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Atoh1过表达水平对异位耳蜗毛细胞样细胞的prestin表达及纤毛形态的影响
1
作者 郑宇 马锐 +1 位作者 迟放鲁 赵萌 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期197-204,共8页
目的探讨Atoh1过表达水平对体外培养的耳蜗小上皮嵴区域毛细胞样细胞数量、prestin表达情况及其表面纤毛形态的影响。方法取出生后第1天的大鼠耳蜗中圈进行体外培养,之后采用不同浓度的带有Atoh1基因的腺病毒(含报告基因EGFP)进行转染,... 目的探讨Atoh1过表达水平对体外培养的耳蜗小上皮嵴区域毛细胞样细胞数量、prestin表达情况及其表面纤毛形态的影响。方法取出生后第1天的大鼠耳蜗中圈进行体外培养,之后采用不同浓度的带有Atoh1基因的腺病毒(含报告基因EGFP)进行转染,检测腺病毒转染后不同时间点体外培养组织的Atoh1 mRNA相对表达量,同时观察小上皮嵴区域绿色荧光蛋白信号强度、毛细胞样细胞数量、毛细胞样细胞的prestin表达情况及其表面纤毛形态。结果带有Atoh1基因的腺病毒转染浓度越高,Atoh1的mRNA表达水平越高,小上皮嵴区域绿色荧光蛋白信号越强,同时该区域生成的毛细胞样细胞数量越多,表达prestin的毛细胞样细胞数量也越多(P<0.05),并且这些细胞表面静纤毛由低到高排列,形态更为规则。结论Atoh1过表达水平与诱导生成的能够表达prestin的异位耳蜗毛细胞样细胞数量正相关,并且Atoh1过表达水平越高,这些细胞的表面纤毛形态越规则。 展开更多
关键词 Atoh1 小上皮嵴 PRESTIN 纤毛 毛细胞样细胞
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神经干细胞与乳鼠基底膜共培养后分化为毛细胞样细胞的研究 被引量：3
2
作者 陈请国 付勇 +4 位作者 王显红 吴小慧 谢静 李哲文 龚树生 《中华耳科学杂志》 CSCD 2008年第2期216-220,共5页
目的探讨体外培养和鉴定胚胎大鼠神经干细胞及诱导其分化为毛细胞样细胞。方法从SD系胚鼠大脑分离神经干细胞,在无血清培养基中培养。取乳鼠基底膜与神经干细胞一起培养,14～21天后通过免疫荧光和免疫组化法检测毛细胞标志物myosin VIIa... 目的探讨体外培养和鉴定胚胎大鼠神经干细胞及诱导其分化为毛细胞样细胞。方法从SD系胚鼠大脑分离神经干细胞,在无血清培养基中培养。取乳鼠基底膜与神经干细胞一起培养,14～21天后通过免疫荧光和免疫组化法检测毛细胞标志物myosin VIIa和calretinin。结果培养的神经干细胞胞体透亮,折光性好,Nestin鉴定阳性。诱导分化后的细胞免疫荧光和免疫组化示myosin VIIa和calretinin阳性。结论无血清条件下能培养出活性很好的神经干细胞,乳鼠基底膜能引导其朝毛细胞方向分化。 展开更多
关键词 神经干细胞 基底膜 分化 毛细胞样细胞.
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体外诱导人脐带间充质干细胞向内耳毛细胞样细胞分化的研究 被引量：1
3
作者 张婷 叶放蕾 +6 位作者 关方霞 马珊珊 朱晓丹 赵堃 王乐 李红敏 郝少娟 《听力学及言语疾病杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期280-284,共5页
目的探讨并建立一种体外定向诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)向内耳毛细胞样细胞分化的方法。方法采用组织贴壁法培养获得hUC-MSCs,流式细胞仪鉴定其表面标记物;神经干细胞诱导阶段分为... 目的探讨并建立一种体外定向诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)向内耳毛细胞样细胞分化的方法。方法采用组织贴壁法培养获得hUC-MSCs,流式细胞仪鉴定其表面标记物;神经干细胞诱导阶段分为对照组(DFNB基础诱导培养基)、实验1组(DFNB基础诱导培养基+20ng/ml EGF+20ng/ml bFGF)、实验2组(DFNB基础诱导培养基+20ng/ml EGF+20ng/ml bFGF+琼脂糖包被),培养3~5天后采用免疫荧光法检测各组标记蛋白Nestin的表达;内耳毛细胞样细胞诱导分化阶段,分为对照组(DFNB基础诱导培养基+明胶包被)、诱导组[DFNB基础诱导培养基+20ng/ml EGF+1μM全反式维甲酸/全反式维生素A酸(all trans retinoic aid,ATRA)],培养4周后采用qRT-PCR和免疫荧光法检测各组毛细胞标记物Math1、MyosinⅦa、Brn3c的表达。结果在神经干细胞诱导阶段,对照组、实验1组均无神经球结构,实验2组中hUC-MSCs分化3d后细胞有明显神经球样结构,且Nestin阳性细胞数更高(P<0.05);而向内耳毛细胞样诱导分化4周后,诱导组毛细胞标记物Math1、MyosinⅦa、Brn3c的mRNA和阳性细胞数的表达水平明显升高(P<0.05)。结论体外诱导人脐带间充质干细胞先向神经干细胞方向分化再向内耳毛细胞分化方向诱导,可有效提高毛细胞标记物MyosinⅦa、Brn3c、Math1的表达水平,促进hUC-MSCs向类毛细胞样细胞分化,可能为将来感音神经性聋的内耳移植治疗提供更为适合的种子细胞。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 神经干细胞 内耳毛细胞样细胞 神经分化
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SD大鼠损伤Corti器中毛细胞样细胞的演变
4
作者 李厚勇 吴玥雯 +2 位作者 李华伟 沈云珍 王正敏 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2002年第4期253-254,I002,共3页
目的　研究氨基糖甙类抗生素引起哺乳类动物Corti器损伤及损伤后的修复情况。方法　用新霉素皮下注射致新生SD大鼠Corti器损伤 ,然后用扫描电镜观察停药后不同时期的Corti器毛细胞的损伤及修复表现。结果　在外毛细胞损伤区有细胞表面... 目的　研究氨基糖甙类抗生素引起哺乳类动物Corti器损伤及损伤后的修复情况。方法　用新霉素皮下注射致新生SD大鼠Corti器损伤 ,然后用扫描电镜观察停药后不同时期的Corti器毛细胞的损伤及修复表现。结果　在外毛细胞损伤区有细胞表面长有微绒毛簇的毛细胞样细胞出现 ,且其在损伤Croti器中有发生 -发展 -退化的变化过程。 展开更多
关键词 毛细胞 毛细胞样细胞 氨基糖甙类抗生素 耳毒性 新霉素 感音神经性聋 CORTI器
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