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兔抗人BMP-2成熟肽抗血清的制备 被引量:4
1
作者 张斌 蒲勤 +2 位作者 李毅 陈南春 陈苏民 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期568-569,共2页
目的利用在大肠杆菌中表达的人骨形成蛋白-2(hBMP-2)成熟肽,制备兔抗hBMP-2成熟肽抗血清。方法将含有hBMP-2成熟肽基因的表达载体pDH2m,转化大肠杆菌,热诱导表达hBMP-2成熟肽,经纯化、复性后,再用其免疫兔子,制备兔抗hBMP-2成熟肽抗血... 目的利用在大肠杆菌中表达的人骨形成蛋白-2(hBMP-2)成熟肽,制备兔抗hBMP-2成熟肽抗血清。方法将含有hBMP-2成熟肽基因的表达载体pDH2m,转化大肠杆菌,热诱导表达hBMP-2成熟肽,经纯化、复性后,再用其免疫兔子,制备兔抗hBMP-2成熟肽抗血清。并以Western-blot和免疫组化方法对抗血清进行鉴定。结果Western-blot结果显示在对应于hBMP-2成熟肽位置有阳性条带,免疫组化结果显示人软骨细胞胞浆阳性着色。结论hBMP-2成熟肽在大肠杆菌中获得高表达,并成功制备了兔抗hBMP-2成熟肽抗血清。 展开更多
关键词 bmp-2 成熟肽 抗血清 大肠杆菌 制备
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重组人骨形成蛋白-2促进兔下颌牵张成骨的研究 被引量:12
2
作者 王志国 胡静 +3 位作者 邹淑娟 李继华 高占巍 王大章 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期186-188,共3页
目的 研究局部应用基因重组人骨形成蛋白_2 (rhBMP_2 )对兔下颌牵张成骨的影响。方法 在 12只成年大耳白兔的双侧下颌骨前部行骨切开术 ,将rhBMP_2与胶原复合植入一侧下颌骨切开处 ,另一侧单纯植入胶原作对照。用自行研制牵张器延长... 目的 研究局部应用基因重组人骨形成蛋白_2 (rhBMP_2 )对兔下颌牵张成骨的影响。方法 在 12只成年大耳白兔的双侧下颌骨前部行骨切开术 ,将rhBMP_2与胶原复合植入一侧下颌骨切开处 ,另一侧单纯植入胶原作对照。用自行研制牵张器延长双侧下颌骨 6mm ,在牵张结束后第 4周处死动物 ,取双侧牵张区新生骨痂行组织学、扫描电镜及Ca/P元素测定。结果 下颌延长后两侧牵张间隙均有新骨形成 ,应用rhBMP_2的一侧牵张骨痂中的新骨组织比对照侧多而成熟 ,钙化程度较高。结论 基因重组人骨形成蛋白_2可能有促进兔下颌牵张成骨的作用。 展开更多
关键词 下颌骨牵张 重组人骨形成蛋白-2 新骨生成
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异体脱钙骨基质骨粒骨水泥骨形态发生蛋白复合材料的成骨诱导活性 被引量:10
3
作者 周勇 范清宇 +2 位作者 蒋维中 蔡和平 文艳华 《第四军医大学学报》 1999年第12期1085-1087,共3页
探讨异体脱钙骨基质(DBM)骨粒、骨水泥(BC)及重组人骨形态发生蛋白一2(rhBMP-2)复合骨缺损修复材料成骨诱导活性.方法:小鼠股部肌袋内植入复合材料,不同时间分别取材HE染色观察复合骨缺损修复材料的异位诱导成骨活性;检测不... 探讨异体脱钙骨基质(DBM)骨粒、骨水泥(BC)及重组人骨形态发生蛋白一2(rhBMP-2)复合骨缺损修复材料成骨诱导活性.方法:小鼠股部肌袋内植入复合材料,不同时间分别取材HE染色观察复合骨缺损修复材料的异位诱导成骨活性;检测不同复合质量比的复合材料的聚合温度.结果:第7日时材料外周即形成间充质组织包膜,并沿材料不规则裂隙向植入材料内部长人间充质组织.第14日间充质组织继续大量长入且逐渐深火材料内部,部分增生的间充质组织细胞向软骨细胞分化.第ZI田间充质组织细胞继续分化,软骨样细胞及软骨样组织生成量增多,并可见DBM骨粒部分被新生软骨样组织包裹、爬行吸收替代现象;软骨样组织逐渐成熟,间有新骨生成.第28日始,较多量的新骨生成,并可见类似哈佛氏系统样组织.复合材料中骨水泥聚合热不影响材料中诱导成骨成分的活性.结论:复合材料具有一定的诱导成骨活性;复合材料中的脱钙骨基质骨粒可降解.即DBM骨粒诱导成骨因子及复合其中的rhBMP-2在诱导新骨不断充填材料内部不规则裂隙后,仍可在DBM骨粒被爬行吸收的空间中继续有新生骨组织生成. 展开更多
