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高通量筛查和安全评估结合评价乳制品包装安全风险 被引量:3
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作者 邓玉明 潘祥华 唐蕾 《包装工程》 CAS 北大核心 2023年第7期168-176,共9页
目的以乳制品包装为研究对象,建立一套科学评价食品接触材料安全风险的方法,全面评价食品接触材料在接触食品过程中带来的食品安全风险。方法采用非靶向高通量筛查检测技术全面筛查食品模拟物中的重金属和有机物,根据权威数据库和物质... 目的以乳制品包装为研究对象,建立一套科学评价食品接触材料安全风险的方法,全面评价食品接触材料在接触食品过程中带来的食品安全风险。方法采用非靶向高通量筛查检测技术全面筛查食品模拟物中的重金属和有机物,根据权威数据库和物质毒理学资料进行危害评估,参考欧盟和美国膳食暴露量计算方法进行暴露评估,结合评估结果计算风险系数,最终表征食品接触材料的安全风险。结果抽取了市面上的塑料、金属、涂料及复合包装等不同材质的乳制品包装进行检测,检出铜、铬、锰和锡等元素,以及有意添加物(如单体、溶剂、抗氧剂、光引发剂、爽滑剂、增塑剂等)、非有意添加物质(如抗氧剂降解产物、寡聚物等)。采用暴露评估和危害评估方法分别表征检出物的膳食暴露和健康指导值,安全风险评估风险系数分布在0.007%~9.4%之间,安全风险较低。结论建立的食品接触材料安全评价方法是一种有效评价食品接触材料安全风险的方法,该方法具有一定的通用性,企业、行业和政府部门等可用于识别食品接触材料的安全风险,为减少和排除安全风险提供科学依据。 展开更多
关键词 高通量筛查技术 危害评估 毒理评估 食品接触材料 食品安全 安全风险评价
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烟草青枯病拮抗菌的高通量筛选及其复配菌群防效评估
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作者 陶正朋 刘艳霞 +9 位作者 李想 彭宇 李寒 陈丽萍 徐健 王克敏 穆东升 王致尧 蒋天平 宗仪 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2024年第2期35-45,共11页
构建烟草青枯病的高效生防菌群对生物防控病害至关重要。本研究从高抗烟草青枯病的品种岩烟97根际高通量分离细菌,通过平板喷雾对峙法和趋化特异性检测筛选出趋化性的青枯菌拮抗细菌,采用启发式算法选取拮抗单菌株并组合成生防菌群。通... 构建烟草青枯病的高效生防菌群对生物防控病害至关重要。本研究从高抗烟草青枯病的品种岩烟97根际高通量分离细菌,通过平板喷雾对峙法和趋化特异性检测筛选出趋化性的青枯菌拮抗细菌,采用启发式算法选取拮抗单菌株并组合成生防菌群。通过盆栽试验评估复配菌群对感病烤烟品种红花大金元的抗病效果,利用荧光定量PCR技术检测其对根际土壤中的青枯菌的消减,通过Biolog碳源芯片技术分析该菌群对烟草根际微生态的影响。结果表明,共筛选到青枯菌拮抗菌109株,其中抑菌圈直径超过20 mm的菌株25株,从中优选了3株相互之间具备相容性、具有趋化基因CheA与生物膜形成能力的拮抗菌,组合成复配菌群(Y364+Y832+Y878)。16s DNA分子鉴定表明,Y364、Y832和Y878分别为烟磺假单胞菌(Pseudomonas nicosulfuronedens)、德里假单胞菌(Pseudomonas delhiensis)和高原芽胞杆菌(Bacillus altitudinis)。最终盆栽试验表明,复配菌群防效为79.75%,比单一菌株平均防效高36.22个百分点,发病率较Y364、Y832、Y878处理分别降低33.33、45.68和35.80个百分点,根际土壤青枯菌的数量显著低于CK,对根际土壤微生物功能多样性增加最大。该复配菌群具有潜在的协同增效和根际定殖能力,可为烟草青枯病的生物防治提供更多的生防资源。 展开更多
关键词 烟草青枯病 高通量筛选 生防菌复配 Biolog碳源芯片技术 生物防控
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基于高通量筛选的双特异性抗体纯化方法开发
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作者 甘远春 梁忠爽 +1 位作者 丁澦 张为杰 《生物化工》 2023年第1期23-29,42,共8页
