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转雪花莲外源凝集素基因烟草对桃蚜的抑制作用 被引量:46
1
作者 周岩 田颖川 +1 位作者 吴标 莽克强 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期13-19,共7页
将编码雪花莲外源凝集素成熟蛋白的cDNAGNA12和其前体蛋白cDNAGNA34插入到二元载体pBin438的双倍增强子CaMV35S启动子或二元载体pBcop1的CoYMV启动子下游,分别构建成植物表达载体pBGn... 将编码雪花莲外源凝集素成熟蛋白的cDNAGNA12和其前体蛋白cDNAGNA34插入到二元载体pBin438的双倍增强子CaMV35S启动子或二元载体pBcop1的CoYMV启动子下游,分别构建成植物表达载体pBGna12、pBGna34、pBCGna12和pBCGna34。土壤农杆菌介导的转化再生植株的PCR和Southernblot分析表明,GNA基因已整合到烟草DNA中。Westernblot分析发现pBGna34和pBCGna34的转基因植株能有效地表达外源GNA,表达量约占可溶性总蛋白的008%~015%,并且前体蛋白基因编码的蛋白在植物体内进行了正确的加工;而pBGna12和pBCGna12的植株几乎检测不到外源GNA的表达。有效表达外源GNA的pBGna34和pBCGna34的转基因植株具有较强的抗蚜活性,平均能够抑制桃蚜(Myzuspersicae)45%~60%蚜口密度,有的高达90%以上。在转基因烟草中含双倍增强子的CaMV35S启动子与韧皮部特异表达的CoYMV启动子介导GNA基因表达具有相似的强度,但它们的抗蚜活性存在差异。 展开更多
关键词 雪花莲 凝集素 转基因烟草 蚜虫 烟草 抗虫性
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农杆菌介导将雪莲凝集素(GNA)基因转入籼稻单倍体微芽的初步研究 被引量:35
2
作者 杨长登 唐克轩 +4 位作者 吴连斌 李瑶 赵成章 刘光杰 沈大棱 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期129-133,共5页
以含有双元载体(携带GNA基因,npt-Ⅱ基因)的根癌农杆菌菌系LBA4404转化籼稻单倍体无性系微芽Hu18,经共培养后在含G418的保存培养基中连续筛选G418抗性芽,抗性芽经生根培养基中壮苗获得单倍体转化植株。PCR分析证明GNA基因已进入到... 以含有双元载体(携带GNA基因,npt-Ⅱ基因)的根癌农杆菌菌系LBA4404转化籼稻单倍体无性系微芽Hu18,经共培养后在含G418的保存培养基中连续筛选G418抗性芽,抗性芽经生根培养基中壮苗获得单倍体转化植株。PCR分析证明GNA基因已进入到Hu18细胞中,抗虫鉴定表明转基因植株具有白背飞虱抗性。并探明了G418对单倍体微芽的致死浓度和时间,共培养时间对G418抗性芽产生的影响。 展开更多
关键词 单倍体 无性系 根癌农杆菌 雪莲凝集素基因 籼稻
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雪花莲凝集素基因转化菊花及转基因植株的抗蚜性研究 被引量:31
3
作者 王关林 刘彦泓 +3 位作者 郭绍华 王宇 纪彦 方宏筠 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1434-1438,共5页
针对菊花存在的蚜虫虫害问题 ,采用农杆菌介导法将gna基因导入菊花叶片 ,共获得 93个转化克隆。研究了影响转化频率的主要因素 ,得出在使用 pH5 6的YEB培养基 ,菌液浓度OD60 0 =0 4 ,4 5日苗龄中部叶片预培养 1d ,共培养 4d ,共培养... 针对菊花存在的蚜虫虫害问题 ,采用农杆菌介导法将gna基因导入菊花叶片 ,共获得 93个转化克隆。研究了影响转化频率的主要因素 ,得出在使用 pH5 6的YEB培养基 ,菌液浓度OD60 0 =0 4 ,4 5日苗龄中部叶片预培养 1d ,共培养 4d ,共培养的培养基中加入 0 5mg/LGA3 的条件下可使转化频率提高到 11 2 1%。PCR、实时荧光PCR检测结果表明 ,外源基因已整合到植物细胞基因组中。转化植株幼苗饲虫实验表明 ,不同转化克隆的抗蚜性差异较大 ,蚜口密度抑制率从 10 %~ 84 %不等 ,平均蚜口密度抑制率为 39.4 %。 展开更多
关键词 菊花 雪花莲凝集素基因 根癌农杆菌 转化 蚜虫
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Aphid-resistant Transgenic Tobacco Plants Expressing Modified gna Gene 被引量:13
4
作者 袁正强 赵存友 +1 位作者 周岩 田颖川 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第6期592-597,共6页
