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人类羊膜细胞表达神经干细胞特异性蛋白研究 被引量:8
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作者 蔡哲 潘琳 +5 位作者 舒峻 张岚 郭艳茹 耿同超 牟亮 左萍萍 《中国康复理论与实践》 CSCD 2005年第12期965-967,i0001,共4页
目的利用神经干细胞特异性标志蛋白鉴定人类羊膜组织中多分化潜能神经前体细胞的存在。方法利用免疫组织化学法检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中巢蛋白(nestin)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、musashi-1、波形蛋白(vi mentin)和PSA-N... 目的利用神经干细胞特异性标志蛋白鉴定人类羊膜组织中多分化潜能神经前体细胞的存在。方法利用免疫组织化学法检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中巢蛋白(nestin)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、musashi-1、波形蛋白(vi mentin)和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白的表达。结果人羊膜组织中存在nestin/GFAP双阳性细胞,此外,还表达musashi-1、vi mentin和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白;培养羊膜细胞中存在vi mentin和PSA-NCAM阳性细胞,以及nestin/GFAP双阳性细胞。结论羊膜组织和培养羊膜细胞中有神经干细胞特异性标记蛋白的表达。 展开更多
关键词 人类羊膜细胞 神经前体细胞 巢蛋白 MUSASHI-1
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人羊膜匀浆上清液对兔角膜上皮细胞中bFGF表达的影响 被引量:3
2
作者 杨雅岚 席兴华 +2 位作者 唐罗生 王丛香 林丁 《国际眼科杂志》 CAS 2012年第9期1639-1643,共5页
目的:观察不同浓度人羊膜匀浆上清液对体外培养的兔角膜上皮细胞碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)表达的影响,探讨人羊膜匀浆上清液在促进角膜上皮损伤修复中的作用。方法:将兔角膜上皮细胞离体培养并传代... 目的:观察不同浓度人羊膜匀浆上清液对体外培养的兔角膜上皮细胞碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)表达的影响,探讨人羊膜匀浆上清液在促进角膜上皮损伤修复中的作用。方法:将兔角膜上皮细胞离体培养并传代,然后分组。实验组分别在含100mL/L胎牛血清的DMEM培养液中分别加入终浓度为40,80,160μg/mL的人羊膜匀浆上清液,对照组仅用100mL/L胎牛血清的DMEM培养液。分别在培养24,48和96h后,采用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法观察人羊膜匀浆上清液对兔角膜上皮细胞增殖的影响。同时,采用RT-PCR技术检测三个不同等级浓度对兔角膜上皮细胞bFGF-mRNA表达的影响。结果:培养24h后,与对照组(0.087±0.013)比较,加入终浓度为40,80,160μg/mL人羊膜匀浆上清液的实验组角膜上皮细胞增殖数量(分别为0.185±0.010,0.318±0.015,0.501±0.014)明显增加,差异具有显著性(P<0.05);同时,随着作用时间的延长,差异愈加明显;加入40μg/mL和80μg/mL浓度羊膜匀浆上清液组兔角膜的bFGF-mRNA(分别为0.750±0.007,0.785±0.006)和空白对照组(0.708±0.013)比较,差异无显著性意义(P>0.05),但160μg/mL浓度羊膜匀浆上清液组(1.013±0.120)与其它两组及对照组(0.708±0.013)比较,差异均具有显著性(P<0.05)。结论:人羊膜匀浆上清液具有促进兔角膜上皮细胞增殖的作用,并随着人羊膜匀浆上清液所含蛋白浓度的增加,其促进作用增强;人羊膜匀浆上清液具有促进体外培养的兔角膜上皮细胞bFGF-mRNA表达的作用,但与羊膜匀浆上清液的浓度有关。 展开更多
关键词 人羊膜 匀浆上清液 角膜上皮细胞 碱性成纤维细胞生长因子
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携带XylE基因的穿梭质粒诱变分析系统在诱变剂检测中的应用 被引量:1
3
作者 邱晓云 古祝芳 +2 位作者 卢大儒 邱信芳 薛京伦 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1995年第6期321-324,共4页