双特异性抗体(BsAbs),简称双抗,是一种能同时结合两个不同靶点或表位的抗体,BsAbs在表达过程中通常伴随产生多种副产物,在纯化工艺中很难被去除。本研究运用高通量筛选技术,通过对SP Sepharose Fast Flow填料的纯化条件进行探索,建立基... 双特异性抗体(BsAbs),简称双抗,是一种能同时结合两个不同靶点或表位的抗体,BsAbs在表达过程中通常伴随产生多种副产物,在纯化工艺中很难被去除。本研究运用高通量筛选技术,通过对SP Sepharose Fast Flow填料的纯化条件进行探索,建立基于Sepharose Fast Flow填料的双特异性抗体纯化方法开发的通用流程,每个筛选条件只需要0.4 mg双抗样品,可同时筛选多达32个条件,筛选过程总耗时2 h,而传统柱层析需耗时64 h。通过高通量迅速筛选方法可以有效去除双抗分子副产物,为解决纯化工艺难题提供了一种新的工艺路线。 展开更多
关键词 双特异性抗体 高通量筛选技术 纯化 SP Sepharose Fast Flow
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谷氨酸棒杆菌人工核糖体结合位点(RBS)文库的建立与应用
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作者 张悦 张继伟 +3 位作者 吴硕 徐宁 刘君 魏亮 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第23期25-32,共8页
核糖体结合位点(ribosome binding site,RBS)是一种重要的生物控制元件,是实现基因表达精细调控的重要工具,在微生物代谢工程和合成生物学中具有广泛的应用。谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)是一种重要的工业微生物,被广泛应... 核糖体结合位点(ribosome binding site,RBS)是一种重要的生物控制元件,是实现基因表达精细调控的重要工具,在微生物代谢工程和合成生物学中具有广泛的应用。谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)是一种重要的工业微生物,被广泛应用于多种氨基酸和有机酸的工业化发酵生产。然而目前,关于谷氨酸棒杆菌RBS元件文库的报道仍然较少。该研究基于谷氨酸棒杆菌RBS序列基本特征,设计构建了一个随机RBS文库。利用流式细胞分选技术和96孔板筛选技术,建立了RBS文库高通量筛选方法。通过2步筛选,构建了一个调控范围广,覆盖范围均匀的人工RBS元件文库,调控范围达到29.04倍。利用α-淀粉酶表达系统对构建的人工RBS文库进行测试和表征,结果表明人工RBS文库具有较高的稳定性和通用性。随后该研究将人工RBS文库应用于L-高丝氨酸生物合成途径的调控优化。利用不同强度RBS元件对L-高丝氨酸合成途径关键酶LysCr和Homr进行精细表达调控,获得了具有高效L-高丝氨酸合成能力的最佳组合,L-高丝氨酸产量到达12.7 g/L,比野生型菌株高丝氨酸含量提高了3.6倍。综上所述,该研究构建了一个调控范围广、稳定性高的谷氨酸棒杆菌人工RBS文库,为谷氨酸棒杆菌代谢工程改造和基因精细表达调控提供了有效的控制元件。 展开更多
关键词 谷氨酸棒杆菌 人工核糖体结合位点文库 高通量筛选 L-高丝氨酸
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酶高效表达体系构建及高通量筛选关键技术 被引量:4
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作者 林影 韩双艳 +1 位作者 袁清焱 李承 《生物产业技术》 2019年第3期44-53,共10页
酶作为生物催化剂已被广泛地应用于医药、食品、化工、能源及轻工业等领域,随着低碳经济发展及绿色制造的发展需求,酶制剂应用领域不断拓展。随着当今生命科学前沿技术飞速发展,生物信息学、分子进化、基因组学和蛋白质组学等先进技术... 酶作为生物催化剂已被广泛地应用于医药、食品、化工、能源及轻工业等领域,随着低碳经济发展及绿色制造的发展需求,酶制剂应用领域不断拓展。随着当今生命科学前沿技术飞速发展,生物信息学、分子进化、基因组学和蛋白质组学等先进技术被应用于新酶分子的挖掘与改造。而代谢工程及反应过程工程成为酶制剂发酵生产调控的关键。同时,酶制剂高效表达菌株及其高通量筛选技术平台的构建也是新酶发现与工业化生产的重要桥梁。本文从酶高效表达载体和宿主出发,重点介绍了高效表达体系的构建原理和方法,包括重组酶表达载体表达元件的优化、重组酶基因表达量的增加、提高酶蛋白质的折叠通量、优化蛋白分泌运输途径、降低蛋白降解途径的作用、初级代谢途径的优化等。还总结了高效菌株的筛选方法,并展开合理预测。 展开更多
关键词 酶分子高效表达 菌株构建 高通量筛选技术
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高通量药物筛选现代检测技术研究进展 被引量:4
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作者 郑枫 刘文英 吴峥 《中国科学:化学》 CSCD 北大核心 2010年第6期599-610,共12页
