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题名瓜类细菌性果斑病菌hrcN基因的生物学功能分析
被引量：10
- 1
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作者
严婉荣
王铁霖
杨玉文
戴良英
赵廷昌
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机构
中国农业科学院植物保护研究所
海南省农业科学院农业环境与植物保护研究所
湖南农业大学生物安全科学技术学院
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出处
《植物病理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期33-40,共8页
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基金
公益性行业(农业)科研专项(201003066)
国家西甜瓜产业技术体系(CARS-26)
中国农业科学院创新工程
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文摘
以分离自西瓜上的Aac5菌株为例,通过同源重组的方法,构建了hrc N基因插入缺失突变体,通过PCR方法和Southern blot验证突变菌株,对突变体进行致病性、致敏性、生长曲线和运动性测定。为明确hrc N基因与其他基因的关系,通过实时荧光定量PCR法定量检测了hrp A、hrc V、hrc U、Lux I、LuxR 5个基因的表达量。结果显示:与野生型相比,突变体致病力和致敏性明显减弱,致病时间延迟,群体感应信号减弱,生长能力明显下降,运动性减弱,互补菌株只能恢复部分功能;5个基因在突变体中的表达量均上调,hrc N基因与这5个基因之间均为负调控关系。说明hrc N基因在果斑病菌致病能力上发挥重要作用。
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关键词
果斑病菌
致病性
hrcn
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Keywords
Acidovorax citrulli
pathogenicity
hrcn
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分类号
S816.7
[农业科学—饲料科学]
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题名青枯菌Ⅲ型分泌系统HrcN原核表达与亚细胞定位
被引量：1
- 2
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作者
周大祥
杨俊年
龙泉洲
殷幼平
熊书
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机构
重庆大学生命科学学院
重庆三峡学院生物与食品工程学院
重庆三峡医药高等专科学校基础医学部
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出处
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第9期1228-1234,共7页
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基金
重庆市自然科学基金(cstc2016jcyjA0198)。
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文摘
为探究青枯菌Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system,T3SS)HrcN在致病过程中的功能,分别克隆青枯菌CBM613菌株的hrcN基因并连接至pET30a和pRI-eGFP载体,转化寄主细胞,开展原核表达及亚细胞定位研究。结果显示,HrcN蛋白是T3SS的结构组分之一,具有ATP酶活性,可在胞内水解ATP酶为效应蛋白的分泌过程提供能量。蛋白亚细胞定位预测表明,青枯菌HrcN蛋白定位于细胞内膜和细胞质,激光共聚焦定位结果显示,HrcN蛋白部分在叶绿体表达,部分在细胞内膜和细胞质表达,与蛋白亚细胞定位预测结果基本一致。据此推测HrcN是一种定位于细胞内膜上的外周蛋白,该结论为后续研究青枯菌T3SS的功能及其致病机制奠定基础。
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关键词
青枯菌
T3SS
hrcn
原核表达
亚细胞定位
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Keywords
Ralstonia solanacearum
T3SS
hrcn
Prokaryotic expression
Subcellular localization
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分类号
S432.1
[农业科学—植物病理学]
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题名青枯雷尔氏菌Ⅲ型分泌系统hrcN基因的功能分析
被引量：1
- 3
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作者
周大祥
龙泉洲
殷幼平
熊书
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机构
重庆大学生命科学学院/重庆市基因功能与调控重点实验室
重庆三峡学院生物与食品工程学院
重庆三峡医药高等专科学校基础医学部
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出处
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2021年第6期1353-1362,共10页
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基金
重庆市自然科学基金(cstc2016jcyjA0198)。
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文摘
