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利什曼原虫抗原对草原兔尾鼠感染婴儿利什曼原虫的免疫保护作用 被引量:1
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作者 柴君杰 Kwang Poo Chang +7 位作者 左新平 严雷 侯岩岩 张松 茹孜古丽新疆地方病防治研究所 卫生部包虫病防治培训基地 蒋卫 张兰英 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期237-240,共4页
目的: 测定利什曼原虫主要表面分子抗原对内脏利什曼病的免疫保护作用。方法: 用重组利什曼原虫表面糖蛋白r G P63 和脂磷酸聚糖( L P G) 为抗原, 以短棒状杆菌菌苗( C P) 为佐剂免疫草原兔尾鼠后, 用婴儿利什曼原虫... 目的: 测定利什曼原虫主要表面分子抗原对内脏利什曼病的免疫保护作用。方法: 用重组利什曼原虫表面糖蛋白r G P63 和脂磷酸聚糖( L P G) 为抗原, 以短棒状杆菌菌苗( C P) 为佐剂免疫草原兔尾鼠后, 用婴儿利什曼原虫强毒株攻击, 观察免疫保护效果。结果: r G P63 加 L P G 加 C P 抗原组合免疫后用2 ×107 前鞭毛体攻击, 免疫动物的肝印片上 L D 数量明显降低, 减虫率为898 % 。 L P G 加 C P 免疫组减虫率为606 % 。r G P63 包涵体加 C P 免疫组减虫率为424 % , 而纯化r G P63 加 C P 免疫组未显示保护作用。以r G P63 加 L P G 加 C P 免疫后用1 ×106 , 5 ×106 和1 ×107 前鞭毛体攻击时, 感染率亦有明显降低。结论: 利什曼原虫主要表面分子抗原 G P63和 L P G 在以 C P 为佐剂的条件下, 对草原兔尾鼠婴儿利什曼原虫有明显的免疫保护效果。 展开更多
关键词 gp63 LPG 内脏利什曼病 婴儿利什曼原虫
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Study of Functionalized Gold Nanoparticles with Anti-gp63 IgG Antibody for the Detection of Glycoprotein gp63 in Membrane Surface of <i>Leishmania</i>Genus Parasites
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作者 Pedro Rodríguez Humberto Rojas +7 位作者 Miguel Medina Jazzmin Arrivillaga Yosue Francisco Fracehuli Dager Vincent Piscitelli Manuel Caetano Alberto Fernández Jimmy Castillo 《American Journal of Analytical Chemistry》 2013年第7期100-108,共9页
In this work we present the preparation and functionalization of gold nanoparticles (AuNPs) for the detection of presence of gp63 glycoprotein in the surface of Leishmania genus parasites. AuNPs were prepared by induc... In this work we present the preparation and functionalization of gold nanoparticles (AuNPs) for the detection of presence of gp63 glycoprotein in the surface of Leishmania genus parasites. AuNPs were prepared by induced laser ablation in a clean and biologically suitable media. The nanoparticles were functionalized with anti-gp63 lgG antibody in order to study the interaction with the glycoprotein component gp63 (63 kDa) present on the membrane surface of Leishmania genus parasites. The functionalized AuNPs showed potential as a spectrometric indicator of the parasite existence, both by the detection of the presence of the gp63 in solution and through the specific interaction with the parasites in vitro. The specificity of the study opens a new line of research on the use of modified nanoparticles in the development of a fast and easy assay for Leishmaniosis diagnostics. 展开更多
