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OTX2基因对hFOB1.19成骨细胞增殖和分化的影响
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作者 王晶 田玉楼 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第24期3792-3797,共6页
背景:研究成骨细胞的表达及分化有助于阐明骨性反牙合畸形下颌骨发育过度的分子机制。目的:应用RNA干扰技术下调成骨细胞系hFOB1.19中OTX2基因的表达,进一步研究OTX2基因对成骨细胞增殖及分化的影响。方法:实验分为6组:特异性OTX2-siRNA... 背景:研究成骨细胞的表达及分化有助于阐明骨性反牙合畸形下颌骨发育过度的分子机制。目的:应用RNA干扰技术下调成骨细胞系hFOB1.19中OTX2基因的表达,进一步研究OTX2基因对成骨细胞增殖及分化的影响。方法:实验分为6组:特异性OTX2-siRNA1、OTX2-siRNA2、OTX2-siRNA3组,GAPDH-siRNA组,阴性对照组和空白对照组。设计3个靶序列的小干扰RNA(iRNA),转染人成骨细胞hFOB 1.19。RT-PCR检测转染后成骨细胞中OTX2 mRNA水平的变化;Western Blot检测蛋白质表达水平;MTT法评估OTX2-si RNA对成骨细胞增殖的抑制作用;化学比色法检测细胞碱性磷酸酶活性。结果与结论:(1)转染后,出现OTX2 mRNA水平下调,蛋白表达水平下调;(2)倒置显微镜下观察漂浮细胞OTX2-si RNA组明显多于各对照组,细胞增殖抑制率明显高于各对照组,OTX2-si RNA组碱性磷酸酶活性明显降低;(3)结果提示,化学合成的特异性OTX2-siRNA转染人成骨细胞系hFOB1.19,能有效下调OTX2mRNA水平;OTX2基因表达下调能够抑制hFOB1.19成骨细胞增殖;OTX2基因表达下调可降低h FOB1.19成骨细胞碱性磷酸酶活性,抑制其分化。 展开更多
关键词 hfob1.19成骨细胞 OTX2基因 小干扰RNA RNA干扰 基因沉默 错(牙合)畸形
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