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人乙醛脱氢酶2的原核表达及条件的优化
1
作者
黄娟
张小骥
+3 位作者
刘传青
向玲娟
陈孝平
吴元欣
《化学与生物工程》
CAS
2014年第6期25-27,30,共4页
通过双酶切、连接转化等方法将人乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因克隆至载体pGEX-4T-1上,构建原核表达重组质粒pGEX-4T-1-ALDH2。重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)后经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表明目的蛋白得到大量表达。由于此载体本身带有融合蛋...
通过双酶切、连接转化等方法将人乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因克隆至载体pGEX-4T-1上,构建原核表达重组质粒pGEX-4T-1-ALDH2。重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)后经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表明目的蛋白得到大量表达。由于此载体本身带有融合蛋白标签GST(谷胱甘肽转移酶),所以得到了部分可溶性的目的蛋白。通过对表达条件进行探讨,发现在28℃下,以终浓度0.1mmol·L-1的IPTG诱导表达10h,可溶性的目的蛋白约占总蛋白的25%。表明,融合蛋白标签GST及较低的诱导温度有利于提高人乙醛脱氢酶2基因在大肠杆菌内的可溶性表达。
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关键词
乙醛脱氢酶
2
原核表达
融合蛋白
优化
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职称材料
题名
人乙醛脱氢酶2的原核表达及条件的优化
1
作者
黄娟
张小骥
刘传青
向玲娟
陈孝平
吴元欣
机构
武汉工程大学绿色化工过程教育部重点实验室
出处
《化学与生物工程》
CAS
2014年第6期25-27,30,共4页
基金
湖北省国际科技合作重点计划项目(2006CA013)
湖北省科技攻关计划项目(2007AA201C27
2007AA301B24)
文摘
通过双酶切、连接转化等方法将人乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因克隆至载体pGEX-4T-1上,构建原核表达重组质粒pGEX-4T-1-ALDH2。重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)后经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表明目的蛋白得到大量表达。由于此载体本身带有融合蛋白标签GST(谷胱甘肽转移酶),所以得到了部分可溶性的目的蛋白。通过对表达条件进行探讨,发现在28℃下,以终浓度0.1mmol·L-1的IPTG诱导表达10h,可溶性的目的蛋白约占总蛋白的25%。表明,融合蛋白标签GST及较低的诱导温度有利于提高人乙醛脱氢酶2基因在大肠杆菌内的可溶性表达。
关键词
乙醛脱氢酶
2
原核表达
融合蛋白
优化
Keywords
human
acetaldehyde
dehydrogenase
2
(
aldh
2)
~
prokaryotic
expression
fusion
protein
optimization
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
Q51
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人乙醛脱氢酶2的原核表达及条件的优化
黄娟
张小骥
刘传青
向玲娟
陈孝平
吴元欣
《化学与生物工程》
CAS
2014
0
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