hrcN是植物病原菌Ⅲ型分泌系统基因(T3SS)的结构基因之一,对病原菌的致病力有重要影响。本研究克隆青枯雷尔氏菌CBM613的hrcN基因并作生物信息学分析,结果显示该基因长度为1320 bp,共编码439个氨基酸,预测HrcN蛋白无信号肽,无跨膜区域,整体呈弱亲水性,该蛋白为ATP酶,定位于细胞内膜和细胞质。基因敲除结果显示,菌株CBM613的hrcN突变体与野生型菌株在富营养培养基上的生长速率差异不明显,而在贫营养培养基上前者的生长速率显著快于后者。敲除hrcN基因后,青枯雷尔氏菌的运动能力无明显变化,生物被膜形成能力显著降低。以敲除突变型和野生型青枯雷尔氏菌株接种番茄,与后者相比,前者的致病力下降,病情指数降低,病程延长,但并未完全丧失致病力,表明hrcN基因是青枯雷尔氏菌致病性相关的重要基因。本研究为进一步探索青枯雷尔氏菌致病机制及防治具有重要意义。
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关键词
青枯雷尔氏菌
T3SS
hrcn
基因敲除
功能分析
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Keywords
Ralstonia solanacearum
T3SS
hrcn
gene knock-out
functional analysis
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分类号
S432.1
[农业科学—植物病理学]
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题名蛋白质复合体非变性凝胶电泳技术及其应用新进展
被引量：5
- 4
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作者
孟庆石
张光祥
潘映红
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机构
四川师范大学生命科学学院
中国农业科学院作物科学研究所国家农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期57-64,共8页
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基金
国家自然科学基金(30971874)
国家"863"计划项目(2008AA10Z115)
转基因生物新品种培育科技重大专项(2009ZX08012-011B)
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文摘
非变性凝胶电泳技术是研究蛋白质复合体的强有力工具。重点介绍了蓝绿温和非变性凝胶电泳(BN-PAGE)技术的原理和特点,比较了由BN-PAGE衍生的蓝色温和琼脂糖凝胶电泳、清澈温和非变性凝胶电泳(CN-PAGE)和高分辨清澈温和非变性凝胶电泳(HrCN-PAGE)技术的差异和适用范围,并概括地介绍了这些技术在植物蛋白质复合体研究中应用的新进展。
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关键词
蓝绿温和非变性凝胶电泳
蓝绿温和琼脂糖凝胶电泳
清澈温和非变性凝胶电泳
高分辨清澈温和非变性凝胶电泳
植物蛋白质复合体
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Keywords
BN-PAGE Blue native agarose-acrylamide composite gel electrophoresis CN-PAGE hrcn-PAGE Plant protein complex
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分类号
Q51
[生物学—生物化学]
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题名MCFP敲除小鼠肝脏线粒体功能异常
- 5
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作者
周斌
陈慧
翟华立
王宪
杨晓明
于淼
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机构
军事科学院军事医学研究院生命组学研究所
蛋白质组学国家重点实验室
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出处
《军事医学》
CAS
北大核心
2019年第8期592-597,共6页
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基金
蛋白质组学国家重点实验室项目(SKLP-K201404).
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文摘
目的研究线粒体载体家族蛋白(MCFP)基因敲除对小鼠肝脏线粒体功能的影响。方法利用CRISP/Cas9技术建立MCFP基因敲除小鼠模型,并检测小鼠体质量、脏器系数、血生化以及糖代谢情况。分离小鼠原代肝实质细胞检测线粒体膜电位。提取肝脏线粒体,检测三磷酸腺苷(ATP)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平,利用非变性凝胶电泳偶联凝胶内酶活染色,检测线粒体呼吸链复合体活性。结果与同窝对照小鼠相比,MCFP敲除小鼠生理指标无明显差异,但线粒体膜电位及ATP水平降低,呼吸链复合体活性下降、ROS升高、SOD活性下降、MDA含量增加。结论MCFP基因敲除造成肝脏线粒体功能异常,提示MCFP在线粒体抗氧化损伤及合成ATP过程中发挥重要调控作用。
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关键词
线粒体载体家族蛋白
小鼠
基因敲除
肝
线粒体功能
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
呼吸链复合体
氧化应激
氧化损伤
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Keywords
mitochondrial carrier family protein
mouse,gene knockout
liver
mitochondrial function
hrcn-PAGE
respiratory chain complex
oxidative stress
oxidative damage
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分类号
Q244
[生物学—细胞生物学]
R575.1
[医药卫生—消化系统]
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