A gene sequence coding for the precursor of Galanthus nivalis agglutinin (GNA) was modified by site-directed mutagenesis to change very low usage bias codons to higher usage bias ones for improvement of the gene expre... A gene sequence coding for the precursor of Galanthus nivalis agglutinin (GNA) was modified by site-directed mutagenesis to change very low usage bias codons to higher usage bias ones for improvement of the gene expression in transgenic tobacco (Nicotiana tabacum L.) plants. Results from Western blot analysis of some of the transgenic tobacco plants showed that the expression level of GNA in plants transformed with the modified gene GNA34m reached 0.25% of total soluble proteins, while that of the GNA34 gene transgenic plants was 0.17%. Since the GNA expression level increased, the aphid resistance of GNA34m transgenic plants were also enhanced significantly as judged by a 71.0% aphid population inhibition in insect bioassay of GNA34m transformed plants and 63.7% for the plants transformed with the natural GNA34 gene. 展开更多
关键词 gna gene site-directed mutagenesis transgenic tobacco plants aphid-resistance
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转GNA基因小麦新株系的分子检测和抗蚜虫性鉴定 被引量:15
5
作者 徐琼芳 田芳 +8 位作者 陈孝 李连城 林志姗 莫英 徐惠君 刘燕 许为钢 杜丽璞 辛志勇 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期7-10,共4页
为了进行抗蚜虫转基因小麦的研究,将人工合成的雪花莲凝结素(Galanthusnivlisagglutinin,GNA)基因通过基因枪转入优质小麦品种郑州9405的幼胚愈伤组织,经过在选择培养基上多次筛选,从360块被轰击的愈伤组织中再生到1株Bialaphos(除草剂... 为了进行抗蚜虫转基因小麦的研究,将人工合成的雪花莲凝结素(Galanthusnivlisagglutinin,GNA)基因通过基因枪转入优质小麦品种郑州9405的幼胚愈伤组织,经过在选择培养基上多次筛选,从360块被轰击的愈伤组织中再生到1株Bialaphos(除草剂)抗性植株,命名为G郑州9405。通过连续2代对转化株系进行PCR、Southern检测和蚜虫抗性鉴定,证明GNA基因已经整合到了郑州9405基因组中。目前已经获得了纯合稳定的转基因株系,并在河南农业科学院小麦所进行了环境释放试验。 展开更多
关键词 小麦 gna基因 遗传转化 蚜虫抗性
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两种凝集素基因在转基因烟草中表达的研究 被引量:12
6
作者 刘召华 张振山 +3 位作者 郭洪年 贾燕涛 郑光宇 田颖川 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期758-763,共6页
构建了含尾穗苋凝集素基因(ACA)的cDNA序列和改造后的雪花莲凝集素基因(GNA)的植物表达载体pBACG。在此表达载体中,ACA和GNA基因的表达分别由35S启动子和CoYMV启动子控制。通过农杆菌介导,将ACA和GNA基因转化到烟草中,经卡那霉素筛选获... 构建了含尾穗苋凝集素基因(ACA)的cDNA序列和改造后的雪花莲凝集素基因(GNA)的植物表达载体pBACG。在此表达载体中,ACA和GNA基因的表达分别由35S启动子和CoYMV启动子控制。通过农杆菌介导,将ACA和GNA基因转化到烟草中,经卡那霉素筛选获得60株转化再生植株。对PCR检测呈阳性的50株植株进行接蚜虫实验,结果表明,其平均抑虫率达83.9%。Southernblotting分析表明,ACA和GNA基因都已整合到烟草基因组中。Westernblotting结果显示这两个基因在不同植株中都可表达其相应的蛋白质,但表达水平不同。部分Westernblotting分析呈阳性植株的抗蚜性与T0代相近,达85.3%,说明这两个基因的抗蚜功能可以稳定遗传。 展开更多
关键词 ACA基因 gna基因 转基因烟草 抗蚜性
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农杆菌介导GNA基因对水稻的遗传转化 被引量:5
7
作者 刘志学 何艺园 +4 位作者 曹清玉 王卉 徐亚南 马向前 唐克轩 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期277-281,共5页
在 pCAMBIA330 0质粒中插入带有RSs 1启动子的GNA基因 ,并利用农杆菌介导的遗传转化将其导入水稻的微不定芽受体 ,得到了再生植株 .PCR ,Southernblot和Westernblot的检测结果初步证明GNA基因已经整合到水稻的基因组中并得到了表达 .
