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人精浆中弱精子症相关蛋白质的“shotgun”鉴定 被引量：3
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作者 白洁 傅淑宏 +2 位作者 蔡力力 孙玲 丛玉隆 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期201-211,共11页
目的:利用"shotgun(鸟枪)"蛋白质组学策略鉴定精浆中弱精子症相关的蛋白质。方法:正常健康已生育和弱精子症男性各3例自愿捐献的精液标本,通过Percoll分离获取精浆,等量混合后在SDS-PAGE上进行分离,切胶取条带进行胶内酶解,... 目的:利用"shotgun(鸟枪)"蛋白质组学策略鉴定精浆中弱精子症相关的蛋白质。方法:正常健康已生育和弱精子症男性各3例自愿捐献的精液标本,通过Percoll分离获取精浆,等量混合后在SDS-PAGE上进行分离,切胶取条带进行胶内酶解,抽提肽段后利用"shotgun"蛋白组学策略鉴定蛋白质。然后,将两组鉴定到的唯一肽段数≥2和唯一肽段数=1但肽段总数≥4的蛋白质对比分析。结果:正常生育男性和弱精子症男性精浆中共得到172种差异蛋白质,全部是有和无的关系。其中89种蛋白质存在于弱精子症患者,而正常生育者没有鉴定到;83种蛋白质存在于正常可生育者,而弱精子症患者没有鉴定到。这些差异蛋白质集中在信号转导和酶催化活性类。结论:通过分析差异蛋白质的功能,有10种蛋白质尤其重要,可能与弱精子症相关,这10种蛋白质为:膜联蛋白VI同工型2、白介素6受体β亚单位同工型1前体、相对分子质量为400000的蛋白质、胞质动力蛋白重链、α-辅肌动蛋白4、受体型酪氨酸蛋白磷酸酶η前体、维生素D结合蛋白前体、蛋白S100-A11、蛋白S100-A9和膜联蛋白A4。 展开更多
关键词 生育男性 弱精子症 精浆 差异蛋白质 SHOTGUN
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利用shotgun蛋白组学策略鉴定健康生育男性精浆蛋白质 被引量：3
2
作者 白洁 傅淑宏 +2 位作者 蔡力力 孙玲 丛玉隆 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期297-309,共13页
目的:鉴定正常生育男性的精浆蛋白质。方法:3例正常健康已生育的自愿者精液标本通过Percoll分离获取精浆,等量混合后在SDS-PAGE上进行分离,切胶取条带进行胶内酶解,抽提肽段后利用shotgun蛋白组学策略鉴定蛋白质。结果:正常生育男性精... 目的:鉴定正常生育男性的精浆蛋白质。方法:3例正常健康已生育的自愿者精液标本通过Percoll分离获取精浆,等量混合后在SDS-PAGE上进行分离,切胶取条带进行胶内酶解,抽提肽段后利用shotgun蛋白组学策略鉴定蛋白质。结果:正常生育男性精浆鉴定出331种蛋白质,相对分子质量范围8000～572068,等电点范围4.36～11.05;这些蛋白质按功能和生物进程归类,大致有51个(15.4%)运输蛋白质,11个(3.32%)细胞运动蛋白,63个(19.03%)信号转导蛋白质,147个(44.4%)蛋白酶及38个(11.5%)酶调节蛋白质,21个(6.3%)细胞凋亡蛋白,12个(3.62%)结构和支撑蛋白质,59个(17.8%)分子功能未知蛋白质。结论:shotgun蛋白组学策略是鉴定蛋白质的一个较好的方法。膜联蛋白及相关蛋白、Ras相关蛋白Rab是鉴定到的信号转导蛋白中的主要成员,因此推测钙离子和G蛋白信号通路是精子胞外信号传递到胞内的最重要途径,但是这些蛋白间的相互作用还不清楚。另外,精浆中鉴定到了大量的酶类,可能与维持精子活力和代谢有密切关系。 展开更多
关键词 生育男性 精浆 蛋白质组学 鉴定
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