关键词 成骨诱导 脱钙骨基质 骨缺损修复 骨水泥 RHbmp2
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重组rhBMP-2与生物玻璃陶瓷复合物的表面骨扩增作用研究 被引量:7
4
作者 杨秀文 刘洪臣 +1 位作者 刘农乐 王东胜 《口腔颌面修复学杂志》 2000年第2期78-80,F003,共4页
目的:探讨生物活性玻璃(biologically active glass,BAG)对重组人骨形成蛋白-2(recombinenthuman bone morphogenetic protein-2 rhBMP-2)诱导骨形成的的影响,评价rhBMP-2/BAG复合物在兔颅骨表面的骨扩增作用.方法:在16例兔模型的颅骨... 目的:探讨生物活性玻璃(biologically active glass,BAG)对重组人骨形成蛋白-2(recombinenthuman bone morphogenetic protein-2 rhBMP-2)诱导骨形成的的影响,评价rhBMP-2/BAG复合物在兔颅骨表面的骨扩增作用.方法:在16例兔模型的颅骨骨膜下、骨皮质表面,分别植入rhBMP-2/BAG、BAG和单纯BMP,并设空白对照组.植入后2、4、8周行组织学检查,观察植骨区的变化,并测量成骨厚度.结果:rhBMP-2/BAG的表面成骨作用比单一BAG、rhBMP-2好,其骨化过程类似于膜内化骨的直接骨形成,与骨皮质表面良好结合,新骨中可见BAG颗粒并于8周后大部分吸收,新骨形成厚度明显高于BAG组,BAG组的新骨形成厚度明显高于其他两组.结论:BAG具有骨传导性能和可吸收性,rhBMP-2/BAG复合材料将骨诱导性和骨传导性结合起来,促进骨表面的扩增,是一种有临床应用前景的骨替代材料. 展开更多
关键词 生物活性玻璃 重组人骨形成蛋白-2 骨扩增 动物实验
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rhBMP-2复合生物活性玻璃诱导成骨的实验研究 被引量:6
5
作者 杨秀文 刘洪臣 +2 位作者 王会信 宁江海 王东胜 《口腔颌面修复学杂志》 2005年第2期84-85,88,共3页
目的:探讨生物活性玻璃(bioactiveglassBG)对重组人骨形成蛋白-2(recombinanthumanbonemorphogeneticprotein-2,rhBMP-2)诱导骨形成的影响。方法:6只大鼠皮下袋植入rhBMP-2/BG,0.2mg0.5mgrhBMP-2,并设空白对照组。植入后3周行组织学检... 目的:探讨生物活性玻璃(bioactiveglassBG)对重组人骨形成蛋白-2(recombinanthumanbonemorphogeneticprotein-2,rhBMP-2)诱导骨形成的影响。方法:6只大鼠皮下袋植入rhBMP-2/BG,0.2mg0.5mgrhBMP-2,并设空白对照组。植入后3周行组织学检查。结果:0.5mg组rhBMP-2/BG具有成骨作用,其骨化过程类似于膜内化骨的直接骨形成。结论:rhBMP-2/BG复合物能诱导新骨形成,表明BG适合作为rhBMP-2载体。 展开更多
关键词 重组人骨形成蛋白-2 载体 骨替代材料 RHbmp-2 载体复合物
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异体DBM骨粒复合rhBMP-2及骨水泥材料修复骨缺损的实验研究 被引量:5
6
作者 周勇 陈硕 +1 位作者 范清宇 杨彤涛 《中国骨肿瘤骨病》 2008年第6期361-363,共3页
目的探讨异体脱钙骨基质(DBM)骨粒、骨水泥(BC)及重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)复合材料修复实验性骨缺损的能力。方法复合材料植入兔实验性尺骨骨缺损部位(A组),B组植入纯骨水泥棒材作为对照。不同时间行组织学、印度墨汁动脉血管... 目的探讨异体脱钙骨基质(DBM)骨粒、骨水泥(BC)及重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)复合材料修复实验性骨缺损的能力。方法复合材料植入兔实验性尺骨骨缺损部位(A组),B组植入纯骨水泥棒材作为对照。