以邻苯二酚氧化酶基因-xylE为靶基因,以新霉素抗性基因neo为选择基因构建的pESnx穿梭质粒转染人羊膜细胞FL,得到一株携带有完整的自主复制型pESnx质粒的G418抗性细胞株FESl.7。经测定该细胞株平均每细... 以邻苯二酚氧化酶基因-xylE为靶基因,以新霉素抗性基因neo为选择基因构建的pESnx穿梭质粒转染人羊膜细胞FL,得到一株携带有完整的自主复制型pESnx质粒的G418抗性细胞株FESl.7。经测定该细胞株平均每细胞含有质粒26个拷贝,且在8个月的传代培养中保持稳定,pESnx质粒在FES1.7细胞内xylE基因的自发突变率仅4.3×10-5。因此由FES1.7细胞构成的系统可在人体细胞中进行诱变检测。该系统灵敏度高,可对低效诱变剂在人体中引起的基因突变进行检测,而且特别适合于研究人体细胞中基因突变的分子机制。利用此EBV-xylE穿梭质粒诱变分析系统我们已对EMS进行了诱变分析,对于FEs1.7细胞,189uMEMS诱发的xylE基因突变超过自发突变频率达22倍。EMS处理细胞24小时能引起细胞内的质粒在xylE基因座位上发生缺失突变。 展开更多
关键词 诱发突变 诱变剂 靶基因 穿梭质粒 诱变检测
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人羊膜间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响 被引量:5
4
作者 喻皇飞 方宁 +5 位作者 陈代雄 余丽梅 章涛 刘祖林 万卫红 赵春华 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2012年第4期411-415,共5页
目的观察人羊膜间充质干细胞(hAD—MSCs)移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响。方法建立大鼠脊髓全横断损伤模型,脊髓横断后立即以明胶海绵吸附10μlhAD—MSCs(约2×10^5个)或等量PBS液植入脊髓两断端之间。术后每周应用BBB... 目的观察人羊膜间充质干细胞(hAD—MSCs)移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响。方法建立大鼠脊髓全横断损伤模型,脊髓横断后立即以明胶海绵吸附10μlhAD—MSCs(约2×10^5个)或等量PBS液植入脊髓两断端之间。术后每周应用BBB评分评价大鼠后肢运动功能;采用免疫荧光染色观察hAD—MSCs在脊髓内的存活、分化情况;免疫组织化学染色观察受损脊髓远端组织NF-200表达。结果hAD—MSCs移植组神经功能明显恢复,BBB评分逐周增加,与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。hAD—MSCs植入后2周在宿主脊髓中存在MAB1281染色阳性细胞,但不表达MAP-2和GFAP。hAD—MSCs移植后大鼠受损脊髓远端神经组织NF-200表达明显强于对照组。结论hAD—MSCs移植可促进大鼠脊髓损伤后的神经功能恢复,其机制可能与hAD—MSCs促进受损脊髓远端组织表达NF-200有关。 展开更多
关键词 大鼠 脊髓损伤 移植 人羊膜间充质干细胞
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复方丹参注射液对JNK信号通路调节人羊膜上皮细胞AQP3表达的影响 被引量:4
5
作者 王晶晶 华莹 +2 位作者 周青峰 谢爱兰 朱雪琼 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期931-935,共5页
目的探讨复方丹参注射液调节人羊膜上皮细胞中水通道蛋白3(aquaporin 3,AQP3)的表达与c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号通路的关系。方法分别取足月妊娠的正常羊水和羊水过少的人羊膜上皮细胞进行原代培养。将培养... 目的探讨复方丹参注射液调节人羊膜上皮细胞中水通道蛋白3(aquaporin 3,AQP3)的表达与c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号通路的关系。方法分别取足月妊娠的正常羊水和羊水过少的人羊膜上皮细胞进行原代培养。将培养的正常羊水和羊水过少的人羊膜上皮细胞分别分成4个处理组:空白对照组(A组)、SP600125组(B组)、复方丹参注射液组(C组)和SP600125加复方丹参注射液组(D组)。采用cell counting kit-8(CCK-8)法检测各组细胞的活力,Western blot技术分析人羊膜上皮细胞中总JNK、磷酸化JNK(p-JNK)和AQP3蛋白的表达量。结果(1)在正常羊水及羊水过少人羊膜上皮细胞中:4组细胞活力和总JNK蛋白差异均无统计学意义(P>0.05)。p-JNK差异有统计学意义(P<0.05)。与A组比较,p-JNK在B组表达明显下降,而在C组中其表达明显上调(P<0.05)。且p-JNK在D组中的表达较C组明显下降,但高于A组和B组(P<0.05)。与A组比较,在正常羊水人羊膜上皮细胞中,C、D组中AQP3表达明显上调(P<0.05)。但与C组比较,D组AQP3表达差异无统计学意义(P>0.05)。而在羊水过少人羊膜上皮细胞中,B组中AQP3的表达明显下降(P<0.05),而C组中AQP3表达明显上调(P<0.05);D组中AQP3表达低于C组(P<0.05),但高于B组(P<0.05)。结论羊水过少时,复方丹参注射液可通过激活JNK信号通路来调节人羊膜上皮细胞中AQP3表达的水平。 展开更多