关键词 农杆菌 gna基因 遗传转化 水稻 介导
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转基因水稻高世代农艺性状的表现 被引量:8
8
作者 李艳萍 邹美智 +3 位作者 孙海波 梁永书 王景余 牛景 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第1期15-21,共7页
以转SCK基因和bar基因粳稻恢复系超优1号和转GNA基因和hyg基因粳稻保持系早花二号自交高代(恢复系T5,T6,保持系T4,T5)材料为试材,进行抗性筛选鉴定和农艺性状考察。结果表明:转基因恢复系表现高抗除草剂,对二化螟呈不同程度抗性;保持系... 以转SCK基因和bar基因粳稻恢复系超优1号和转GNA基因和hyg基因粳稻保持系早花二号自交高代(恢复系T5,T6,保持系T4,T5)材料为试材,进行抗性筛选鉴定和农艺性状考察。结果表明:转基因恢复系表现高抗除草剂,对二化螟呈不同程度抗性;保持系表现高抗潮霉素,大部分株系低抗稻飞虱,个别高抗褐飞虱、白背飞虱,田间表现高抗条纹叶枯病;转基因不育系表现高抗潮霉素;外源基因导入粳稻恢复系和保持系并在高代稳定表达。转基因恢复系生育期、株高、穗长、穗颈节等性状有不同程度变异;保持系株高、穗型变异较大。转基因恢复系与转基因不育系配制的多元转基因杂交组合F1表现高抗除草剂和潮霉素,其他农艺性状表现与对照(非转基因组合)基本一致。对转基因水稻的安全释放进行了探讨。 展开更多
关键词 粳稻 转基因 SCK基因 BAR基因 gna基因 hyg基因 抗性 农艺性状
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GNA基因遗传转化甘蔗研究 被引量:9
9
作者 陈平华 林美娟 +1 位作者 薛志平 陈如凯 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第5期740-743,748,共5页
虫害常常给甘蔗生产造成重大损失。GNA对蚜虫、飞虱、叶蝉等刺吸式害虫和某些咀嚼式害虫如蛴螬等有极高的毒性。对引进的GNA基因进行鉴定,并利用基因枪将GNA基因转化甘蔗愈伤组织,经筛选、分化,获得了一批抗性再生植株,抽样检测,获得了4... 虫害常常给甘蔗生产造成重大损失。GNA对蚜虫、飞虱、叶蝉等刺吸式害虫和某些咀嚼式害虫如蛴螬等有极高的毒性。对引进的GNA基因进行鉴定,并利用基因枪将GNA基因转化甘蔗愈伤组织,经筛选、分化,获得了一批抗性再生植株,抽样检测,获得了4株PCR阳性植株,为培育优良抗虫甘蔗新品种创造了条件。 展开更多
关键词 gna 基因枪 甘蔗 转基因 抗虫基因 愈伤组织
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转抗蚜GNA基因苜蓿的研究 被引量:6
10
作者 卢广 张青文 田颖川 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期23-26,共4页
将雪花莲凝集素基因GNA插入双元载体pBI121中的GUS基因的上游,得到植物表达载体pLG66m。GNA与GUS基因构成融合基因,共用一个CaMV35S启动子。将该表达载体导入农杆菌LBA4404,得到LBA4404/pLG66m菌株。利用LBA4404/pLG66m菌株培养液直... 将雪花莲凝集素基因GNA插入双元载体pBI121中的GUS基因的上游,得到植物表达载体pLG66m。GNA与GUS基因构成融合基因,共用一个CaMV35S启动子。将该表达载体导入农杆菌LBA4404,得到LBA4404/pLG66m菌株。利用LBA4404/pLG66m菌株培养液直接浸泡萌动的苜蓿种子,组织学检测表明GUS在种苗上3 d的瞬时表达效率超过90%。待苜蓿长出第3片真叶后检测,GUS表达效率明显下降。GNA基因在种苗期间的短期表达也积累GNA毒蛋白在苜蓿体内的含量,为苜蓿在苗期抗蚜起到一定作用。 展开更多
