目的:获得一个具有丰富来源的肝细胞生产技术。方法:取本地杂种小猪作为肝细胞供体,用胶原酶原位门腔循环灌注法分离获取肝细胞。置于 DMEM-猪门静脉血清体系中进行微载体粘附悬浮培养。观察细胞生长情况并动态检测培养上清中白蛋白及...目的:获得一个具有丰富来源的肝细胞生产技术。方法:取本地杂种小猪作为肝细胞供体,用胶原酶原位门腔循环灌注法分离获取肝细胞。置于 DMEM-猪门静脉血清体系中进行微载体粘附悬浮培养。观察细胞生长情况并动态检测培养上清中白蛋白及尿素浓度。结果:每只猪肝获取肝细胞数为(4.26±0.75)×10^(10),活率为(91.22±0.83)%。培养7天后粘附肝细胞数为(5.36±0.69)×10~7/mL,15天后达(3.18±0.71)×10~8/mL,23天后为(2.62±0.52)×10~7/mL。于培养第15天肝细胞的白蛋白及尿素合成功能达峰值。结论:采用 IV 型胶原酶原位门腔循环灌注可分离获取大量、高活性的原代正常猪肝细胞,经微载体粘附悬浮培养后可达到高密度、高活性、长期离体培养的目的,可满足生物人工肝对生物材料的要求。展开更多
文摘目的:获得一个具有丰富来源的肝细胞生产技术。方法:取本地杂种小猪作为肝细胞供体,用胶原酶原位门腔循环灌注法分离获取肝细胞。置于 DMEM-猪门静脉血清体系中进行微载体粘附悬浮培养。观察细胞生长情况并动态检测培养上清中白蛋白及尿素浓度。结果:每只猪肝获取肝细胞数为(4.26±0.75)×10^(10),活率为(91.22±0.83)%。培养7天后粘附肝细胞数为(5.36±0.69)×10~7/mL,15天后达(3.18±0.71)×10~8/mL,23天后为(2.62±0.52)×10~7/mL。于培养第15天肝细胞的白蛋白及尿素合成功能达峰值。结论:采用 IV 型胶原酶原位门腔循环灌注可分离获取大量、高活性的原代正常猪肝细胞,经微载体粘附悬浮培养后可达到高密度、高活性、长期离体培养的目的,可满足生物人工肝对生物材料的要求。