高通量药物筛选是发现创新药物的重要技术途径.高通量筛选结果必须通过适当的检测方法才能反映出来,检测技术是实现高通量药物筛选的基础.本文综述了近年来有关光学分析、色谱分析、热分析、电化学分析、质谱、核磁共振等现代检测技术... 高通量药物筛选是发现创新药物的重要技术途径.高通量筛选结果必须通过适当的检测方法才能反映出来,检测技术是实现高通量药物筛选的基础.本文综述了近年来有关光学分析、色谱分析、热分析、电化学分析、质谱、核磁共振等现代检测技术在高通量药物筛选研究中的进展. 展开更多
关键词 高通量药物筛选 现代检测技术
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蛋白质定向进化的高通量筛选方法 被引量:2
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作者 黄春晓 段学军 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2008年第4期653-656,共4页
定向进化是改造蛋白质分子的有效新策略。创建突变库的方法已经有很多而且比较通用,而建立有效的高通量的筛选方法是蛋白质定向进化成功的关键。本文综述了近几年发展起来的用于定向进化的高通量的文库筛选方法,介绍了各种展示技术及流... 定向进化是改造蛋白质分子的有效新策略。创建突变库的方法已经有很多而且比较通用,而建立有效的高通量的筛选方法是蛋白质定向进化成功的关键。本文综述了近几年发展起来的用于定向进化的高通量的文库筛选方法,介绍了各种展示技术及流式细胞分选技术的原理及其在文库筛选中的应用,分析了存在的问题及发展趋势。 展开更多
关键词 定向进化 高通量筛选方法 展示技术 流式细胞分选技术
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非生物学药物筛选方法及其应用 被引量:2
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作者 刘玉荣 李剑勇 杨亚军 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期2671-2673,共3页
分子印迹技术、高通量筛选技术、生物芯片技术、生物信息学技术是4种常用的非生物学药物筛选技术。文章简要介绍了每项技术的概念、原理和应用,以期使其更广泛地应用于抗病毒等筛选难度大的药物筛选领域。
关键词 药物筛选 分子印迹技术 高通量筛选技术 生物芯片技术 生物信息学技术
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易错PCR技术提高嗜热酸性Ⅲ型普鲁兰水解酶TK-PUL催化活性的研究 被引量:1
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作者 曾静 郭建军 袁林 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第18期130-136,共7页
嗜热酸性Ⅲ型普鲁兰水解酶TK-PUL在液化条件下可完全水解淀粉为淀粉糖,在“液化糖化一步法”的淀粉制糖工艺中具有巨大的应用潜力。本研究拟采用易错聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术提高TK-PUL的催化活性。经过两轮... 嗜热酸性Ⅲ型普鲁兰水解酶TK-PUL在液化条件下可完全水解淀粉为淀粉糖,在“液化糖化一步法”的淀粉制糖工艺中具有巨大的应用潜力。本研究拟采用易错聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术提高TK-PUL的催化活性。经过两轮易错PCR及高通量筛选,获得了催化活性提高的突变体L538D。与TK-PUL相比,L538D以可溶性淀粉为底物的比酶活力提高了50%,以普鲁兰多糖为底物的比酶活力提高了21%;L538D以可溶性淀粉、普鲁兰多糖为底物的k/K值分别提高了44%、27%。即L538D的α-1,4-糖苷键水解活性和α-1,6-糖苷键水解活性均明显提高,并且其α-1,4-糖苷键水解活性的提高幅度更大。同源模建得到的蛋白质分子结构显示,将TK-PUL中Leu538替换为Asp,可能通过缩短氨基酸残基侧链的长度和减弱氨基酸残基的疏水性,提高了催化活性位点Glu538所在loop结构的柔性,从而提高酶的催化活性。本研究结果表明,TK-PUL中Leu538是影响其催化活性的重要氨基酸残基。 展开更多
关键词 Ⅲ型普鲁兰多糖水解酶 定向进化 易错聚合酶链式反应(易错PCR) 高通量筛选技术 催化活性本
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几种常见药物筛选的新技术
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作者 谢德平 陆国权 《现代中药研究与实践》 CAS 2009年第4期79-81,共3页
药物筛选的发展和新技术的出现是紧密相关的,文章对当前药物筛选中较常用的双杂交技术、基因工程技术、高通量筛选和生物信息学从概念、原理、优点、缺点和应用领域等方面作了简单的阐述,以期为相关的人员提供参考。