关键词 苜蓿种子 gna基因 GUS基因 苗期 种苗 毒蛋白 菌株培养 组织学检测 体内 融合基因
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基因枪法介导GNA基因遗传转化甘蔗的研究 被引量:6
11
作者 长孙东亭 罗素兰 +2 位作者 陈如凯 林皎月 严建燕 《生物技术》 CAS CSCD 2006年第3期51-55,共5页
目的:将含有雪花莲外源凝集素(GNA)基因的植物表达载体用基因枪法分别导入一个果蔗和一个糖蔗品种中,以期获得转基因植株。方法:将GNA基因插入到植物表达载体上,构建出不同选择标记、不同启动子的表达载体,并用基因枪法将之导入甘蔗胚... 目的:将含有雪花莲外源凝集素(GNA)基因的植物表达载体用基因枪法分别导入一个果蔗和一个糖蔗品种中,以期获得转基因植株。方法:将GNA基因插入到植物表达载体上,构建出不同选择标记、不同启动子的表达载体,并用基因枪法将之导入甘蔗胚性愈伤组织,分别在G418、PPT和Hyg的选择压力下,筛选抗性植株,并进行分子杂交鉴定。结果:通过斑点杂交和PCR-Southern杂交证明GNA基因已整合到甘蔗基因组中。结论:用基因枪法成功获得了含有GNA基因的甘蔗转化株,为培育抗甘蔗绵蚜(Ceratovacuna lanigeraZehnther)的新品种提供了基础。 展开更多
关键词 甘蔗 基因枪转化 gna基因
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菊花转抗虫基因植株的PCR快速鉴定 被引量:1
12
作者 蒋细旺 包满珠 《湖北农业科学》 北大核心 2003年第2期72-74,共3页
对经过卡那霉素抗性筛选所得到的菊花转苏云金芽胞杆菌毒蛋白Bt基因和转雪花莲外源凝集素GNA基因所得的抗性植株 ,利用改良SDS法提取菊花DNA ,然后利用NPTII引物对 6个菊花品种的抗性植株所提DNA进行PCR扩增 ,发现了符合NPTII基因片段... 对经过卡那霉素抗性筛选所得到的菊花转苏云金芽胞杆菌毒蛋白Bt基因和转雪花莲外源凝集素GNA基因所得的抗性植株 ,利用改良SDS法提取菊花DNA ,然后利用NPTII引物对 6个菊花品种的抗性植株所提DNA进行PCR扩增 ,发现了符合NPTII基因片段大小的亮带 ,初步证实获得了转Bt基因和转GNA基因的菊花植株。 展开更多
关键词 菊花 BT基因 gna基因 PCR
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抗褐飞虱和抗除草剂转基因粳稻新品系的选育及其中间试验 被引量:4
13
作者 王玲 于恒秀 +5 位作者 黄世文 赵志鹏 龚志云 汤述翥 顾铭洪 刘巧泉 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期23-27,共5页
利用根癌农杆菌介导法,将位于同一双元载体pCUGNA-BAR上的GNA基因和Bar基因导入粳稻品种广陵香粳,获得了转基因品系。经PCR扩增检测和Southern杂交分析证明GNA基因已整合到转化植株的基因组中。在转化后代中选育了一个表现优异的转基因... 利用根癌农杆菌介导法,将位于同一双元载体pCUGNA-BAR上的GNA基因和Bar基因导入粳稻品种广陵香粳,获得了转基因品系。经PCR扩增检测和Southern杂交分析证明GNA基因已整合到转化植株的基因组中。在转化后代中选育了一个表现优异的转基因水稻新品系3015-1-1进行中间试验,田间农艺性状调查发现该品系3015-1-1基本保持了未转化对照优良的农艺特性。抗虫和抗除草剂试验表明,3015-1-1对褐飞虱的蜜露排泄量和繁殖率具有显著的抑制作用,对除草剂Basta有明显抗性。 展开更多
关键词 转基因水稻 gna基因 BAR基因 褐飞虱 除草剂
