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表没食子儿茶素没食子酸酯衍生物及过硫酸氢钾复合物粉体外抑制Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒的研究
1
作者 徐伟 闻金萱 +2 位作者 李鹏飞 吕利群 王浩 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1432-1446,共15页
【目的】为了将表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG)的2种衍生物和过硫酸氢钾复合物粉(compound potassium peroxymonosulfate powder, KMPS)运用于体外细胞实验中,以评估这3种药物对I型草鱼呼肠孤病毒(grass car... 【目的】为了将表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG)的2种衍生物和过硫酸氢钾复合物粉(compound potassium peroxymonosulfate powder, KMPS)运用于体外细胞实验中,以评估这3种药物对I型草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus, GCRV)的抑制和杀灭效果。【方法】利用MUSE法和CCK-8法评估表没食子儿茶素没食子酸酯棕榈酸酯(epigallocatechin gallate palmitate,EGCG-P)、乙酰化表没食子儿茶素没食子酸酯(peracetylated epigallocatechin gallate, Ac EGCG)和过硫酸氢钾复合物粉3种药物对细胞的安全浓度,利用体外细胞感染病毒模型,使用不同浓度测试物处理病毒或细胞后感染病毒,通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, q RT-PCR)法分析不同测试物对病毒的抑制和杀灭效果。使用不同浓度测试物处理细胞后,利用q RT-PCR法检测宿主免疫相关基因变化情况。【结果】EGCG-P和Ac EGCG对GCRV-JX01感染细胞的抑制作用呈剂量依赖性,且EGCG-P的抑制效果优于Ac EGCG,EGCG-P浓度为10μg/m L和40μg/m L时病毒量相对于对照组上清中病毒的滴度分别降低了102 copies/μL和103 copies/μL,而Ac EGCG浓度为60μg/m L和120μg/m L时才能达到相同抑制效果。杀灭实验结果表明,EGCG-P、Ac EGCG和KMPS对GCRV-I毒株均有杀灭效果,最低有效杀灭剂量KMPS (5μg/m L)<EGCG-P (120μg/m L)<Ac EGCG (180μg/m L)。草鱼白细胞介素-1β (interleukin-1β, IL-1β)、白细胞介素-8 (interleukin-8, IL-8)、肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factorα,TNFα)和髓样分化因子(medullary differentiation factor,My D88)相对于对照组在测试物中均有不同程度上调,其中EGCG-P (50μg/m L)和Ac EGCG (10μg/m L)处理组分别在8 h和24 h上调较为显著。【结论】EGCG-P、Ac EGCG和KMPS对GCRV-I均有良好的抑制效果和杀灭效果,其中EGCG-P和KMPS能够在40μg/m L较低浓度下对GCRV发挥显著性的抑制和杀灭效果,且在24h后 展开更多
关键词 草鱼出血病 草鱼呼肠孤病毒 表没食子儿茶素没食子酸酯棕榈酸酯 乙酰化表没食子儿茶素没食子酸酯 过硫酸氢钾复合物粉
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肝素及硫酸软骨素抑制Ⅰ型与Ⅲ型草鱼呼肠孤病毒的体外增殖
2
作者 孙皓 万偲佳 +1 位作者 王浩 吕利群 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期612-621,共10页
草鱼(Ctenopharyngodon idellus)是我国一类重要的经济鱼类,约占淡水养殖产量的20%,但每年由于病害原因造成的减产在30%以上。其中草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)危害最大,被中国农业农村部列为二类动物疫病,开发具有临床价... 草鱼(Ctenopharyngodon idellus)是我国一类重要的经济鱼类,约占淡水养殖产量的20%,但每年由于病害原因造成的减产在30%以上。其中草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)危害最大,被中国农业农村部列为二类动物疫病,开发具有临床价值的环境友好型药物或疫苗对草鱼出血病的防控具有重要意义。近年来,有大量研究表明肝素分子能抑制多种病毒的感染。为了揭示肝素分子及其类似物是否也可以阻遏GCRV感染,本研究利用Ⅰ、Ⅲ型GCRV分别感染草鱼肾细胞CIK,通过real time RT-PCR及Western Blot技术分别揭示GCRV感染后细胞上清中的子代病毒扩增效率及细胞内病毒蛋白合成水平,评价了肝素及其类似物硫酸软骨素对GCRV感染的抑制效果。结果表明,肝素分子在100μg/mL以上浓度时即对GCRV有抑制效果,10mg/mL以上用量时,病毒蛋白合成效率及上清子代病毒扩增效率均显著降低;其类似物硫酸软骨素相比肝素抑制效果有所降低,但在20mg/mL以上用量时,病毒蛋白合成效率及上清子代病毒扩增效率也均有显著降低。研究结果表明肝素及其类似物对不同基因型的草鱼呼肠孤病毒的感染具有广谱抑制效应。本研究为开发肝素类似物作为拮抗草鱼出血病的环境友好型药物奠定了初步基础。 展开更多
关键词 草鱼出血病 草鱼呼肠孤病毒(GCRV) 肝素 肝素类似物 抑制
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