关键词 药物筛选 双杂交 基因工程 高通量筛选 生物信息学 技术
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High-throughput Three-dimensional Gel Electrophoresis for Versatile Utilities: A Stacked Slice-gel System for Separation and Reactions (4SR)
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作者 Md. Salimullah Masaki Mori Koichi Nishigaki 《Genomics, Proteomics & Bioinformatics》 SCIE CAS CSCD 2006年第1期26-33,共8页
A novel high-throughput system, called the stacked slice-gel system for separation and reactions (4SR), was developed for the analysis of DNA/RNA and protein/peptide. The system provides a novel three-dimensional ge... A novel high-throughput system, called the stacked slice-gel system for separation and reactions (4SR), was developed for the analysis of DNA/RNA and protein/peptide. The system provides a novel three-dimensional gel electrophoresis approach that exploits the property of stacked slice gels. It allows multiple samples simultaneously to react as well as to be separated, offering a two-dimensional (m×n) sample loading system. For this purpose, high-throughput multi-micro vessels (MMVs) containing variable numbers of wells (100 wells in this paper) have been used, which are made of 25 mm square-size polyacrylamide gels. Furthermore, after electrophoretic separation, a slice gel containing a desired sample can be easily removed and proceeded to the next step. Different biological reactions as well as successive separation of products were effectively carried out dealing with DNA/RNA and protein/peptide. It shows that this system has a diversity of potentials to be developed. 展开更多
关键词 three-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (3D-PAGE) high-throughput screening three-dlmensional separation microarray technology
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荧光激活细胞分选技术加速酶定向进化 被引量:1
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作者 朱润涛 高浩峰 +4 位作者 杨一帆 刘永琪 李佳祺 张霞 胡南 《生物加工过程》 CAS 2021年第3期234-240,共7页
目前,定向进化技术是改造工业酶的主要方法,而高通量筛选技术是酶定向进化的瓶颈技术之一。其中,荧光激活细胞分选技术(FACS)因其具有极高的筛选效率和广阔的通用性逐渐成为酶定向进化中首选的高通量筛选技术。依据不同的区室化策略,将... 目前,定向进化技术是改造工业酶的主要方法,而高通量筛选技术是酶定向进化的瓶颈技术之一。其中,荧光激活细胞分选技术(FACS)因其具有极高的筛选效率和广阔的通用性逐渐成为酶定向进化中首选的高通量筛选技术。依据不同的区室化策略,将荧光激活细胞分选技术分成细胞、液滴和微室高通量筛选技术。本文综述这3种新兴的筛选方法在技术方面的优劣势,并展望荧光激活细胞分选技术在未来的应用前景。 展开更多
