无尾果总提物、水部位、正丁醇部位、乙酸乙酯部位和石油醚部位对MH7A细胞的IC_(50)值分别为223.9、99.4、123.7、497.9、>1000μg·m L^(-1)。与正常对照组比较,模型组细胞上清液中的IL-6、IL^(-1)β、IL-4、VEGF和RANKL含量显著升高(P<0.01),凋亡细胞显著增多(P<0.01),促调亡因子Bax、Caspase-9、Caspase-3和抗凋亡因子Bcl-2的蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,无尾果总提物组、水部位组和正丁醇部位组均可显著诱导MH7A细胞凋亡(P<0.01);显著降低IL-6、IL^(-1)β、VEGF和RANKL水平(P<0.01),升高IL-4水平(P<0.01);水部位组和正丁醇部位组能明显上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-9和Caspase-3的表达(P<0.01),抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达(P<0.01)。结论无尾果提取物诱导MH7A细胞凋亡及抗炎作用可能是其抗RA的机制之一,水部位和正丁醇部位为其主要药效部位。 展开更多

关键词 无尾果 人风湿性关节炎成纤维滑膜细胞(MH7A) 细胞因子 细胞凋亡 类风湿关节炎 有效部位 水部位 正丁醇部位

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DNA甲基化对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞表观遗传调控的研究进展

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作者 苗茁 曹梅琳 周海舟 《国际免疫学杂志》 CAS 2022年第5期498-502,共5页

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种由免疫介导的慢性炎症性疾病,以滑膜增生和关节破坏为特征,并受遗传和环境因素影响。然而,现有证据表明,遗传多样性和环境暴露并不能解释RA的所有临床特征和异质性,而且越来越多的研究显示... 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种由免疫介导的慢性炎症性疾病,以滑膜增生和关节破坏为特征,并受遗传和环境因素影响。然而,现有证据表明,遗传多样性和环境暴露并不能解释RA的所有临床特征和异质性,而且越来越多的研究显示表观遗传调控,尤其是DNA甲基化,可在人RA成纤维样滑膜细胞(RA fibroblast-like synoviocytes,RAFLS)中促进疾病的发展,并可能参与RA的发病。文章对RA的发病机制以及RAFLS中DNA甲基化调控进行介绍,并且简要介绍了有关疾病进展及治疗的潜在生物标志物。 展开更多

关键词 人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 自身免疫病 DNA甲基化 表观遗传调控

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Fcα受体在类风湿性关节炎人成纤维样滑膜细胞的表达与功能研究

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作者 喻晶 聂李平 +2 位作者 颜存粮 刘小平 桂耀庭 《医学研究杂志》 2012年第6期97-99,共3页

目的探讨Fcα受体在类风湿性关节炎人成纤维样滑膜细胞的表达特征及其功能。方法采用RT-PCR和免疫荧光技术,从基因和蛋白水平检测Fcα受体在类风湿性关节炎人成纤维样滑膜细胞(RA FLS)的表达;采用ELISA方法,检测IgA对RA FLS分泌IL-6的... 目的探讨Fcα受体在类风湿性关节炎人成纤维样滑膜细胞的表达特征及其功能。方法采用RT-PCR和免疫荧光技术,从基因和蛋白水平检测Fcα受体在类风湿性关节炎人成纤维样滑膜细胞(RA FLS)的表达;采用ELISA方法,检测IgA对RA FLS分泌IL-6的影响。结果采用RT-PCR和免疫荧光染色方法,均检测到Fcα受体在RA FLS的表达。sIgA与RAFLS孵育12h后,细胞分泌IL-6的水平明显增高,差异具有显著性(P<0.01)。mIgA与RA FLS孵育12h后,细胞分泌IL-6的量无明显改变(P>0.05)。sIgA+TNF-α同时与RA FLS孵育12h后,细胞分泌IL-6含量明显高于sIgA或TNF-α单一组(P<0.01)。结论 Fcα受体在类风湿性关节炎人成纤维样滑膜细胞存在表达,sIgA增高RA FLS分泌IL-6的水平,并与TNF-α产生协同作用。 展开更多

关键词 人成纤维样滑膜细胞 Fcα受体 IL-6 类风湿性关节炎

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