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GNA基因遗传转化甘蔗研究 被引量:3
14
作者 陈平华 林美娟 +1 位作者 薛志平 陈如凯 《甘蔗(福建)》 2004年第3期1-6,共6页
虫害常常给甘蔗生产造成重大损失。GNA对蚜虫、飞虱、叶蝉等刺吸式害虫和某些咀嚼式害虫如蛴螬等具有极高的毒性。本研究对引进的GNA基因进行鉴定,并利用基因枪将其转化甘蔗愈伤组织,经筛选、分化,获得了一批抗性再生植株,抽样检测,获得... 虫害常常给甘蔗生产造成重大损失。GNA对蚜虫、飞虱、叶蝉等刺吸式害虫和某些咀嚼式害虫如蛴螬等具有极高的毒性。本研究对引进的GNA基因进行鉴定,并利用基因枪将其转化甘蔗愈伤组织,经筛选、分化,获得了一批抗性再生植株,抽样检测,获得了4株PCR阳性植株,为培育优良抗虫甘蔗新品种创造了条件。 展开更多
关键词 gna基因 遗传转化 甘蔗 植物表达载体
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GNA基因表达载体的构建及遗传转化甘蔗 被引量:4
15
作者 刘晓娜 冯翠莲 张树珍 《热带作物学报》 CSCD 2010年第6期887-893,共7页
利用经人工改造的gna基因分别与Ubi、Rbcs启动子组合,构建抗虫植物表达载体pUNG和pRNG,通过农杆菌介导法导入甘蔗愈伤组织,经PPT筛选和PCR检测,获得Ubi-gna转基因植株124株,Rbcs-gna转基因植株35株。对部分转基因植株进行RT-PCR检测,初... 利用经人工改造的gna基因分别与Ubi、Rbcs启动子组合,构建抗虫植物表达载体pUNG和pRNG,通过农杆菌介导法导入甘蔗愈伤组织,经PPT筛选和PCR检测,获得Ubi-gna转基因植株124株,Rbcs-gna转基因植株35株。对部分转基因植株进行RT-PCR检测,初步证明外源基因已经整合到甘蔗基因组中,并得到有效表达;对RT-PCR阳性植株进行GNA(植物外源凝集素)活性测验,结果表明,甘蔗叶片表达的凝集素可以使健康公鸡的红细胞凝集,初步证明表达的GNA具有正常的生物学活性。 展开更多
关键词 雪花莲凝集素 gna基因 PCR
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GNA11基因多态性与特发性甲状旁腺功能减退症及其并发症的关联 被引量:1
16
作者 全婷婷 聂敏 +5 位作者 王亚冰 姜艳 李梅 夏维波 王鸥 邢小平 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第2期145-152,共8页
目的探索GNA11基因多态性与特发性甲状旁腺功能减退症(简称特发甲旁减)发病风险及慢性并发症发生的关联性。方法纳入1987-2015年就诊于北京协和医院门诊的203例特发甲旁减为病例组,年龄、性别匹配的209名健康人员为对照。使用Mass Array... 目的探索GNA11基因多态性与特发性甲状旁腺功能减退症(简称特发甲旁减)发病风险及慢性并发症发生的关联性。方法纳入1987-2015年就诊于北京协和医院门诊的203例特发甲旁减为病例组,年龄、性别匹配的209名健康人员为对照。使用Mass Array i PLEX平台进行基因多态性分型。结果 rs308060位点少见等位基因(T)在加性模型[OR=2.505(1.005~6.245),P<0.05;OR=3.269(1.264~8.458),P<0.05]、隐性模型[OR=2.727(1.105~6.727),P<0.05]中可增加特发甲旁减发病风险,携带此等位基因的单体型亦会增加发病风险。携带各位点不同基因型或不同数目的单体型患者间颅内钙化及白内障的发生率无差异,但由rs308060位点T等位基因组成的单体型CTCGCT与患者治疗后24 h尿钙排泄相关(β=0.186,P<0.05)。结论 GNA11基因的rs308060位点少见基因T可能会增加特发甲旁减的发病风险,并且与患者接受钙剂及维生素D制剂治疗后的尿钙排泄水平呈正相关。 展开更多
