小鼠抗人TNF-α Fab基因的定点突变及其在大肠杆菌中的表达 被引量：1

1

作者 张巍 沈倍奋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期338-340,共3页

目的 :对小鼠抗人TNF αFab基因进行人源化改造 ,并获得人源化Fab段的可溶性表达产物。方法 :应用一步反向PCR法 ,分别对小鼠VH、VL 基因进行定点突变。将突变基因克隆入载体pComb3H并诱导表达。结果 :成功地将鼠抗VH88位Ser突变为Ala ,... 目的 :对小鼠抗人TNF αFab基因进行人源化改造 ,并获得人源化Fab段的可溶性表达产物。方法 :应用一步反向PCR法 ,分别对小鼠VH、VL 基因进行定点突变。将突变基因克隆入载体pComb3H并诱导表达。结果 :成功地将鼠抗VH88位Ser突变为Ala ,VL17位Glu和 18位Lys分别突变为Asp和Arg。成功地构建了人源化Fab的可溶性表达质粒 ,并用Western blot检测到其在上清液中有表达。结论 :得到人源化Fab的可溶性表达产物 。 展开更多

关键词 人tnf—α 单克隆抗体 定点突变 基因表达

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抗人肿瘤坏死因子-α单链抗体与其配体的相互作用 被引量：1

2

作者 陈萍 邓健蓓 +2 位作者 韩骅 药立波 苏成芝 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第4期430-433,共4页

为了在大肠杆菌中表达纯化抗人 TNF- α单链抗体并检测其结合活性与中和活性 .利用GST融合蛋白系统在大肠杆菌中表达抗人 TNF- α单链抗体 E6Sc Fv;分离包含体后进行变性和复性 ,再用亲和层析法进行纯化 ;用 ELISA法和酵母双杂交系统检... 为了在大肠杆菌中表达纯化抗人 TNF- α单链抗体并检测其结合活性与中和活性 .利用GST融合蛋白系统在大肠杆菌中表达抗人 TNF- α单链抗体 E6Sc Fv;分离包含体后进行变性和复性 ,再用亲和层析法进行纯化 ;用 ELISA法和酵母双杂交系统检测 E6Sc Fv与配体的结合 ;用 L92 9细胞检测 E6Sc Fv对人 TNF- α细胞毒作用的中和活性 .经变性 ,复性与亲和层析 ,E6Sc Fv被纯化 ,在 SDS- PAGE上为单一蛋白带 ;体外结合与中和实验表明 ,表达纯化的 E6Sc Fv可与人 TNF-α结合并中和其细胞毒活性 ;进一步用酵母双杂交系统证明当表达于细胞内时 ,E6Sc Fv仍保持了与TNF-α相结合的能力 . 展开更多

关键词 人tnf-α 单链抗体 酵母双杂交 E6ScFV 胞内抗体

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基于戊二醛的氨基微球上DNA编码和抗体蛋白固定

3

作者 王媛媛 侯彩玲 王志民 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2018年第5期1-6,13,共7页

用戊二醛和EDC/sulfo-NHS分别活化表面修饰了氨基和羧基的微球,在2种微球上分别固定相等摩尔浓度的氨基标记的发卡DNA和未经修饰的人TNF α捕获抗体,结果表明戊二醛的交联效果优于EDC/sulfo-NHS。从而选择戊二醛为交联剂将Cy3标记的发卡... 用戊二醛和EDC/sulfo-NHS分别活化表面修饰了氨基和羧基的微球,在2种微球上分别固定相等摩尔浓度的氨基标记的发卡DNA和未经修饰的人TNF α捕获抗体,结果表明戊二醛的交联效果优于EDC/sulfo-NHS。从而选择戊二醛为交联剂将Cy3标记的发卡DNA和未经修饰的藻红蛋白(RPE)分别固定到微米球表面并进行了荧光观察,再通过调整蛋白和DNA的比例将FAM标记的发卡DNA和RPE同时固定到微米球上并观察荧光,为实现用DNA序列编码的微米球上多种生物标志物酶联免疫吸附检测奠定了基础。用RPE为荧光标记物采用双抗体夹心法在微球上进行荧光免疫反应,为商品化诊断试剂的研究提供一定的参考。 展开更多