关键词 LEISHMANIA Nanoparticles SURFACE PLASMON Resonance gp63 Protein
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Immunogenicity and protective efficacy of DNA vaccine against visceral leishmaniasis in BALB/c mice
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作者 Sukhbir Kaur Tejinder Kaur Jyoti Joshi 《The Journal of Biomedical Research》 CAS CSCD 2016年第4期304-313,共10页
The current study was designed to examine the protective efficacy of DNA vaccines based on gp63 and Hsp70 against murine visceral leishmaniasis. Inbred BALB/c mice were immunized subcutaneously twice at an interval of... The current study was designed to examine the protective efficacy of DNA vaccines based on gp63 and Hsp70 against murine visceral leishmaniasis. Inbred BALB/c mice were immunized subcutaneously twice at an interval of three weeks with pcDNA3.1 (+) encoding T cell epitopes of gp63 and Hsp70 individually and in combination. Animals were challenged intracardially with 107 promastigotes ofLeishmania donovani 10 days post immunization and sacrificed 1,2 and 3 months post challenge. The immunized animals revealed a significant reduction (P 〈 0.05) in splenic and hepatic parasite burden as compared to the infected controls. Maximum reduction in parasite load (P 〈 0.05) was observed in animals treated with a combination ofpcDNA/gp63 and pcDNA/Hsp70. These animals also showed heightened DTH response, increased IgG2a, elevated Thl cytokines (IFN-γ and IL-2) and reduced IgG 1 and IL-10 levels. Thus, mice immunized with the cocktail vaccine exhibited significantly greater protection in comparison to those immunized with individual antigens. 展开更多
关键词 visceral leishmaniasis DNA vaccine T-cell epitopes gp63 HSP70
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重组利什曼原虫表面糖蛋白GP63的表达生产及其免疫学鉴定
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作者 严蕾 左新平 +3 位作者 侯岩岩 茹孜古丽 张松 柴君杰 《地方病通报》 2000年第2期13-14,共2页
本文报道应用从国外引进的由硕大利什曼原虫 DNA克隆的原虫细胞表面糖蛋白 GP6 3基因与 p Bluescript M13质粒构建的重组质粒 p AS2 6转化大肠菌 XL1- Blue进行生产性表达及免疫学鉴定的结果。每 2 5 0 m L L B培养物可获取融合蛋白包涵... 本文报道应用从国外引进的由硕大利什曼原虫 DNA克隆的原虫细胞表面糖蛋白 GP6 3基因与 p Bluescript M13质粒构建的重组质粒 p AS2 6转化大肠菌 XL1- Blue进行生产性表达及免疫学鉴定的结果。每 2 5 0 m L L B培养物可获取融合蛋白包涵体 5 3mg。表达产物在降解条件下与β半乳糖苷酶分离后的分子量为 5 5 k D。重组 GP6 3及其免疫家兔血清与细菌来源的β半乳糖苷酶有低滴度交叉。与婴儿利什曼原虫 90 1株前鞭毛体及其免疫血清和黑热病人血清 EL ISA反应滴度很高。表明重组 GP6 展开更多
关键词 重组利什曼原虫 表面糖蛋白 gp63 表达
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几种利什曼抗原对草原兔尾鼠婴儿利什曼原虫实验感染的保护作用 被引量:1
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作者 柴君杰 左新平 《地方病通报》 1999年第3期8-16,共9页
