-
题名中国大鲵虹彩病毒对293T细胞系的感染性研究
被引量：1
- 1
-
-
作者
罗振寰
李蔚
-
机构
暨南大学生命科学技术学院
-
出处
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期291-299,共9页
-
基金
广东省自然科学基金(项目号:2015A030320515)
题目:中国大鲵虹彩病毒(CGSIV)PCNA在病毒感染中的功能研究。
-
文摘
中国大鲵虹彩病毒(Chinese giant salamander iridovirus,CGSIV)属于虹彩病毒科蛙病毒属,对两栖类具有强致病率,给两栖类养殖业带来了严重的经济损失。本研究将人胚肾细胞系(293T)作为CGSIV的潜在宿主细胞系,通过验证26℃下CGSIV对293T细胞的感染性及病毒特性,为将293T发展成为CGSIV病毒研究的细胞系模型打下基础。利用PCR、Western Blot和透射电镜等技术对CGSIV感染293T细胞及其在293T细胞中的基因表达、病毒复制及子代病毒等进行验证;并通过半数组织培养感染剂量(Median tissue culture infectious dose,TCID50)法和绝对定量qPCR检测CGSIV在293T中的病毒滴度及病毒含量。结果表明:293T在接种CGSIV 72 h时出现了典型的病变特征;成功在受感染的293T细胞内检测到CGSIV基因组及病毒相关基因的转录和翻译,表明CGSIV能够成功感染293T细胞并在细胞内顺利完成病毒相关基因的表达;通过透射电镜观察到293T细胞内呈晶格状排列且横切面为正六边形的病毒粒子,病毒感染实验显示其病毒粒子能够感染鲤鱼上皮瘤细胞(Epithelioma papulosum cyprinid,EPC),表明CGSIV能够在293T细胞内顺利完成其生活周期,产生具感染力的完整子代病毒;CGSIV在293T细胞内的病毒滴度约为2.26×105TCID50/mL;CGSIV在293T细胞中的复制时序表明病毒在感染24 h内复制缓慢,36 h后进入复制高峰期并延续于整个感染周期内。综上,在26℃下,CGSIV能够感染293T细胞系,并在细胞内完成其生活周期,产生具有感染力的完整子代病毒;另外,CGSIV对293T细胞的感染与鱼类细胞相比,其感染病变时间也有所延长。本研究为发展293T细胞作为CGSIV病毒研究的细胞系新模型奠定了基础。
-
关键词
中国大鲵虹彩病毒(CGSIV)
人胚肾细胞系(293T)
病毒感染
病毒生活周期
细胞系模型
-
Keywords
Chinese giant salamander iridovirus(CGSIV)
human embryonic kidney cell line(293T)
Virus infectivity
Virus lifecycle
cell line model
-
分类号
S941.41
[农业科学—水产养殖]
-
-
题名人胚胎肾细胞系HEK293中的翻译调控
- 2
-
-
作者
柳满
任悦
高玉风
王芳
余佳
-
机构
中国医学科学院基础医学研究所
-
出处
《基础医学与临床》
2021年第5期630-635,共6页
-
基金
国家自然科学基金(81970103)。
-
文摘
目的探讨人胚胎肾细胞系HEK293中的翻译调控。方法通过Polysome profiling结合Western blot实验检测并验证HEK293细胞中mRNA的翻译活性;通过针对RPL10A和RPS17两种核糖体蛋白的RNA免疫共沉淀、建库测序(RIP-seq)及生物信息学分析,获得参与HEK293细胞蛋白质合成调控的相关分子。结果在两种核糖体蛋白的RNA免疫共沉淀实验富集的分子中共有129种基因,其中93.8%为蛋白质编码基因;且功能与RNA剪接、分解代谢、MAPK信号通路、染色体定位、RNA转运等相关。结论通过针对核糖体蛋白的RNA免疫共沉淀可以获得HEK293细胞中活跃翻译的mRNA。
-
关键词
人胚胎肾细胞系293
Polysome
profiling
RNA结合蛋白
免疫共沉淀
-
Keywords
human embryonic kidney 293 cell line
Polysome profiling
RNA binding protein
immunoprecipitation
-
分类号
Q522
[生物学—生物化学]
-