关键词 定向进化 高通量筛选技术 荧光激活分选技术 区室化策略
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高通量筛选技术用于金属硫化物修饰的TiO_2的光催化性能分析
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作者 田瑞星 马国栋 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1066-1070,共5页
基于高通量筛选技术和喷墨打印,建立了一种快速分析不同配比的光催化剂催化效率的方法。采用光刻法制备了具有数以千计的独立反应单元的微反应芯片,选择Ni、Cd、Zn 3种金属元素掺杂TiO_2,建立了900种不同组装硫化物金属TiO_2催化剂库。... 基于高通量筛选技术和喷墨打印,建立了一种快速分析不同配比的光催化剂催化效率的方法。采用光刻法制备了具有数以千计的独立反应单元的微反应芯片,选择Ni、Cd、Zn 3种金属元素掺杂TiO_2,建立了900种不同组装硫化物金属TiO_2催化剂库。再以不同微反应单元的荧光为基础,通过一次实验反应,快速筛选出具有不同比例的3种高效光催化材料的微反应芯片:(Ni_(0.28)Cd_(0.32)Zn_(0.40)) SX/TiO_2,(Ni_(0.43)Cd_(0.29)Zn_(0.28))SX/TiO_2,(Ni_(0.17)Cd_(0.56)) SX/TiO_2。此外,通过宏观验证实验对筛选出的3种催化剂活性进行验证,同时与纯TiO_2降解曙红溶液进行对比。结果测得3种催化剂的降解率分别达94.2%、90.5%和87.6%,而纯TiO_2的降解效率最低(41.3%)。表明筛选出的3种催化剂对曙红溶液具有高效的光催化降解性能。 展开更多
关键词 高通量筛选技术 喷墨打印 TIO2 微反应芯片 光催化
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酮还原酶在罗苏伐他汀制备中的应用
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作者 张淑蓉 李雷雷 +1 位作者 文军 梁国娟 《西南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2015年第2期86-90,共5页
将酮还原酶应用于降血脂药罗苏伐他汀的制备.通过高通量筛选,酮还原酶KRED-4可催化罗苏伐他汀乙酯的制备反应.经过反应条件的初步优化后,确定了该酶催化反应的最适温度为25~35℃、最适pH值为6.0、初始底物浓度1g/L和酶浓度2g/L.在最优... 将酮还原酶应用于降血脂药罗苏伐他汀的制备.通过高通量筛选,酮还原酶KRED-4可催化罗苏伐他汀乙酯的制备反应.经过反应条件的初步优化后,确定了该酶催化反应的最适温度为25~35℃、最适pH值为6.0、初始底物浓度1g/L和酶浓度2g/L.在最优条件下,可将底物1完全转化为产物2罗苏伐他汀乙酯,产物的构型完全正确,且de〉99.9%,为建立罗苏伐他汀制备的绿色工艺提供了新的思路. 展开更多
关键词 罗苏伐他汀 酮还原酶 高通量筛选 绿色工艺
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谷氨酸棒杆菌细胞工厂育种策略以及高通量筛选技术的研究进展
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作者 李业 孟丽虹 +1 位作者 严豪 白仲虎 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第21期276-283,共8页
谷氨酸棒杆菌作为工业生产氨基酸及众多高附加值产品的工程菌株,是一种绿色高效的底盘微生物,已被开发为工业微生物细胞工厂。设计与构建高效工业微生物细胞工厂是绿色生物制造的重要基础,也是促进实现“碳中和”目标的重要途径之一。... 谷氨酸棒杆菌作为工业生产氨基酸及众多高附加值产品的工程菌株,是一种绿色高效的底盘微生物,已被开发为工业微生物细胞工厂。设计与构建高效工业微生物细胞工厂是绿色生物制造的重要基础,也是促进实现“碳中和”目标的重要途径之一。微生物育种及高通量筛选技术是创制高效微生物细胞工厂和生物产业技术创新的重要方向。文章结合实际案例针对谷氨酸棒杆菌细胞工厂的育种策略和高通量筛选技术进行综述,以期为谷氨酸棒杆菌选育领域的相关研究提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 谷氨酸棒杆菌 微生物细胞工厂 育种 高通量筛选技术
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