关键词 水通道蛋白3 C-JUN氨基末端激酶 人羊膜上皮细胞 复方丹参注射液
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大气中不同粒径颗粒物诱导人羊膜FL细胞UDS的研究 被引量:4
6
作者 原福胜 邢权 马亚萍 《环境与健康杂志》 CAS CSSCI CSCD 北大核心 1994年第2期49-51,共3页
本研究以诱导人羊膜细胞UDS为指标,对太原市大气不同粒径的颗粒物提取液进行了致突变性检验,结果表明,不同粒径颗粒物的提取液均可产生一定的遗传毒性,尤以3.3μm以下的颗粒物的遗传毒性较强。
关键词 大气监测 颗粒物 人羊膜细胞 UDS
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人羊膜间充质干细胞归巢至小鼠急性损伤肝组织及其致瘤性 被引量:3
7
作者 李岩 丛姗 +3 位作者 宋瑾 张钰堃 白立恒 曹贵方 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1544-1549,共6页
将小鼠随机分为治疗组和对照组,按20μL/g的剂量腹腔注射10%CCl4溶液,每周2次,连续注射4周,建立小鼠急性肝损伤模型。建模后24h,治疗组尾静脉移植经Dir标记的人羊膜间充质干细胞0.2mL;对照组移植等量未经Dir标记的人羊膜间充质干细胞。... 将小鼠随机分为治疗组和对照组,按20μL/g的剂量腹腔注射10%CCl4溶液,每周2次,连续注射4周,建立小鼠急性肝损伤模型。建模后24h,治疗组尾静脉移植经Dir标记的人羊膜间充质干细胞0.2mL;对照组移植等量未经Dir标记的人羊膜间充质干细胞。使用小动物活体成像系统观察人羊膜间充质干细胞在小鼠体内分布。将NOD/SCID小鼠随机分为3组,试验组注射0.2 mL人羊膜间充质干细胞细胞悬液,阳性对照组注射0.2 mL Hep G2细胞悬液,阴性对照组只注射等量Matrigel和PBS的1∶1混合液。60d后脱颈处死小鼠,观察肿瘤形成情况并进行病理组织学检查。结果显示,活体成像试验发现,人羊膜间充质干细胞移植后2h,全身只有肝脏区域有荧光,人羊膜间充质干细胞移植后1d,肝脏及肺脏附近荧光信号达到最强,移植3d,肺部强荧光消失,肝部附近强荧光仍存在,移植后7~30d,全身各处荧光信号消失,但肝部荧光信号持续存在。体内致瘤试验发现,阳性对照组小鼠有肿瘤形成,而注射人羊膜间充质干细胞的试验组小鼠和阴性对照组小鼠均未观察到肿瘤形成。结果表明,人羊膜间充质干细胞尾静脉移植入急性肝损伤小鼠,可以成功归巢至肝脏并长期定植存在;人羊膜间充质干细胞在体内没有致瘤性,具有一定的临床安全性。 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞 干细胞移植 NOD SCID小鼠 活体成像 致瘤性
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人羊膜间充质干细胞静脉移植后在心肌梗死大鼠体内的定植及分化 被引量:2
8
作者 王钰莹 方宁 +3 位作者 陈代雄 余丽梅 刘祖林 万雪 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1583-1586,共4页
目的观察大鼠心肌梗死(MI)后经静脉移植的人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)在体内的定植、分化及对心功能的影响。方法SD大鼠随机分为hAD-MSCs移植组,模型组和假手术组各12只。分离hAD-MSCs用流式细胞仪和免疫组化染色鉴定其表型特征。制模... 目的观察大鼠心肌梗死(MI)后经静脉移植的人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)在体内的定植、分化及对心功能的影响。方法SD大鼠随机分为hAD-MSCs移植组,模型组和假手术组各12只。分离hAD-MSCs用流式细胞仪和免疫组化染色鉴定其表型特征。制模后1 w经舌下静脉移植Brdu标记的hAD-MSCs,于移植后6 w将大鼠心脏取出并切片行组织病理学、免疫组织化学、双重免疫荧光染色等检测,以观察植入的细胞在MI区的定植、分化,在肝、脾中的分布情况。结果分离的hAD-MSCs具有典型的间充质干细胞表型特征,高表达CD44和波形蛋白;静脉移植后6 w,心脏MI区、肺脏和脾脏中均可见Brdu阳性细胞,但在肝脏中未见阳性细胞,移植的hAD-MSCs表达心肌特异蛋白连接蛋白-43和α-辅肌动蛋白。移植后6 w,移植组大鼠心功能没有进一步恶化。结论 hAD-MSCs经静脉移植能够定植于大鼠MI区域,可分化为心肌细胞,并改善心功能。 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞 心肌梗死 细胞移植