不同时间行组织学、印度墨汁动脉血管灌注及材料自然断面扫描电镜观察。结果材料植入第2周表面纤维组织样完整包膜形成,材料外周及两端血管形成密集,并向材料中长入;第4、8、12周新生血管明显增多,且深入至材料中央,新生间充质组织继续大量长入;包绕DBM骨粒的间充质组织部分4周转化为软骨。第8、12周软骨趋于成熟,可见含有造血骨髓的新生骨组织形成,其间可见较多的哈佛氏系统;同时,可见明显DBM骨粒被新生组织爬行吸收现象。第4周原自然裂隙部分已被结构紊乱的胶原纤维束充填。第8至12周,可见大量排列紊乱的矿化骨结构沿多方向长入,新生骨组织附于脱钙骨基质骨粒及骨水泥表面,原自然裂隙几近消失。植入B组材料者除外被纤维膜外余无变化。结论脱钙骨基质骨粒、骨形态发生蛋白、骨水泥复合材料具有良好的骨诱导及骨引导生成作用,是良好的骨缺损修复材料。 展开更多
关键词 脱钙骨基质骨粒 重组人骨形态发生蛋白-2 骨水泥 骨缺损
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骨形态发生蛋白-2单克隆抗体的制备及评价
7
作者 刘启省 张东刚 +3 位作者 南南 王金恒 陈亮 徐丽明 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1310-1317,共8页
目的:制备骨形态发生蛋白-2(BMP-2)单克隆抗体,并对其进行评价。方法:用重组人源BMP-2蛋白(rh BMP-2)对小鼠进行免疫;确认小鼠血清BMP-2抗体检测阳性后,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞按3∶1的比例融合得到杂交瘤细胞株;用间接竞争ELISA法... 目的:制备骨形态发生蛋白-2(BMP-2)单克隆抗体,并对其进行评价。方法:用重组人源BMP-2蛋白(rh BMP-2)对小鼠进行免疫;确认小鼠血清BMP-2抗体检测阳性后,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞按3∶1的比例融合得到杂交瘤细胞株;用间接竞争ELISA法筛选BMP-2阳性单克隆杂交瘤细胞;用常规Protein G进行纯化得到BMP-2单克隆抗体,并对其纯度、表位构相,特异性进行评价。结果:成功制备BMP-2单克隆抗体,其亚型为IgG2a,κ,纯化后的SDS-PAGE纯度大于90%。评价结果表明,本课题组研制的BMP-2抗体与rhBMP-2的结合位点为非线性表位,且特异性优于市售抗体,与BMP家族的BMP-4、BMP-5、BMP-7无交叉反应。结论:本课题组研制的单克隆抗体特异性好,效价高,可用于建立酶联免疫方法,检测骨修复材料中BMP-2含量。 展开更多
关键词 单克隆抗体 骨形态发生蛋白-2(bmp-2) 重组人源bmp-2蛋白(rhbmp-2) 表位构相 特异性 骨修复材料 bmp-2含量
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重组人BMP-2对人肝癌SSMC-7721细胞迁移和侵袭能力的影响 被引量:1
8
作者 黄龙璋 胡炜华 +1 位作者 余静 吴建兵 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2010年第1期29-32,36,共5页
目的观察重组人骨形成蛋白2(rhBMP-2)对人肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭能力的影响。方法以人肝癌SMMC-7721细胞株为研究对象,取对数期生长的SMMC-7721细胞随机分为4组:rhBMP-2200、400、600μg.L-1组和对照组。rhBMP-2200、400、600μg.... 目的观察重组人骨形成蛋白2(rhBMP-2)对人肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭能力的影响。方法以人肝癌SMMC-7721细胞株为研究对象,取对数期生长的SMMC-7721细胞随机分为4组:rhBMP-2200、400、600μg.L-1组和对照组。rhBMP-2200、400、600μg.L-1组分别加入rhBMP-2200、400、600μg.L-1,对照组加入2mLRPMI1640培养基。分别于12、24、48h后,用细胞划痕法检测细胞体外迁移能力,Transwell小室测定法检测细胞体外侵袭能力。