本项研究旨在确定几种利什曼表现分子抗原对婴儿利什曼原虫实验感染的免疫保护作用。用重组的利什曼原虫细胞表现糖蛋白GP63和脂磷酸聚糖(LPG)以短小棒状杆菌菌苗为佐剂免疫草原兔尾鼠。用婴儿利什曼原母亲朱前鞭毛体攻击感染... 本项研究旨在确定几种利什曼表现分子抗原对婴儿利什曼原虫实验感染的免疫保护作用。用重组的利什曼原虫细胞表现糖蛋白GP63和脂磷酸聚糖(LPG)以短小棒状杆菌菌苗为佐剂免疫草原兔尾鼠。用婴儿利什曼原母亲朱前鞭毛体攻击感染,测定其免疫保护作用。经rGP63+LPG+CP免疫的动物,在用2×10^2前鞭毛体攻击时,其肝脏的利什曼原虫数比对照动物降低89.79%。LPG+CP免疫组降低60.6%。 展开更多
关键词 gp63 LPG 短小棒状杆菌 内脏利什曼病 免疫保护
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抗利什曼病疫苗
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作者 Modabber F 王捷 《国外医学(寄生虫病分册)》 1997年第1期14-17,共4页
本文简要回顾了抗利什曼病疫苗的发展过程,讨论了各类疫苗的优缺点。
关键词 利什曼病 疫苗 gp63 LeIF
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伪狂犬病病毒Ea株TK^-/gE^-/gp63^-突变株的构建及其生物学特性研究 被引量:16
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作者 刘正飞 陈焕春 +2 位作者 何启盖 周复春 方六荣 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期370-374,共5页
Using pseudorabies virus Ea strain as material,we inserted LacZ gene expression cassette into gE gene.After blue plaque and plaque purification,a recombinant virus PRVEa TK+-/gE+-/LacZ++ generated.Utilizing EcoR I sit... Using pseudorabies virus Ea strain as material,we inserted LacZ gene expression cassette into gE gene.After blue plaque and plaque purification,a recombinant virus PRVEa TK+-/gE+-/LacZ++ generated.Utilizing EcoR I site in LacZ gene, digested PRVEa TK+-/gE+-/LacZ++ genome DNA was cotransfected into PK-15 cells with plasmid pFBBS,then PRVEa TK+-/gE+-/gp63+- generated after plaque purification.Four pairs of primers amplification demonstrated the virus was pure TK+-/gE+-/gp63+- mutant virus.PCR product sequence indicates there were 205bp deletion in TK gene;1247bp deletion in gE,gp63 and intergenic region of PRVEa TK+-/gE+-/gp63+- mutant virus genome DNA.Inoculation to Balb/C mice with PRVEa TK+-/gE+-/gp63+- indicates the virulence is reduced greatly. 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒EA株 TK^-/gE^-/gp63^-突变株 生物学特性
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伪狂犬病病毒Fa株gp63(gI)基因核苷酸序列测定及分析 被引量:3
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作者 周煜 郭万柱 +1 位作者 汪铭书 颜其贵 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期317-320,共4页