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人羊膜间充质干细胞对四氯化碳诱导小鼠肝损伤定位修复的研究 被引量:3
9
作者 丛姗 王秀梅 +3 位作者 李岩 宋瑾 白立恒 曹贵方 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期14-23,共10页
目的:观察活体染料羧基荧光素乙酰乙酸(CFSE)标记的人羊膜间充质干细胞对四氯化碳诱导小鼠肝损伤模型的定位修复情况。方法:采用胰蛋白酶-胶原酶消化法从羊膜组织中分离间充质干细胞,通过流式细胞术和免疫荧光等方法进行鉴定。模型组按... 目的:观察活体染料羧基荧光素乙酰乙酸(CFSE)标记的人羊膜间充质干细胞对四氯化碳诱导小鼠肝损伤模型的定位修复情况。方法:采用胰蛋白酶-胶原酶消化法从羊膜组织中分离间充质干细胞,通过流式细胞术和免疫荧光等方法进行鉴定。模型组按浓度为20μl/g剂量的四氯化碳和橄榄油混合液诱导小鼠肝损伤,治疗组经小鼠尾静脉注射羧基荧光素乙酰乙酸标记的人羊膜间充质干细胞约1×106个/ml。分别取模型组和细胞移植的治疗组小鼠眼球血和肝组织进行相关检测。结果:分离得到纯度较高的羊膜间充质干细胞;冰冻切片免疫荧光显示移植1周后细胞向小鼠受损肝组织定植,CFSE标记的人羊膜间充质干细胞呈绿色荧光;细胞移植后4周,与模型组比较,细胞移植组小鼠血清中天冬氨酸转移酶、丙氨酸氨基转移酶显著降低,而白蛋白明显升高(P<0.01);肝组织病理切片模型组小鼠细胞水肿,坏死灶多见,脂肪变性,可见不同程度的炎性细胞浸润;治疗组小鼠肝组织病理学改变和损伤程度有较明显改善;小鼠肝组织冰冻切片的免疫荧光显示移植4周后人羊膜间充质干细胞周围分泌血清白蛋白。结论:羧基荧光素乙酰乙酸标记的人羊膜间充质干细胞可有效改善肝组织的生理功能,为细胞定位移植治疗肝脏疾病的修复情况提供实验数据。 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞 四氯化碳 肝损伤 定位修复 小鼠
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人羊膜间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后NGF、BDNF和Nogo-A mRNA表达的影响 被引量:2
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作者 喻皇飞 马晶晶 +4 位作者 方宁 余丽梅 章涛 刘祖林 陈代雄 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期924-929,共6页
目的:观察人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植对大鼠脊髓损伤后神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)及轴突生长抑制因子(Nogo-A)mRNA表达的影响。方法:成年雌性SD大鼠24只,随机分成hAMSCs移植组(12只)、磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(1... 目的:观察人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植对大鼠脊髓损伤后神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)及轴突生长抑制因子(Nogo-A)mRNA表达的影响。方法:成年雌性SD大鼠24只,随机分成hAMSCs移植组(12只)、磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(12只)。体外分离培养、鉴定hAMSCs,并以终浓度为10μg/ml 4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)荧光染料标记hAMSCs。在建立大鼠T11脊髓全横断损伤模型后,立即以微量注射器吸取约3×106个hAMSCs悬液于横断损伤处头尾两端原位移植,对照组注射相同体积的PBS液。分别于术后3d、7d利用荧光显微镜观察hAMSCs存活情况,并采用RT-PCR分析损伤脊髓段NGF mRNA、BDNF mRNA及Nogo-A mRNA的表达。结果:术后3d和7d hAMSCs移植组均可观察到植入的hAMSCs在宿主脊髓组织内存活。术后3d、7d,hAMSCs移植组NGF mRNA的表达均高于对照组(P<0.05,P<0.01),Nogo-A mRNA的表达均低于对照组(P<0.05);术后3d时hAMSCs移植组BDNF mRNA的表达与对照组比较无显著性差异(P>0.05),但术后7d其表达高于对照组(P<0.05)。结论:hAMSCs移植可上调大鼠受损脊髓组织内NGF mRNA和BDNF mRNA的表达、下调Nogo-A mRNA的表达,有利于促进脊髓损伤后的功能修复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 移植 人羊膜间充质干细胞 神经营养因子 大鼠