关键词 戊二醛 EDC/sulfo-NHS 发卡DNA 人tnf α 藻红蛋白

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癌组织衍生肿瘤坏死因子抑制因子的初步研究 被引量：3

4

作者 白虹 潘菊芬 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期39-42,共4页

将３０份手术切除的新鲜结直肠癌组织块直接作原代培养４８ｈ后，观察培养上清中免疫抑制因子的存在及特性。结果表明：此癌组织培养上清可抑制人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）产生肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）并抑制重组人肿瘤坏死因子（... 将３０份手术切除的新鲜结直肠癌组织块直接作原代培养４８ｈ后，观察培养上清中免疫抑制因子的存在及特性。结果表明：此癌组织培养上清可抑制人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）产生肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）并抑制重组人肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦα）杀伤靶细胞的活性，两种作用均呈剂量依赖性。对抑制ｒｈＴＮＦα杀瘤活性的因子初步纯化的结果证实，其为分子量约４０ＫＤ的蛋白质。此外，为保证结直肠癌组织培养不污染，本工作对癌组织培养前的无菌消毒方法做了探索，找出最佳处理方案，即“７５％酒精－灭滴灵－多种抗菌素”模式。 展开更多

关键词 癌组织 免疫抑制因子 肿瘤坏死因子 RHtnfα

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人重组TNF-α突变体471蛋白的初步纯化及生物学活性 被引量：3

5

作者 李瑶琛 孔令洪 +3 位作者 王一理 尚宁宽 耿宜萍 司履生 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期409-412,共4页

目的 :在利用原核表达系统表达重组人突变体 4 71TNF α蛋白的基础上 ,对该蛋白进行初步纯化及生物学活性检测。方法 :利用最佳发酵和表达条件 ,诱导基因重组的人突变体4 71TNF α工程菌表达目的蛋白。收集菌体 ,经超声破碎 ,分离人突变... 目的 :在利用原核表达系统表达重组人突变体 4 71TNF α蛋白的基础上 ,对该蛋白进行初步纯化及生物学活性检测。方法 :利用最佳发酵和表达条件 ,诱导基因重组的人突变体4 71TNF α工程菌表达目的蛋白。收集菌体 ,经超声破碎 ,分离人突变体 4 71TNF α的包涵体 ,并观察变性剂及蛋白浓度对蛋白折叠的影响。采用MTT比色法检测并比较人野生型及突变体 4 71TNF α的生物学活性。结果 :在适当的变性与复性条件下 ,已成功地将突变体 4 71TNF α折叠并聚合形成具有生物学活性的三聚体。突变体 4 71TNF α对L92 9的细胞毒活性高于野生型TNF α的 15倍。结论 :原核表达系统中表达的人突变体 4 71TNF α经复性处理后具有显著的生物学活性 。 展开更多

关键词 人突变体471 tnf—α 蛋白纯化 MTT比色法 生物学活性

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抗人TNF-α单抗基因的克隆及鉴定 被引量：3

6

作者 骆训懿 王琰 +1 位作者 王欲晓 王卓智 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期166-168,共3页

目的克隆抗人ＴＮＦ－α鼠单抗得可变区基因以构建人－鼠嵌合抗体表达载体。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ技术，以前导肽序列的引物从１个分泌抗人ＴＮＦ－α的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆抗体轻链、重链可变区基因（Ｖκ，ＶＨ），在大肠杆菌中... 目的克隆抗人ＴＮＦ－α鼠单抗得可变区基因以构建人－鼠嵌合抗体表达载体。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ技术，以前导肽序列的引物从１个分泌抗人ＴＮＦ－α的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆抗体轻链、重链可变区基因（Ｖκ，ＶＨ），在大肠杆菌中表达Ｆａｂ段核实其功能活性。结果分别得到了２个Ｖκ和２个ＶＨ基因。ＤＮＡ序列测定表明，其中１个轻链可变区基因为骨髓瘤细胞系中固有的无功能基因。１个重链可变区基因经原核系统表达测活表明无抗体活性。另一个轻链和重链可变区基因的成熟蛋白编码部分与从第一骨架区引物所克隆的、可在大肠杆菌表达出抗体活性的Ｖκ、ＶＨ序列相符。将该轻链、重链基因分别克隆到了人－鼠嵌合轻链、重链表达载体中。结论通过原核表达系统核实。 展开更多

关键词 人tnf-α 基因 单克隆抗体 鉴定

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人肿瘤坏死因子基因在变铅青链霉菌中的克隆与表达

7

作者 刘菊萍 李元 刘伯英 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1993年第6期481-487,共7页