结果rhBMP-2200、400、600μg.L-1组12、24、48hSMMC-7721细胞迁移率与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05),且rhBMP-2200、400、600μg.L-1组各组间差异具有统计学意义(P<0.05)。rhBMP-2200、400、600μg.L-1组12、24、48hSMMC-7721细胞穿膜数与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05),rhBMP-2200、400、600μg.L-1组各组间差异具有统计学意义(P<0.05)。rhBMP-2200、400、600μg.L-1组12、24hSMMC-7721细胞迁移率、细胞穿膜数与48h比较差异均有统计学意义(均P<0.05),浓度与时间无交互作用。结论BMP-2可增加人肝癌SMMC-7721细胞的侵袭和迁移能力,且呈时间-浓度依赖性;阻滞BMP-2的表达可能成为抑制肝癌转移的一个潜在靶点。 展开更多
关键词 人肝癌SMMC-7721细胞株 重组人bmp-2 迁移 侵袭
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携载rhBMP-2微球的新型复合人工骨的制备及生物相容性研究 被引量:1
9
作者 费正奇 胡蕴玉 +3 位作者 吴道澄 吴红 白建萍 栗向东 《生物医学工程与临床》 CAS 2006年第4期201-205,共5页
目的制备一种具有良好生物相容性、降解性和成骨活性、可注射的自凝固新型骨修复材料。方法采用复乳溶剂挥发方法制备携载rhBMP-2的聚乳酸与聚乙醇酸共聚物(PLGA)微球,并将其与rhBMP-2/磷酸钙骨水泥(CPC)复合,制备出rhBMP-2/PLGA微球/CP... 目的制备一种具有良好生物相容性、降解性和成骨活性、可注射的自凝固新型骨修复材料。方法采用复乳溶剂挥发方法制备携载rhBMP-2的聚乳酸与聚乙醇酸共聚物(PLGA)微球,并将其与rhBMP-2/磷酸钙骨水泥(CPC)复合,制备出rhBMP-2/PLGA微球/CPC复合人工骨。探讨材料特性包括形貌和体外rhBMP-2释放速度,采用体外细胞培养的方法测定复合材料的细胞黏附能力及其浸提液对于人骨髓基质干细胞(MSCs)增殖和成骨分化的影响。结果与单纯rhBMP-2/CPC材料相比较,复合材料rhBMP-2体外释药明显提高。材料与MSCs可良好黏附并使其增殖。体外培养时材料不同时间的浸提液对MSCs细胞的增殖具有促进作用,对于细胞成骨分化的影响与单纯CPC无明显差别。结论rhBMP-2/PLGA微球/磷酸钙骨水泥新型复合人工骨具有良好的生物相容性和活性因子缓释功能,是一种有良好应用前景的骨修复材料。 展开更多
关键词 聚乳酸与聚乙醇酸共聚物 微球 磷酸钙骨水泥 重组人骨形态蛋白-2 骨替代物
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人类BMP-2基因启动子位置的预测
10
作者 胡飞 周磊 +1 位作者 张雪洋 吴王喜 《中华老年口腔医学杂志》 2005年第3期139-141,共3页
目的:预测人类BMP-2基因启动子位置和可能的转录因子结合位点。方法:从Genebank中获得BMP-2的全长编码基因,利用firstEF,footprinter和Consite软件对人类BMP-2基因,小鼠BMP-2基因,鸡BMP-2基因的5’侧翼序列进行生物信息学分析。结果:用f... 目的:预测人类BMP-2基因启动子位置和可能的转录因子结合位点。方法:从Genebank中获得BMP-2的全长编码基因,利用firstEF,footprinter和Consite软件对人类BMP-2基因,小鼠BMP-2基因,鸡BMP-2基因的5’侧翼序列进行生物信息学分析。结果:用firstEF软件预测BMP-2基因的启动子区可能位于(-513..57),用footprinter软件证实其位于BMP-2基因的进化保守区,用Consite软件预测可能的转录因子结合位点。结论:(-513..57)为最可能的启动子区。 展开更多
关键词 启动子 生物信息学 人类bmp-2基因 骨质疏松症
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抑制性ELISA法检测药械组合产品中rhBMP-2的含量