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人羊膜匀浆上清液对脂多糖致伤的大鼠肺微血管内皮细胞增殖及分泌炎症因子的影响 被引量:2
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作者 陈云鹏 王磊 +9 位作者 童亚林 刘亮 吕璐 莫永亮 詹球 阳齐琼 梁静 朱富军 龚震宇 辛海明 《感染.炎症.修复》 2015年第1期10-16,共7页
目的:探讨人羊膜匀浆上清液(hAHS)对脂多糖(LPS)致伤的大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVECs)增殖及其分泌促炎因子的影响。方法:用新鲜人羊膜制备hAHS,用考马斯亮蓝法和ELISA法分别测定hAHS中总蛋白和表皮生长因子(EGF)、碱性成纤... 目的:探讨人羊膜匀浆上清液(hAHS)对脂多糖(LPS)致伤的大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVECs)增殖及其分泌促炎因子的影响。方法:用新鲜人羊膜制备hAHS,用考马斯亮蓝法和ELISA法分别测定hAHS中总蛋白和表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、白介素-4(IL-4)、IL-10、血管生成素-1(Ang-1)、人β-防御素2(HBD2)的含量。MTT法检测不同体积分数hAHS(0、10%、15%、20%、25%)作用于RPMVECs后细胞增殖活性的变化,确定hAHS促进RPMVECs增殖的最佳浓度。根据共培养条件不同,将RPMVECs随机分为4组:N组(10%FBS+DMEM/F12),A组(10%FBS+DMEM/F12+15%hAHS),B组(10%FBS+DMEM/F12+LPS)和C组(10%FBS+DMEM/F12+15%hAHS+LPS)。各组细胞在干预后0、12、24、48、72h用MTT法测定吸光度值(A值),并分别于培养6、8、10、12、24h时用ELISA法测定RPMVECs培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-8的含量。结果:hAHS中总蛋白浓度为(725.125±12.625)mg/L,其中EGF、bFGF、VEGF、IL-4、IL-10、Ang-1、HBD2的浓度分别为(504.785±4.665)、(4.426±0.138)、(0.185±0.006)、(25.650±4.104)、(13.733±2.197)、(15.561±0.496)和(4.763±0.714)ng/L。hAHS的体积分数在10%~20%时均具有促进RPMVECs增殖的作用且以15%hAHS培养后第7、9天的增殖率最佳,而25%hAHS在第7、9、11天使RPMVECs增殖率小于0%hAHS组(P〈0.05)。A组48和72h细胞增殖活性较N组显著增加,B组24、48和72h的增殖活性较N组显著降低;C组24、48和72h的增殖活性较B组显著升高(P〈0.05)。ELISA结果显示,B组各时间点的IL-6和TNF-α的含量以及8、10、12和24h的IL-8含量均显著高于N组(P〈0.05);C组10和12h的IL-6含量,8、10、12和24h的IL-8含量及各时间点的TNF-α含量均显著低于B组(P〈0.05)。结论:hAHS含有促进组织修复、调节免疫反应、降低血管通透性及杀伤致� 展开更多
关键词 人羊膜匀浆上清液大鼠肺微血管内皮细胞脂多糖细胞增殖肺损伤 急性
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人羊膜上皮细胞在大鼠受损肝组织中分化为肝细胞 被引量:1
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作者 宫黎明 方宁 +4 位作者 陈代雄 万卫红 章涛 余丽梅 赵春华 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第9期998-1003,共6页