对我国最早分离的伪狂犬病病毒 ( pseudorabies virus,PRV) Fa株糖蛋白 gp6 3( g I)基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列作了测定与分析。完整的 gp6 3( g I)结构基因从起始密码子 ATG到终止密码子 TGA共有1 0 50个核苷酸残基 ,编码由 34 ... 对我国最早分离的伪狂犬病病毒 ( pseudorabies virus,PRV) Fa株糖蛋白 gp6 3( g I)基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列作了测定与分析。完整的 gp6 3( g I)结构基因从起始密码子 ATG到终止密码子 TGA共有1 0 50个核苷酸残基 ,编码由 34 9个氨基酸残基构成的多肽链。 4种核苷酸残基的构成比分别为 :G35.9% ,A1 1 .33% ,T1 1 .81 % ,C4 0 .95% ,G+C含量达 76 .85%。PRV Fa株 gp6 3基因核苷酸序列与 Nice株的相比 ,两者同源性达 98.1 3% ,仅存在 3个核苷酸残基的缺失变异 ;氨基酸推导序列分析表明 ,糖蛋白 gp6 3具有典型膜蛋白特征 ,与 Nice株相比 ,同源性为 97.4 2 %。 gp6 3基因起始密码子由 3个连续的 ATG组成 。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 Fa株 gp63基因 核苷酸序列 重组质粒
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婴儿利什曼原虫Pepck和Gp63优势表位的真核与原核重组载体的构建与表达 被引量:1
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作者 张建辉 王玉洁 +4 位作者 何金蕾 李焕卿 陈劲宇 陈达丽 陈建平 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期194-201,共8页
目的选取婴儿利什曼原虫的Pepck和Gp63的优势表位基因,构建Pepck-Gp63二联优势表位的原核与真核重组表达载体并表达蛋白。方法用计算机分析预测磷酸烯醇丙酮酸羧基酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPCK)的二级结构及HLA表位,筛选... 目的选取婴儿利什曼原虫的Pepck和Gp63的优势表位基因,构建Pepck-Gp63二联优势表位的原核与真核重组表达载体并表达蛋白。方法用计算机分析预测磷酸烯醇丙酮酸羧基酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPCK)的二级结构及HLA表位,筛选出优势表位。根据本实验室之前对表面蛋白酶63(glycoprotein of 63×10^(3),GP63)用相同的方法分析而筛选的表位结果,把Pepck和Gp63的优势表位基因通过重叠PCR和酶切连接反应构建出重组原核表达质粒pET32a-Pepck-Gp63,并诱导其在大肠杆菌中表达;构建出重组真核表达质粒pVAX1-Pepck-Gp63,用脂质体转染法把真核质粒转染到NIH3T3细胞中表达。结果Pepck存在多个优势表位;测序结果表明二联优势表位基因Pepck-Gp63连接成功;PEPCK-GP63蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达并在SDS-PAGE电泳-考马斯亮蓝染色的结果中呈现相对分子质量为74×10^(3)大小的条带;细胞免疫荧光中被pVAX1-Pepck-Gp63转染的NIH3T3细胞呈阳性。结论成功构建重组原核表达质粒pET32a-Pepck-Gp63和重组真核表达质粒pVAX1-Pepck-Gp63,并分别在大肠杆菌和NIH3T3细胞中验证重组质粒能表达相应目的蛋白,为后续的免疫策略研究提供初步实验基础。 展开更多
关键词 婴儿利什曼原虫 表位疫苗 Pepck基因 gp63基因
原文传递
恰氏利什曼原虫毒性株及减毒株前鞭毛体GP63 mRNA稳定性的调控
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作者 言慧 《国外医学(寄生虫病分册)》 2002年第4期187-188,共2页
通常,利什曼原虫属表面都表达一种分子量为63 kDa的糖蛋白。该蛋白与原虫毒力及前鞭毛体感染宿主的起始阶段有关。恰氏利什曼原虫(L.chagasi,L.c.)至少有18种编码GP63的基因,称为主要蛋白酶(msp)基因。根据基因3′端非翻译序列及表达水... 通常,利什曼原虫属表面都表达一种分子量为63 kDa的糖蛋白。该蛋白与原虫毒力及前鞭毛体感染宿主的起始阶段有关。恰氏利什曼原虫(L.chagasi,L.c.)至少有18种编码GP63的基因,称为主要蛋白酶(msp)基因。根据基因3′端非翻译序列及表达水平的差异性可将之分为 3类:mspL、mspS、mspC。作者研究了msp mRNA稳定性的调控机制。 展开更多
关键词 恰氏利什曼原虫 毒性株 减毒株 前鞭毛体 gp63mRNA 稳定性
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应用肝癌相关抗原GP63Ag-ELISA对肝癌诊断的意义
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作者 邢惠清 田玉旺 +2 位作者 张胜兰 丛云辉 林星石 《临床肝胆病杂志》 CAS 1992年第2期75-76,共2页
本文应用肝癌单克隆抗体HAB18相应抗原GP63Ag—ELISA法,对74例经组织学明确诊断的肝病患者血清进行研究,证实此法对肝癌的诊断有一定意义。材料与方法一、标本来源:血清标本选自74例病人均经外科手术和肝穿刺活检后,组织学明确诊断。其... 本文应用肝癌单克隆抗体HAB18相应抗原GP63Ag—ELISA法,对74例经组织学明确诊断的肝病患者血清进行研究,证实此法对肝癌的诊断有一定意义。材料与方法一、标本来源:血清标本选自74例病人均经外科手术和肝穿刺活检后,组织学明确诊断。其中,原发性肝癌44例,肝硬化6例;慢性活动性肝炎5例; 展开更多
关键词 肝肿瘤 诊断 gp63Ag ELISA
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