11
作者 陈亮 刘启省 +2 位作者 苑晓佩 张东刚 徐丽明 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1304-1309,共6页
目的:建立抑制性酶联免疫吸附分析法检测药械组合产品(骨植入物)中rhBMP-2的含量。方法:将含rhBMP-2的骨植入物匀浆后,先与rhBMP-2抗体溶液反应,再将剩余抗体与包被的rhBMP-2进行显色反应,骨修复材料对显色反应的抑制程度与其所含的rhBM... 目的:建立抑制性酶联免疫吸附分析法检测药械组合产品(骨植入物)中rhBMP-2的含量。方法:将含rhBMP-2的骨植入物匀浆后,先与rhBMP-2抗体溶液反应,再将剩余抗体与包被的rhBMP-2进行显色反应,骨修复材料对显色反应的抑制程度与其所含的rhBMP-2含量成正比,从而能准确测定组合产品中rhBMP-2的含量。通过对rhBMP-2包被浓度、rhBMP-2抗体浓度的优化,建立该方法的基本实验条件;并对检测方法的标准曲线范围、检测回收率、精密度、可重复性进行验证;用该方法对复合不同rhBMP-2含量的骨修复材料进行检测。结果:建立的抑制性酶联免疫吸附分析方法标准曲线线性良好(R^2=0.998),质量浓度范围为0.078~10μg·mL^(-1),检测回收率均在理论值±20%范围内,实验内精密度和实验间精密度验证数据RSD均小于15%,不同操作人员对检测结果无显著影响。用该方法实现了对rhBMP-2含量分别5、10、50μg·g^(-1)的骨修复材料的准确检测。结论:本研究建立了抑制性酶联免疫吸附分析方法,弥补了仅通过工艺参数计算间接确定药械组合产品中rhBMP-2含量的不足,实现了药械组合产品中rhBMP-2含量的直接准确检测。 展开更多
关键词 组合产品 重组人骨形态发生蛋白-2(rhbmp-2) 抑制性酶联免疫吸附分析方法(ELISA) rhbmp-2含量 骨植入物
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Capacity of bone induction of compound material of decalcified bone matrix combined with rhBMP-2 and impregnated with bone cement 被引量:3
12
作者 周勇 董玉霞 +1 位作者 范清宇 文艳华 《中国临床康复》 CSCD 2003年第6期1010-1011,共2页
AIM:To analyze bone inductive capacity of the compound material of decalcified bone matrix combined with rhBMP 2 and impregnated with bone cement.METHODS:To assess the experimental study, histological and Masson’s me... AIM:To analyze bone inductive capacity of the compound material of decalcified bone matrix combined with rhBMP 2 and impregnated with bone cement.METHODS:To assess the experimental study, histological and Masson’s methods were used.RESULTS:The effects of compound material on the induction of bone formation were investigated in NIH mouse models.It was observed that in the with rhBMP 2 group, mesenchymal cells gathered in the implanted material at the 7th day postoperation,chondrogenesis were found at 14 to 21 days after implantation,new bone formation were observed at about 21 to 28 days after surgery