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带His-tag的乙肝病毒融合抗原在毕赤氏酵母中的表达 被引量：2
1
作者 胡翔华 刘南松 +2 位作者 吕红 袁汉英 李育阳 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期560-565,共6页
乙肝病毒融合抗原SpreS1(简称SS1抗原)较S抗原有更强的免疫原性,可望有更好的临床应用前景.为了便于表达产物的纯化,利用化学合成的寡聚核苷酸链和PCR扩增,在SS1基因的5’端和3’端分别融合了6His-EK和6His的编码序列,将其重组质粒pPIC3... 乙肝病毒融合抗原SpreS1(简称SS1抗原)较S抗原有更强的免疫原性,可望有更好的临床应用前景.为了便于表达产物的纯化,利用化学合成的寡聚核苷酸链和PCR扩增,在SS1基因的5’端和3’端分别融合了6His-EK和6His的编码序列,将其重组质粒pPIC3.5k-6His-EK-SS1、pPIC3.5k-SS1-6His转化毕赤氏酵母菌GS115,筛选鉴定得到的重组酵母工程菌进行诱导培养,然后采用镍离子柱(Ni-NTABasin)纯化表达产物,纯化的蛋白样品经ELISA效价测定、SDS-PAGE和WesternBlot分析,结果表明融合抗原基因6His-EK-SS1和SS1-6His在毕赤氏酵母中均能表达,纯化的产物仍有免疫原性,所用的纯化方法简便有效. 展开更多
关键词 乙肝重组抗原spres1 毕赤氏酵母菌 镍离子柱 融合抗原 表达产物 毕赤氏酵母 乙肝病毒 HIS-TAG SDS-PAGE Western
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