目的探讨人羊膜上皮细胞在大鼠损伤肝原位植活及向肝细胞分化。方法用胰蛋白酶消化法从羊膜组织中分离人羊膜上皮细胞(hAECs),用流式细胞术和免疫荧光染色进行表型分析和细胞鉴定。腹腔注射D-氨基半乳糖溶液建立大鼠肝损伤模型,随机分为... 目的探讨人羊膜上皮细胞在大鼠损伤肝原位植活及向肝细胞分化。方法用胰蛋白酶消化法从羊膜组织中分离人羊膜上皮细胞(hAECs),用流式细胞术和免疫荧光染色进行表型分析和细胞鉴定。腹腔注射D-氨基半乳糖溶液建立大鼠肝损伤模型,随机分为hAECs移植组和对照组,每组20只。造模后24 h用微量注射器于肝左、中、右叶3点分别移植L-DMEM悬浮的hAECs悬液50μL(约1×106个细胞),对照组注射等量L-DMEM。于移植后48 h、1、2和4周处死各实验组5只大鼠,取肝脏制备冰冻切片,用免疫荧光双染色检查hAECs在受损肝原位的植活、分布及其向肝细胞分化的标志物表达。结果 1)FCM分析和免疫荧光染色结果显示,所分离的hAECs表达CD29、CD166及CK19,几乎不表达CD44、CD80、CD86、HLA-DR及波形蛋白;2)免疫荧光双染色结果显示,hAECs移植后1周主要定植于肝小叶且表达AFP,至2周表达CK18,至4周表达Alb。结论 hAECs在大鼠受损肝组织中能被植活且可分化为肝细胞,提示hAECs移植在临床肝病的治疗方面可能具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 人羊膜上皮细胞 移植 分化 肝细胞 肝损伤
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人羊膜间充质干细胞在微载体动态培养体系中的扩增和成骨诱导分化 被引量:1
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作者 周倩 周燕 +1 位作者 叶朝阳 谭文松 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第6期991-996,共6页
人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)作为一种多潜能干细胞有望应用于骨组织工程。但是,传统的静态培养和诱导方法并不利于间充质干细胞的体外扩增和成骨分化。实验通过考察和比较在孔板中静态及微载体动态培养条件下hAMSCs的扩增与成骨诱导,以... 人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)作为一种多潜能干细胞有望应用于骨组织工程。但是,传统的静态培养和诱导方法并不利于间充质干细胞的体外扩增和成骨分化。实验通过考察和比较在孔板中静态及微载体动态培养条件下hAMSCs的扩增与成骨诱导,以建立集间充质干细胞增殖和成骨分化诱导为一体的动态培养体系。将hAMSCs接种到Cytodex 3微载体上,计细胞数,检测成骨诱导分化后细胞的碱性磷酸酶活性与钙基质含量,与二维静态培养系统比较;另外,基于二维培养体系进一步考察了流体刺激和胶原基质修饰对hAMSCs成骨分化的影响。结果表明:在微载体动态诱导培养条件下可获得较高的细胞数和较好的成骨诱导分化效果,提高了碱性磷酸酶活性与钙基质含量;流体刺激与包被的I型胶原均可促进hAMSCs的成骨分化,且两者联合应用时促进作用更明显。因此,基于微载体的动态培养体系可以促进间充质干细胞在骨组织再生工程中的应用。 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞 体外扩增 成骨分化 流体力学刺激 胶原基质
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金属化合物诱发人羊膜FL细胞非程序性DNA合成的研究 被引量:1
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作者 原福胜 邢权 《卫生毒理学杂志》 CSCD 1994年第1期17-19,共3页
以人羊膜FL细胞非程序性DNA合成为观察指标,对6种金属化合物进行了遗传毒性检测,其中重铬酸钾、氯化镍、醋酸铅、硫酸锰和硫酸镉可诱发非程序性DNA合成(UDS)增加,表明这些金属化合物在一定剂量时对人体遗传物质具有致... 以人羊膜FL细胞非程序性DNA合成为观察指标,对6种金属化合物进行了遗传毒性检测,其中重铬酸钾、氯化镍、醋酸铅、硫酸锰和硫酸镉可诱发非程序性DNA合成(UDS)增加,表明这些金属化合物在一定剂量时对人体遗传物质具有致突变作用。 展开更多
关键词 DNA 金属化合物 人羊膜FL细胞
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人羊膜间充质干细胞培养上清通过环状RNA-0001649/miR-203a/VEGFA/MMP9信号通路促进血管生成
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作者 胡丽萍 肖轶婧 +2 位作者 唐子春 孙典 沈铭 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期810-816,共7页