以质粒pIJ486为载体,将来源于质粒pHT1的肿瘤坏死因子(TNF-α)cDNA克隆至变铅青链霉菌(Streptomyces lividans TK54),以新毒素(30μg/ml)为选择标记,获得了数百转化子,实验表明No.7转化子S.lividans TK54-HT所含重组质粒pIJT7已克隆有TN... 以质粒pIJ486为载体,将来源于质粒pHT1的肿瘤坏死因子(TNF-α)cDNA克隆至变铅青链霉菌(Streptomyces lividans TK54),以新毒素(30μg/ml)为选择标记,获得了数百转化子,实验表明No.7转化子S.lividans TK54-HT所含重组质粒pIJT7已克隆有TNFcDNA。L929细胞毒实验结果表明该转化子TNF表达量可达10^(?)活性单位/升以上,中和实验确证其表达产物为人TNF-α。 SDS—PAGE表明克隆菌株裂解上清液于17000遭尔顿处有明显蛋白带,与TNF-α分子量相当,这表明TNF基因在变铅青链霉菌中获得了成功的克隆与表达。 展开更多

关键词 变铅青链霉菌 肿瘤坏死因子 基因

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突变型人肿瘤坏死因子-α工程菌发酵培养的实验研究 被引量：5

8

作者 孔令洪 李瑶琛 +3 位作者 王一理 尚宁宽 耿宜萍 司履生 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期211-214,共4页

目的　优化基因重组人突变型 4 71肿瘤坏死因子 α(TNF α)工程菌的发酵和表达条件。方法　通过改变培养基的组分、pH值、培养温度和诱导表达的条件等 ,采用测定细菌生物量和蛋白表达量等方法 ,确定最适的发酵和表达条件 ,并考察工程菌... 目的　优化基因重组人突变型 4 71肿瘤坏死因子 α(TNF α)工程菌的发酵和表达条件。方法　通过改变培养基的组分、pH值、培养温度和诱导表达的条件等 ,采用测定细菌生物量和蛋白表达量等方法 ,确定最适的发酵和表达条件 ,并考察工程菌中重组质粒的遗传稳定性。结果　突变型 4 71rhTNF α工程菌在 pH值 7.5的SOC培养基中 ,30℃培养、4 2℃诱导 5h时 ,其表达量最大。而且 ,所构建的重组质粒在工程菌DH5α中传代稳定 ,目的蛋白的表达不受影响。结论　优化了基因重组人突变型 4 71rhTNF α工程菌的发酵和表达的最适条件 ,为进一步开发人突变型 4 71rhTNF 展开更多

关键词 突变型人肿瘤坏死因子-α 工程菌 发酵 培养 实验 重组质粒 遗传稳定性 肿瘤细胞

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抗人TNF-α单克隆抗体液质联用肽图分析方法的建立及验证 被引量：4

9

作者 桂芳 杨兰兰 +2 位作者 潘勇兵 张雅婷 张银川 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期51-63,共13页

目的:建立液相色谱-质谱联用肽图分析方法用于抗人肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor alpha,TNF-α)单抗的专属性鉴别。方法:TNF-α单抗样品经盐酸胍变性、还原,释放出的游离半胱氨酸残基进行烷化,还原剂中和过量的烷化剂。超滤置... 目的:建立液相色谱-质谱联用肽图分析方法用于抗人肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor alpha,TNF-α)单抗的专属性鉴别。方法:TNF-α单抗样品经盐酸胍变性、还原,释放出的游离半胱氨酸残基进行烷化,还原剂中和过量的烷化剂。超滤置换酶切缓冲液后进行胰酶酶切并终止。色谱条件:采用Waters UPLC BEH 300 C_(18)(2.1 mm×150mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)为流动相,梯度洗脱(5-120 min,2%B→45%B),流速为0.2 mL·min^(-1),检测波长为214 nm;质谱条件:采用电喷雾离子源及正离子模式,数据采集范围m/z为100~1990。结果:TNF-α单抗重链及轻链的6个互补决定区(CDR)对应肽段由质谱鉴定出,HC CDR2及HC CDR3在色谱峰图中共流出;利妥昔单抗用于评估本方法的专属性,结果显示本方法专属性强,且不受基质的干扰;选定m/z 1 344(M^(+5))的色谱峰为参考峰,根据CDR的相对保留时间考察该方法的变异程度,5次重复测定CDR相对保留时间的RSD在0.57%~1.19%之间;中间精密度考察测定的相对保留时间的RSD在0.00%~1.08%之间;胰酶酶切比例在20:1~30:1,酶切时间在17~23h范围内变化时,相对保留时间的均较小,符合方法耐用性的要求;样品消化后在8℃储存24h以及-20℃储存5d的稳定性良好。结论:基于CDR相关肽段鉴别的液质联用肽图分析方法可定性鉴定出TNF-α单抗,方法学验证结果显示该方法适用于抗人TNF-α单抗的专属性鉴别,可用于其质量控制及批检验放行。 展开更多

