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UPLC-MS/MS法测定人尿液中新蛭素及其活性代谢产物水蛭素 被引量：6
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作者 董晓娜 孟志云 +4 位作者 顾若兰 朱晓霞 甘慧 靳继德 窦桂芳 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期427-436,共10页
目的:建立同时测定人尿液中新蛭素及其活性代谢产物水蛭素的超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS/MS)方法,用于注射用重组新蛭素Ⅰ期临床试验健康受试者尿液的药动学研究。方法:采用新蛭素的类似肽MEH作为内标,50μL尿液样品加入等体积的50... 目的:建立同时测定人尿液中新蛭素及其活性代谢产物水蛭素的超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS/MS)方法,用于注射用重组新蛭素Ⅰ期临床试验健康受试者尿液的药动学研究。方法:采用新蛭素的类似肽MEH作为内标,50μL尿液样品加入等体积的50μL空白人血清经300μL甲醇沉淀蛋白后,通过Waters BEH300 C18色谱柱(300,2.1 mm×50 mm,1.7μm)分离,柱温为40℃,流动相为水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸),梯度洗脱,流速为0.3 mL·min-1,色谱运行时间为5 min,进样体积为5μL。采用电喷雾电离源正离子多反应监测检测。新蛭素,水蛭素和内标的监测反应质荷比(m/z)分别为1 042.4→1 280.4,1 152.1→1 352.8,1 063.3→1 332.1。对该方法的选择性与残留、标准曲线与定量下限、准确度与精密度、基质效应与回收率、稀释可靠性与稳定性进行了全面的验证。结果:新蛭素和水蛭素的线性范围均为10~2 000 ng·mL^-1,定量下限均为10 ng·mL^-1,新蛭素和水蛭素的批内和批间精密度为5.4%~13.9%和3.7%~12.2%,准确度为-6.6%^-0.2%;残留、基质效应与回收率、稀释效应与稳定性均在可接受的范围内。结论:该方法符合生物分析指导原则的要求,满足注射用重组新蛭素临床Ⅰ期药动学的尿液排泄研究。 展开更多
关键词 新蛭素 水蛭素 超高效液相色谱-质谱联用法 尿液排泄
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