目的:探究人羊膜间充质干细胞(human amnion-derived mesenchymal stem cell,hAMSC)条件培养上清(conditioned medium,CM)是否通过环状RNA-0001649(circ-0001649)促进人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)血... 目的:探究人羊膜间充质干细胞(human amnion-derived mesenchymal stem cell,hAMSC)条件培养上清(conditioned medium,CM)是否通过环状RNA-0001649(circ-0001649)促进人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)血管生成及其可能的机制。方法:将HUVEC分为对照组、CM刺激组、circ-0001649敲低后CM刺激组(si-circ-0001649+CM刺激组)、敲低对照加CM刺激组(si-NC+CM刺激组),检测各组HUVEC的血管生成能力和迁移能力,以及血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)的水平。同时通过敲低circ-0001649后转染miR-203a-inhibitor进行拯救实验验证hAMSC-CM促进HUVEC血管生成的作用机制。结果:hAMSC培养上清(hAMSC-CM)明显提高HUVEC的血管生成和迁移能力,促进VEGFA和MMP9以及细胞内circ-0001649的表达。敲低circ-0001649后降低了hAMSC-CM对HUVEC血管生成和迁移能力的影响。生物信息学分析以及拯救实验发现circ-0001649可以通过结合miR-203a,减少miR-203a对VEGFA以及MMP9的抑制作用,促进h AMSC-CM对HUVEC的成血管和迁移能力。结论:h AMSC-CM可上调HUVEC细胞内circ-0001649表达,通过其竞争性结合miR-203a,促进VEGFA和MMP9表达进而发挥促血管生成作用。 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞 人脐静脉内皮细胞 血管生成
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体外共培养诱导人羊膜间充质干细胞分化为眼表上皮细胞的研究
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作者 文晔 沙翔垠 +3 位作者 宋莉 刘志平 彭娟 谢莉菲 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期797-801,共5页
背景 人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)在体外能诱导分化为多种体细胞,但目前有关hAMSCs分化为眼表细胞的研究鲜有报道. 目的 探讨体外共培养诱导hAMSCs向眼表细胞分化的可能性及其分化机制.方法 本研究经广州医科大学第二附属医院伦理委... 背景 人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)在体外能诱导分化为多种体细胞,但目前有关hAMSCs分化为眼表细胞的研究鲜有报道. 目的 探讨体外共培养诱导hAMSCs向眼表细胞分化的可能性及其分化机制.方法 本研究经广州医科大学第二附属医院伦理委员会批准,在健康产妇的知情同意下从人胎盘中分离hAMSCs并进行培养,采用流式细胞术计数分析CD44、CD45、CD73、CD90在培养细胞中的表达以鉴定细胞,此外通过成骨诱导分化实验和成脂诱导分化实验对培养细胞进行体外分化鉴定.在患者知情同意下获取眼科手术中弃用的人眼球结膜组织,用组织块培养法分离和培养人球结膜成纤维细胞(hBCFs),将hAMSCs与hBCFs在Transwell培养体系中进行共培养,分为hAMSCs培养组和hAMSCs与hBCFs共培养组,用含质量分数5%胎牛血清(FBS)的DMEM高糖/F12培养基培养7d,采用免疫荧光技术检测hAMSCs中对上皮细胞角蛋白19(CK19)的表达,评价hAMSCs向眼表细胞分化的程度,并检测hAMSCs中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,评价其分化过程与间质上皮化转换(MET)过程的关系.结果 传代至3~7代的hAMSCs均为细长形,但随着传代增加,细胞体积增大,细胞中CD44、CD73、CD90表达呈强阳性,但不表达CD45.经成骨或成脂诱导分化后3~4周,细胞中茜素红S(ARS)染色或油红O染色阳性.hAMSCs与hBCFs共培养后1周,hAMSCs形态由细长形变为类上皮细胞型,共培养组的部分细胞中CK19表达阳性,所有细胞α-SMA表达呈微弱阳性,而hAMSCs细胞培养组可见呈绿色荧光的α-SMA阳性细胞,但不表达CK19. 结论 通过体外共培养可诱导hAMSCs向人眼表细胞分化,其分化机制可能与MET过程相关. 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞 共培养 诱导 分化 眼表细胞
