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脂肪组织是骨、软骨、软组织缺损组织工程再建的理想干细胞来源(英文) 被引量:3
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作者 刘云松 周永胜 谭建国 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2007年第3期217-224,149,共9页
目的验证人脂肪基质细胞是否具有向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞分化的能力,从而为骨、软骨、软组织再建寻找一种理想的干细胞来源。方法分别用成骨向分化培养基(DMEM+10%FBS+地塞米松+维生素C+β-甘油磷酸)、软骨向分化培养基(DMEM+1%... 目的验证人脂肪基质细胞是否具有向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞分化的能力,从而为骨、软骨、软组织再建寻找一种理想的干细胞来源。方法分别用成骨向分化培养基(DMEM+10%FBS+地塞米松+维生素C+β-甘油磷酸)、软骨向分化培养基(DMEM+1%FBS+胰岛素+维生素C+转化生长因子β1)及脂肪向分化培养基(DMEM+10%FBS+地塞米松+胰岛素+吲哚美辛+异丁基甲基黄嘌呤)诱导人脂肪基质细胞向成骨细胞、软骨细胞及脂肪细胞分化。用vonKossa和碱性磷酸酶染色鉴定成骨细胞分化,而软骨细胞分化和脂肪细胞分化分别用Alcianblue染色和油红O染色显示。成骨细胞、软骨细胞以及脂肪细胞特异相关或标志基因的表达用RT-PCR检测。结果体外实验表明,人脂肪基质细胞在定向分化诱导剂的作用下可分别向成骨细胞、软骨细胞及脂肪细胞分化。结论人脂肪基质细胞中包含有多向分化能力的干细胞,可用于今后骨、软骨、软组织的组织工程再建。 展开更多
关键词 人脂肪基质细胞 成骨细胞 软骨细胞 脂肪细胞 分化
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腺病毒与慢病毒载体对人脂肪间充质干细胞转导效率及基因表达的差异 被引量:2
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作者 李丹 乔群 +1 位作者 王晓军 钱建平 《中国美容医学》 CAS 2009年第3期342-345,共4页
目的:比较重组腺病毒、慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白对体外培养的人脂肪来源干细胞(hADSCs)的转导效率和外源基因表达差异。方法:原代分离培养hADSCs并鉴定,应用Ad5F35-EGFP及LV-EGFP以MOI=0、25、50、100、200、400、800感染hADS... 目的:比较重组腺病毒、慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白对体外培养的人脂肪来源干细胞(hADSCs)的转导效率和外源基因表达差异。方法:原代分离培养hADSCs并鉴定,应用Ad5F35-EGFP及LV-EGFP以MOI=0、25、50、100、200、400、800感染hADSCs,在1、3、7、14、21天应用荧光显微镜、流式细胞仪观察检测表达EGFP细胞阳性率。MTT法检测转导对hADSCs增殖的影响。VonKossa染色、油红O染色检测体外诱导转导EGFP的hADSCs向成骨及成脂方向分化能力。结果:hADSCs细胞表面标记CD31、CD34、CD45、CD106和HLA-DR阴性,CD29、CD44、CD49d、CD105、CD166阳性。荧光显微镜观察Ad5F35-EGFP感染hADSCs后(1~7天)可见EGFP高表达,此后逐渐减弱;LV-EGFP感染hADSCs后21天,仍可见EGFP高表达。流式细胞仪检测Ad5F35-EGFP、LV-EGFP对hADSCs转导效率与MOI值呈正相关。MTT显示Ad5F35-EGFP在高MOI值(800)检测A值与对照组相比差异显著(P<0.01)。转导EGFP的hADSCs经体外诱导14天可向成骨、成脂方向分化。结论:与腺病毒相比,慢病毒能够更为安全、有效地感染体外培养hADSCs,并长期表达外源基因,是研究基因修饰hADSCs的理想载体。 展开更多
关键词 人脂肪间充质干细胞 基因治疗 腺病毒 慢病毒
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人脂肪间充质干细胞成功诱导分化为脂肪细胞
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作者 王媛春卉 单伟 +1 位作者 林妹珠 毕淑华 《解剖科学进展》 2016年第4期423-425,428,共4页
目的分离培养人脂肪间充质干细胞(h ADSCs),探讨h ADSCs生长特性及分化为脂肪细胞的能力。方法采用Ⅰ型胶原酶消化和贴壁筛选联合培养方法,从人腹部吸脂术所抽取的脂肪组织中分离培养间充质干细胞,传代,绘制其生长曲线,免疫细胞化学染... 目的分离培养人脂肪间充质干细胞(h ADSCs),探讨h ADSCs生长特性及分化为脂肪细胞的能力。方法采用Ⅰ型胶原酶消化和贴壁筛选联合培养方法,从人腹部吸脂术所抽取的脂肪组织中分离培养间充质干细胞,传代,绘制其生长曲线,免疫细胞化学染色检测细胞表面标志物以鉴定所分离细胞;利用三联诱导法诱导人脂肪间充质干细胞向脂肪细胞分化,并进行油红O染色鉴定,显微镜下观察。结果原代人脂肪源间充质干细胞贴壁生长,为形态相对均一的梭形细胞,呈平行排列生长,生长曲线呈"s"型分布,间充质干细胞相关标志物CD44、CD49d高表达,而CD34、CD106则呈阴性。三联诱导法成功诱导人脂肪源间充质干细胞向脂肪细胞分化,诱导7d后镜下可见脂滴的出现,12d后最为显著,油红O染色脂滴着红色。结论 h ADSCs经过体外扩增及成脂诱导成功分化为脂肪细胞,可成为组织工程理想种子细胞。 展开更多
关键词 人脂肪间充质干细胞 体外分化 脂肪细胞
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