-
题名L-抗坏血酸促进人胚胎干细胞向心肌细胞分化的研究
- 1
-
-
作者
陈景
邱敏
张海鹏
李慧丽
张梦珍
李晓红
-
机构
广东省人民医院(广东省医学科学院)·南方医科大学附属广东省人民医院
广东省人民医院(广东省医学科学院)·南方医科大学附属广东省人民医院
广东省人民医院(广东省医学科学院)·南方医科大学附属广东省人民医院
-
出处
《生物医学工程与临床》
CAS
2023年第5期545-552,共8页
-
基金
国家自然科学基金资助项目(82170259)
广东省中医药局科研项目(20231015)。
-
文摘
目的用不同浓度的L-抗坏血酸(VitC)作为分化基础培养液中的诱导剂,观察其对人胚胎干细胞(hESC)分化为心肌细胞的影响,探寻一种成分明确、成本低廉且高效的诱导方法。方法复苏hESC,使用干细胞培养液培养至细胞融合度90%后,分别用含不同浓度(0、10、20、30、40、50、60、70μmol/L)VitC的分化培养液对其进行诱导分化,在光学显微镜下观察分化过程。用实时定量聚合酶链式反应(real-time PCR)分别检测干细胞特异性标志物Nanog和性别决定因子同源盒2(Sox2),心肌细胞特异性标志物心肌肌钙蛋白T(cTnT)、心脏特异性同源盒转录因子(Nkx2.5)的表达。用免疫荧光检测Nanog、cTnT、Nkx2.5的蛋白表达变化。结果在分化基础培养液中,低浓度VitC(10~30μmol/L)不能诱导h ESC向心肌分化,随着VitC浓度的增高,干细胞逐渐往心肌方向分化,心肌分化效率逐渐提高,Nanog和Sox2的表达量逐渐下降;VitC浓度为40μmol/L或50μmol/L组在第8天开始出现自发跳动细胞,且有cTnT和Nkx2.5阳性表达。realtime PCR结果显示随分化时间延长,cTnT和Nkx2.5的mRNA表达逐渐增加,心肌表面标志物Nkx2.5、cTnT的mRNA表达量在VitC浓度40μmol/L和50μmol/L要比60μmol/L和70μmol/L的诱导效果更高。提示浓度大于60μmol/L就开始出现抑制分化的作用。结论实验研究证实VitC在hESC向心肌分化中是不可或缺的因子,研究还明确了VitC诱导h ESC分化为心肌细胞的适宜浓度范围。
-
关键词
人胚胎干细胞(hesc)
心肌分化
心肌细胞
L-抗坏血酸(VitC)
维生素C
-
Keywords
human embryonic stem cells(hesc)
myocardium differentiation
cardiomyocytes
L-ascorbic acid
vitamin C(VitC)
-
分类号
R54
[医药卫生—心血管疾病]
-
-
题名人胚胎干细胞培养系统的研究进展
被引量：2
- 2
-
-
作者
刘雪梅
朱桂金
-
机构
华中科技大学同济医学院附属同济医院生殖中心
-
出处
《生命科学》
CSCD
2007年第3期306-310,共5页
-
文摘
人胚胎干细胞(hESC)具有永久的自我更新和多潜能分化能力,可在一定条件下定向分化为三个胚层的各种细胞。这些特性使其在再生医学(细胞治疗)、药物筛选及早期胚胎发育研究中具有重要的应用前景;但人胚胎干细胞培养系统中大量的动物源性物质和复杂的未知成份大大阻碍了其医学应用价值,所以建立一个没有动物源物质、成份确定的人胚胎干细胞培养系统是非常重要的。本文简要介绍了为适应hESC临床应用和基础研究的需要,改良其培养系统的研究进展。
-
关键词
人胚胎干细胞(hesc)
临床等级
成份确定培养基(DM)
-
Keywords
human embryonic stem cells （hesc）
clinical-grade
defined medium （DM）
-
分类号
Q813
[生物学—生物工程]
-