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大气颗粒物诱导人羊膜FL细胞非程序性DNA合成的研究
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作者 原福胜 邢权 《解放军预防医学杂志》 CAS 北大核心 1994年第4期274-276,共3页
本研究以诱导人羊膜FL细胞非程序性DNA合成(UDS)为指标,对大气颗粒物提取液进行了致突变性试验。结果表明,大气颗粒物的提取液可诱发UDS反映值明显增加(P<0.01),具有较强的致突变作用。
关键词 空气污染 人羊膜FL细胞 UDS
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流行性出血热病毒在人革膜传代细胞内的生长繁殖
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作者 谭维国 李德卿 周丽红 《病毒学杂志》 CSCD 1991年第2期179-180,共2页
本文应用人羊膜传代细胞(Wish细胞)对流行性出血热病毒(EHFV)的敏感性进行了试验,用EHFV武株及76118、A9、R22、R4、陈株等5个代表株接种Wish细胞。结果Wish细胞感染EHFV后第1代第8~10天即可查见明显的特异性荧光,荧光光强度随代数和... 本文应用人羊膜传代细胞(Wish细胞)对流行性出血热病毒(EHFV)的敏感性进行了试验,用EHFV武株及76118、A9、R22、R4、陈株等5个代表株接种Wish细胞。结果Wish细胞感染EHFV后第1代第8~10天即可查见明显的特异性荧光,荧光光强度随代数和时间而增加,TCID50为10~4~/10~5ml。并用荧光阻断试验和双份血清证实在Wish细胞内繁殖的病毒为EHFV。此结果为EHF病原学研究提供了新的敏感细胞株。 展开更多
关键词 流行性出血热病毒 人羊膜传代细胞
原文传递
人羊膜间充质干细胞培养方法的改进
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作者 崔冬冰 范安然 何志旭 《贵阳医学院学报》 CAS 2016年第4期414-417,426,共5页
目的:建立一种高效分离培养人羊膜间充质干细胞的方法。方法:分别用酶消化法、传统组织块贴壁法和改进的组织块贴壁法分离出h AMSCs,观察3种方法所获得h AMSCs细胞形态、获得时间,流式细胞学检测其免疫表型;并用不同的诱导体系将h AM... 目的:建立一种高效分离培养人羊膜间充质干细胞的方法。方法:分别用酶消化法、传统组织块贴壁法和改进的组织块贴壁法分离出h AMSCs,观察3种方法所获得h AMSCs细胞形态、获得时间,流式细胞学检测其免疫表型;并用不同的诱导体系将h AMSCs向成骨细胞、成神经细胞进行诱导分化,鉴定其分化潜能。结果:改进的组织块贴壁法获得h AMSCs细胞的纯度更高,传代次数更多,相同的培养时间里,获得的细胞数量是酶消化法的3-4倍,是传统组织块贴壁法的1-2倍;h AMSCs细胞高表达CD73、CD90、CD44和CD105,不表达CD11b、CD19、CD34、CD45、HLA-DR;茜素红染色和神经元特异性烯醇化酶检测证实h AMSCs细胞可诱导分化为成骨细胞和神经细胞。结论:改进的h AMSCs分离培养方法可获得较大数量细胞,且保留了向神经细胞或成骨细胞可分化潜能。 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞 细胞培养 鉴定 诱导
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不同炉具的型煤焦油诱导人羊膜 FL 细胞非程序性 DNA 合成的研究
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作者 原福胜 杨建军 邢权 《中国公共卫生学报》 1997年第3期157-157,共1页
以人羊膜FL细胞非程序性DNA合成(UDS)为观察指标,对3种炉具的型煤焦油进行了遗传毒性检测。结果表明,3种炉具焦油在有与无S9情况下均不同程度地诱发UDS反映值增加,但它们诱发UDS增加剂量和作用范围大小不同。同... 以人羊膜FL细胞非程序性DNA合成(UDS)为观察指标,对3种炉具的型煤焦油进行了遗传毒性检测。结果表明,3种炉具焦油在有与无S9情况下均不同程度地诱发UDS反映值增加,但它们诱发UDS增加剂量和作用范围大小不同。同一种煤用不同炉具燃烧,对所产生的直接致遗传毒性物质和间接致遗传毒性物质的成分和强度有很大影响。 展开更多
关键词 炉具 型煤焦油 人羊膜FL细胞 UDS
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