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人巨细胞病毒重组基因表达质粒的构建
被引量：
3
1
作者
郑育声
谢琪璇
+2 位作者
潘善培
芦春斌
肖銮娟
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第6期716-718,共3页
目的 用基因工程技术克隆人巨细胞病毒 (Humancytomegalovirus ,HCMV)中抗原性较强的蛋白片段—gp5 2C末端和pp15 0C末端的DNA序列 ,插入pPIC9K质粒 ,构建适于酵母表达系统的重组表达质粒。方法 根据人巨细胞病毒糖蛋白gp5 2和磷酸蛋...
目的 用基因工程技术克隆人巨细胞病毒 (Humancytomegalovirus ,HCMV)中抗原性较强的蛋白片段—gp5 2C末端和pp15 0C末端的DNA序列 ,插入pPIC9K质粒 ,构建适于酵母表达系统的重组表达质粒。方法 根据人巨细胞病毒糖蛋白gp5 2和磷酸蛋白pp15 0C末端的cDNA序列 ,设计出 2对引物。利用PCR的方法 ,以病毒培养液上清为模板 ,进行二轮PCR扩增 ,把两个目的基因串联在一起 ,将所得的DNA片段经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后用T4连接酶与pPIC9K质粒进行连接 ,然后导入大肠杆菌DH5α ,筛选出阳性转化子 ,并用PCR和双酶切鉴定阳性重组子。结果 从人巨细胞病毒培养液上清中扩增出目的基因 ,PCR反应和双酶切鉴定结果与预期相符。
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关键词
基因表达
人巨细胞病毒
重组PCR
质粒pPIC9K
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职称材料
用核酸杂交技术检测抗病毒i-RNA制剂中病毒核酸的残留及其在免疫小鼠体内的动态变化
2
作者
谢光临
杨明久
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
1993年第5期344-346,共3页
以生物素化dUTP标记CI(?)、株基因组Hind Ⅲ酶切Y片段为探针,用核酸杂交技术检测抗HCMV-iRNA制剂中巨细胞病毒核酸的残留,同时用HCMV免疫小鼠观察病毒核酸在小鼠体内的存留时间。结果,HCMV DNA在小鼠体内的存留时间有明显的个体差异,而...
以生物素化dUTP标记CI(?)、株基因组Hind Ⅲ酶切Y片段为探针,用核酸杂交技术检测抗HCMV-iRNA制剂中巨细胞病毒核酸的残留,同时用HCMV免疫小鼠观察病毒核酸在小鼠体内的存留时间。结果,HCMV DNA在小鼠体内的存留时间有明显的个体差异,而与HCMV DNA有同源序列的RNA在免疫后7天被清除。在4批来自羊肝、脾组织的抗HCMV-iRNA 制剂中,有3批查出HCMV核酸。
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关键词
巨细胞病毒
免疫核糖核酸
DNA探针
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职称材料
题名
人巨细胞病毒重组基因表达质粒的构建
被引量：
3
1
作者
郑育声
谢琪璇
潘善培
芦春斌
肖銮娟
机构
暨南大学生殖免疫研究中心
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第6期716-718,共3页
基金
深圳市科技计划科研课题资助项目
文摘
目的 用基因工程技术克隆人巨细胞病毒 (Humancytomegalovirus ,HCMV)中抗原性较强的蛋白片段—gp5 2C末端和pp15 0C末端的DNA序列 ,插入pPIC9K质粒 ,构建适于酵母表达系统的重组表达质粒。方法 根据人巨细胞病毒糖蛋白gp5 2和磷酸蛋白pp15 0C末端的cDNA序列 ,设计出 2对引物。利用PCR的方法 ,以病毒培养液上清为模板 ,进行二轮PCR扩增 ,把两个目的基因串联在一起 ,将所得的DNA片段经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后用T4连接酶与pPIC9K质粒进行连接 ,然后导入大肠杆菌DH5α ,筛选出阳性转化子 ,并用PCR和双酶切鉴定阳性重组子。结果 从人巨细胞病毒培养液上清中扩增出目的基因 ,PCR反应和双酶切鉴定结果与预期相符。
关键词
基因表达
人巨细胞病毒
重组PCR
质粒pPIC9K
Keywords
human
cytomegalvirus
recombinant
PCR
plasmid
pPIC9K
分类号
R373.9 [医药卫生—病原生物学]
Q343 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
用核酸杂交技术检测抗病毒i-RNA制剂中病毒核酸的残留及其在免疫小鼠体内的动态变化
2
作者
谢光临
杨明久
机构
中国医科大学基础医学部免疫研究室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
1993年第5期344-346,共3页
文摘
以生物素化dUTP标记CI(?)、株基因组Hind Ⅲ酶切Y片段为探针,用核酸杂交技术检测抗HCMV-iRNA制剂中巨细胞病毒核酸的残留,同时用HCMV免疫小鼠观察病毒核酸在小鼠体内的存留时间。结果,HCMV DNA在小鼠体内的存留时间有明显的个体差异,而与HCMV DNA有同源序列的RNA在免疫后7天被清除。在4批来自羊肝、脾组织的抗HCMV-iRNA 制剂中,有3批查出HCMV核酸。
关键词
巨细胞病毒
免疫核糖核酸
DNA探针
Keywords
human
cytomegalvirus
(HCMV)
i-RNA
biotin-labelled
DNA
probe
分类号
R446.62 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人巨细胞病毒重组基因表达质粒的构建
郑育声
谢琪璇
潘善培
芦春斌
肖銮娟
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
3
下载PDF
职称材料
2
用核酸杂交技术检测抗病毒i-RNA制剂中病毒核酸的残留及其在免疫小鼠体内的动态变化
谢光临
杨明久
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
1993
0
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职称材料
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