and the DBM particles were absorbed by the new generated tissues gradually.CONCLUSIONS:The compound material of DBM combined with rhBMP 2 and impregnated with bone cement could induce the proliferation and migration of mesenchymal tissues that could be differentiated into cartilage and formed new bone finally.The new bone could absorb DBM particles gradually.The compound material had fair capacity of bone induction. 展开更多
关键词 异体脱钙骨 基质骨粒 骨水泥 骨形态发生蛋白 复合材料 诱导活性
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人BMP2及VEGF双基因共表达腺病毒穿梭质粒的构建及鉴定 被引量:1
13
作者 孙立 田晓滨 +2 位作者 张宇坤 郜勇 杨述华 《山东医药》 CAS 北大核心 2006年第14期8-10,共3页
目的构建人骨形态发生蛋白2(BM P 2)与血管内皮生长因子(VEGF)双基因腺病毒穿梭质粒。方法对pCU-CAGG S-hVEGF 165的目的基因亚克隆并引入新的酶切位点,定向连入腺病毒穿梭载体pShu ttle-CM V,将质粒pcDNA 3.1-BM P 2及pIRES酶切后,将BM... 目的构建人骨形态发生蛋白2(BM P 2)与血管内皮生长因子(VEGF)双基因腺病毒穿梭质粒。方法对pCU-CAGG S-hVEGF 165的目的基因亚克隆并引入新的酶切位点,定向连入腺病毒穿梭载体pShu ttle-CM V,将质粒pcDNA 3.1-BM P 2及pIRES酶切后,将BM P 2和IRES片段定向连入pShu ttle-CM V-hVEGF 165,构建可同时表达两个目的基因重组质粒pShu ttle-CM V-hBM P 2-IRES-hVEGF 165,进行酶切分析及序列测定。结果酶切分析及核酸序列测定证实重组质粒构建正确。结论成功构建了BM P 2及VEGF双基因腺病毒穿梭质粒;为联合基因治疗骨缺损的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 bmp2基因 人VEGF基因 共表达 腺病毒穿梭质粒
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复合材料修复骨缺损血管化及结构特征变化 被引量:10
14
作者 周勇 范清宇 +2 位作者 蒋维中 文艳华 周慧 《第四军医大学学报》 2000年第8期998-1001,共4页
目的观察骨水泥、脱钙骨基质骨粒、骨形态发生蛋白生物性复合材料修复兔尺骨骨缺损血管化及结构特征变化 .方法 复合材料植入实验性骨缺损部位不同时间组行印度墨汁动脉血管灌注及材料自然断面扫描电镜观察 ,分析其血管生成及结构特征... 目的观察骨水泥、脱钙骨基质骨粒、骨形态发生蛋白生物性复合材料修复兔尺骨骨缺损血管化及结构特征变化 .方法 复合材料植入实验性骨缺损部位不同时间组行印度墨汁动脉血管灌注及材料自然断面扫描电镜观察 ,分析其血管生成及结构特征变化 .结果 材料植入第 2周即见材料外周及两端血管形成密集 ,开始向材料中长入 ;第 4,8,12周新生血管明显逐渐增多 ,且深入至材料中央 .第 4周原自然裂隙部分即骨水泥与骨粒间多点面状结合后其间存在的较多 10 0~40 0 μm不规则相互连通的裂隙已被结构紊乱的胶原纤维束充填 ,部分胶原矿化 .第 8至 12周 ,可见大量排列紊乱的矿化骨结构沿多方向长入 ,新生骨组织附于脱钙骨基质骨粒及骨水泥表面 ,原自然裂隙几近消失 .结论 骨水泥、脱钙骨基质骨粒、骨形态发生蛋白复合材料具有良好的骨诱导及骨引导生成作用 ,新生血管及新生骨组织诱导生成良好 ,是良好的骨缺损修复材料 . 展开更多
关键词 脱钙骨基质骨粒 骨水泥 bmp 修复 骨缺损血管化
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