关键词 单克隆抗体 肿瘤坏死因子α(tnf-α) 抗人tnf-α单抗 液质联用 肽图分析 互补决定区(CDR) 鉴别试验 方法学验证

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乌头汤及四妙丸对人肿瘤坏死因子-α转基因关节炎小鼠模型的作用研究 被引量：3

10

作者 赵文婷 朱兴旺 +3 位作者 赵晓峰 陈恩生 毕亚男 肖长虹 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期2534-2538,共5页

目的:探讨乌头汤、四妙丸对人肿瘤坏死因子-α转基因关节炎(Tgtc)小鼠模型的疗效,以反证法验证该小鼠模型的寒热属性,并探讨该模型的病理实质与缺氧诱导因子1α(HIF1α)及热休克蛋白70(HSP70)的关系。方法:32只Tgtc小鼠随机分为对照组... 目的:探讨乌头汤、四妙丸对人肿瘤坏死因子-α转基因关节炎(Tgtc)小鼠模型的疗效,以反证法验证该小鼠模型的寒热属性,并探讨该模型的病理实质与缺氧诱导因子1α(HIF1α)及热休克蛋白70(HSP70)的关系。方法:32只Tgtc小鼠随机分为对照组、乌头汤组、四妙丸组和来氟米特组,每组8只。连续4周灌胃相应药物,记录各组踝关节变形指数、直径、颜色,进行双踝关节激光散斑血流成像,膝关节核磁共振扫描,血清及滑膜组织HIF1α、HSP70含量,踝关节组织病理及微血管密度(MVD)等检测。结果:与对照组比较,乌头汤组小鼠关节变形及红肿程度、关节表面散斑流速指数、膝关节积液面积、滑膜组织HIF1α含量及MVD计数均显著降低(P<0.05),血清及滑膜组织HSP70表达显著升高(P<0.05),关节病理中软骨层损伤深度及范围、炎症细胞浸润程度显著降低(P<0.01);四妙丸加重了Tgtc小鼠关节炎症状。结论:乌头汤通过改善关节缺氧,抑制HIF1α表达,并促进HSP70释放,减轻滑膜炎症及骨破坏,减缓Tgtc小鼠关节炎进展;Tgtc小鼠关节炎属性偏寒。 展开更多

关键词 乌头汤 四妙丸 中药反证 类风湿关节炎 缺氧诱导因子1α 热休克蛋白70 人肿瘤坏死因子-α转基因关节炎小鼠

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重组人抗TNFα单抗制品中CHO宿主细胞蛋白质残留夹心ELISA检测方法的建立及验证 被引量：3

11

作者 邓春平 梅雄 +2 位作者 陈航 何水华 刘翠华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第8期925-928,933,共5页

目的建立检测重组人抗TNFα单抗制品中CHO宿主细胞蛋白质(host cell protein,HCP)残留的夹心ELISA法,并进行验证。方法采用二维电泳-Western blot(2D-Western blot)法筛选兔抗CHO HCP多克隆抗体(产品号:AB000103-A、AB000103-C)及羊抗CH... 目的建立检测重组人抗TNFα单抗制品中CHO宿主细胞蛋白质(host cell protein,HCP)残留的夹心ELISA法,并进行验证。方法采用二维电泳-Western blot(2D-Western blot)法筛选兔抗CHO HCP多克隆抗体(产品号:AB000103-A、AB000103-C)及羊抗CHO HCP多克隆抗体(批号:3G-0016-PA)中识别重组人抗TNFα单抗特异性CHO HCP覆盖率最高的一种作为检测抗体,建立检测样品中残余HCP的夹心ELISA法,并验证方法的线性、基质干扰、稀释线性、灵敏度、精密度及准确性。结果以覆盖率达57%的AB000103-C号兔抗CHO HCP多克隆抗体作为检测抗体;样品基质干扰HCP检测,样品需稀释6倍;HCP标准品浓度在3.33~810 ng/mL范围与A450值曲线拟合良好,R2=1,试验内及试验间精密性验证的CV均小于12%,检测限及定量限分别为2.4和20 ng/mL;20、150及300 ng/mL的加标样品回收率分别为99.5%、97.1%及100.3%。结论成功建立了重组人抗TNFα单抗HCP残留的夹心ELISA检测方法,该方法灵敏度高,准确性、精密性及线性良好,适用于重组人抗TNFα单抗制品的残留HCP检测。 展开更多

