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人RNF6基因原核表达载体的构建及其重组蛋白的表达
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作者 刘彤 李洋 +1 位作者 李丹妮 李丰 《解剖科学进展》 CAS 2011年第5期461-463,467,共4页
目的构建人hRNF6基因的原核表达载体并诱导和鉴定其融合蛋白表达。方法提取前列腺癌细胞CWR22Rv1的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增hRNF6全长编码基因,并将其克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,在E.coli BL21中诱导GST-hRNF6融合蛋白表达,并... 目的构建人hRNF6基因的原核表达载体并诱导和鉴定其融合蛋白表达。方法提取前列腺癌细胞CWR22Rv1的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增hRNF6全长编码基因,并将其克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,在E.coli BL21中诱导GST-hRNF6融合蛋白表达,并经免疫印迹鉴定结果。结果 hRNF6编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,双酶切及测序鉴定正确,并在E.coli BL21中获得了诱导表达,蛋白的分子量为104KD,免疫印迹检测到了融合蛋白表达。结论成功构建基因原核表达载体,诱导表达出GST-RNF6融合蛋白。 展开更多
关键词 人hrnf6基因 原核表达 融合蛋白 E.COLI BL21
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