关键词 重组人抗tnfα单抗 CHO细胞 宿主细胞蛋白质 酶联免疫吸附测定

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GM－CSF与IFN－r联合刺激人PBMC产生TNF－α 被引量：3

12

作者 丁传林 姚堃 +2 位作者 周瑶玺 张智清 候云德 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期109-112,共4页

ＧＭ－ＣＳＰ本身并不能诱导人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）产生ＴＮＰ－α对ＬＰＳ的刺激作用也不具有协同性，但与ＩＦＮ－ｒ联合刺激ＰＢＭＣ可以产生ＴＮＦ－α，最大效应出现于刺激后１８～２４ｈ，且呈明显的时间和剂量依赖关系，... ＧＭ－ＣＳＰ本身并不能诱导人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）产生ＴＮＰ－α对ＬＰＳ的刺激作用也不具有协同性，但与ＩＦＮ－ｒ联合刺激ＰＢＭＣ可以产生ＴＮＦ－α，最大效应出现于刺激后１８～２４ｈ，且呈明显的时间和剂量依赖关系，消炎痛和多粘菌素Ｂ对此效应无影响，排除了ＰＧＥ２和ＬＢＳ存在影响的可能性。 展开更多

关键词 GM-CSF PBMC 干扰素 肿瘤坏死因子

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抗人TNF-α单克隆抗体对银屑病患者血清TNF-α的中和研究

13

作者 冯峥 王建平 +2 位作者 葛萍 李恒进 黎燕 《军医进修学院学报》 CAS 北大核心 2005年第3期225-227,共3页

目的:研究抗人TNF-α单克隆抗体对寻常型银屑病患者血清TNF-α的中和效应。方法:应用双抗体夹心ELISA方法检测正常人及患者血清应用单克隆抗体中和前后TNF-α的浓度改变。应用L929细胞检测正常人和患者血清抗体中和前后的生物学活性变... 目的:研究抗人TNF-α单克隆抗体对寻常型银屑病患者血清TNF-α的中和效应。方法:应用双抗体夹心ELISA方法检测正常人及患者血清应用单克隆抗体中和前后TNF-α的浓度改变。应用L929细胞检测正常人和患者血清抗体中和前后的生物学活性变化情况。结果:正常人与银屑病患者血清TNF-α的浓度分别为:(3.146±6.184)pg/ml及(62.723±38.379)pg/ml;其生物学活性分别为:(6.817±5.086)%及(57.498±9.125)%。抗体中和后患者血清TNF-α的浓度为:(0.503±1.178)pg/ml;中和后的生物学活性为:(25.378±14.863)%。结论:寻常型银屑病患者血清中TNF-α的浓度及生物学活性均高于正常对照,而抗人TNF-α单克隆抗体在体外可以很好地中和患者血清中TNFα的浓度及其生物学活性。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子 抗人tnf-α 单克隆抗体 中和试验 银屑病 血清tnf-α 血清抗体

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人源天然抗TNF-α ScFv抗体的筛选及性质分析

14

作者 乔玉玲 卢卫嘉 +5 位作者 陈继军 秦海艳 王建锋 张超 熊颖 毛晓燕 《微生物学免疫学进展》 2018年第2期20-26,共7页

目的以人肿瘤坏死因子(human tumour necrosis factor-α,human TNF-α)为靶抗原,从构建好的人源天然单链抗体(single-chain antibody fragment,ScFv)噬菌体抗体库中筛选对应的ScFv抗体,验证其中和活性后测定动力学常数(kinetic dissoci... 目的以人肿瘤坏死因子(human tumour necrosis factor-α,human TNF-α)为靶抗原,从构建好的人源天然单链抗体(single-chain antibody fragment,ScFv)噬菌体抗体库中筛选对应的ScFv抗体,验证其中和活性后测定动力学常数(kinetic dissociation,KD)。方法以TNF-α梯度稀释后包被免疫管,对人源天然ScFv噬菌体抗体库进行3轮吸附-洗脱-扩增的富集筛选,制备TNF-α单克隆噬菌体抗体颗粒,经ELISA试验筛选阳性克隆后测序并分析;将正确的阳性抗体序列亚克隆到pET-26b表达载体上,原核表达后用Ni Sepharose 6 Fast Flow介质进行纯化;用MTT比色法对筛选的ScFv进行中和活性验证,并测定其中和抗体的KD。结果通过3轮筛选共得到18个正确的抗体氨基酸序列,对其原核表达及纯化后得到的6株可溶性表达的抗TNF-αScFv进行中和活性验证,并对其中有中和活性的4株ScFv抗体测定KD。结论从人源天然ScFv噬菌体抗体库中成功地筛选出4株抗人TNF-α的ScFv中和抗体,其中1株ScFv抗体的KD为4.80×10^(-8),细胞毒中和率达到48.9%,达到了药用级抗人TNF-α中和抗体的研发要求,为全分子抗体药物的构建及稳定细胞株的筛选奠定了一定的基础。 展开更多

关键词 噬菌体抗体库 人肿瘤坏死因子α 筛选 中和活性 亲和力

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注射用人源化抗人TNF-α单克隆抗体在中国健康成年志愿者中抗药性抗体的产生对其药代动力学行为的影响

15

作者 张坦 祖丽安 +14 位作者 谢新遥 韩敏 王茜 吴全睿 习娜娜 臧彦楠 陈适 王梅 汪进 陶涛 廖庆平 郑青山 栗占国 宋海峰 方翼 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期385-388,共4页

目的研究人源化抗人TNF-α单克隆抗体在中国健康成年志愿者中单次皮下注射后,产生的抗药性抗体(ADA)对其药代动力学的影响。方法 60例健康志愿者分为6个递增剂量组,每组依次单次腹部皮下注射人源化抗人TNF-α单克隆抗体5,15,30,50,75或1... 目的研究人源化抗人TNF-α单克隆抗体在中国健康成年志愿者中单次皮下注射后,产生的抗药性抗体(ADA)对其药代动力学的影响。方法 60例健康志愿者分为6个递增剂量组,每组依次单次腹部皮下注射人源化抗人TNF-α单克隆抗体5,15,30,50,75或100 mg,测定给药前、给药后第4,12,24,36,48,60,72,96,120,144,168,216,264,312,360,408,456,504,576和672 h的血药浓度,以及给药前、给药后168、360、504和672 h的ADA。结果 5～100 mg剂量组ADA阳性率分别为100%,100%,100%,80%,90%和70%,总体阳性率高达90%。检出ADA后,ADA+者的血药浓度迅速下降,其平均血药浓度均低于ADA-者,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。ADA+者半衰期(t_(1/2))显著低于ADA-者,75～100 mg组ADA+者的清除率(CL)高于ADA-者。结论注射用人源化抗人TNF-α单克隆抗体的ADA阳性率较高,血药浓度、t_(1/2)的降低,CL的升高可能与ADA的产生有关。 展开更多

关键词 人源化抗人tnf-α单克隆抗体 抗药性抗体 药代动力学

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重组人促红细胞生成素对脑缺血再灌注小鼠海马肿瘤坏死因子α表达的影响 被引量：1

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作者 王勇 铁欣昕 +1 位作者 姚长义 王运杰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期396-398,402,共4页

目的探讨重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对脑缺血再灌注小鼠海马肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法将96只昆明小鼠随机分为:假手术(sham)组、rHuEPO治疗组和缺血再灌注(I/R)组,每组32只。每组依据缺血后再灌注不同时间点再分为6 h... 目的探讨重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对脑缺血再灌注小鼠海马肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法将96只昆明小鼠随机分为:假手术(sham)组、rHuEPO治疗组和缺血再灌注(I/R)组,每组32只。每组依据缺血后再灌注不同时间点再分为6 h、24 h、3 d及7 d 4个小组。应用免疫组化和Western blot检测各组小鼠海马TNF-α蛋白的表达,RT-PCR方法检测TNF-αmRNA表达的变化。结果免疫组化和Western blot检测结果发现,I/R组TNF-α蛋白表达量明显高于sham组和rHuEPO治疗组(P均<0.05);RT-PCR结果发现,I/R组TNF-αmRNA表达量明显高于sham组和rHuEPO治疗组(P<0.05)。结论rHuEPO可通过减少TNF-α的表达参与脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。 展开更多

关键词 脑缺血再灌注 重组人促红细胞生成素 肿瘤坏死因子α 小鼠

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