关键词 gna11 基因多态性 特发性甲状旁腺功能减退症 并发症
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GNAQ/GNA 11突变在葡萄膜黑色素瘤中的研究进展 被引量:1
17
作者 郑磊(综述) 张国明(审校) 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期791-795,共5页
葡萄膜黑色素瘤(UM)是成人眼内常见的原发性恶性肿瘤,不仅影响患者的视功能,还易导致死亡。虽然近30年涌现了许多UM的局部治疗方法,但患者的生存率一直未得到改善,主要原因是对于UM的发病机制所知甚少。GNAQ和GNA 11基因负责编码... 葡萄膜黑色素瘤(UM)是成人眼内常见的原发性恶性肿瘤,不仅影响患者的视功能,还易导致死亡。虽然近30年涌现了许多UM的局部治疗方法,但患者的生存率一直未得到改善,主要原因是对于UM的发病机制所知甚少。GNAQ和GNA 11基因负责编码G蛋白α亚基q族多肽,许多研究表明这2种基因在UM中具有很高的突变率,可能驱动UM的早期生长。本文就GNAQ和GNA 11突变后的功能学改变,以及基因突变所致UM恶性增生相关的信号通路展开综述,以期为UM的早期筛查和靶向药物研究提供参考。 展开更多
关键词 葡萄膜黑色素瘤 gnaQ基因 gna 11基因 基因突变
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转雪花莲凝集素酶基因枸杞对蚜虫的抑制作用 被引量:1
18
作者 罗青 巫鹏举 +3 位作者 李晓莺 贝盏临 曲玲 曹有龙 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期65-67,共3页
利用农杆菌介导法将雪花莲外源凝集素酶基因导入枸杞叶片,获得了完整的转基因植株。对36个经PCR检测为阳性的转基因株系进行了两年抗蚜虫筛选试验,结果表明:蚜口密度抑制率在13.19%-95.4%,平均蚜口密度抑制率为78.59%。
关键词 枸杞 雪花莲外源凝集素酶基因 转化 蚜虫 抑制
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陆地棉体细胞胚胎的发生和遗传转化条件初探
19
作者 苟萍 计巧灵 +1 位作者 李冠 马东建 《新疆大学学报(自然科学版)》 CAS 2002年第3期324-329,共6页
以陆地棉 (冀棉 2 0 )下胚轴为外植体 ,在含 KT0 .3 mg/ L和 2 ,4-D0 .0 8mg/ L的 MS培养基上 ,诱导产生了胚性愈伤组织 .继代培养不需要添加激素 ,胚性愈伤组织即可分化为胚状体 ,并萌发出小芽 .胚状体萌发过程与合子胚相似 ,但出现了... 以陆地棉 (冀棉 2 0 )下胚轴为外植体 ,在含 KT0 .3 mg/ L和 2 ,4-D0 .0 8mg/ L的 MS培养基上 ,诱导产生了胚性愈伤组织 .继代培养不需要添加激素 ,胚性愈伤组织即可分化为胚状体 ,并萌发出小芽 .胚状体萌发过程与合子胚相似 ,但出现了一些畸形胚 .解剖学方法观察发现 ,这些畸形胚的维管束系统不明显或形态异常 .以农杆菌介导法对冀棉 2 0胚状体及胚性愈伤组织进行了雪花莲凝集素 (GNA)基因的遗传转化条件探索 ,并以GUS基域瞬间表达检测加以证实 ,得出农杆菌的浓度为 O.D60 0 =0 .8时 ,浸染时间为 5 min,共培养时间为 3d,筛选培养基中卡那霉素浓度为 75 mg/ L,对冀棉 2 0胚状体及胚性愈伤组织转化是较为合适的 . 展开更多
关键词 体细胞 陆地棉 胚状体 gna基因 遗传转化 GUS基因 胚性愈合组织 胚胎发生
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精神分裂症易感基因GNA13功能的初步分析
20
作者 罗艺苹 刘可智 +3 位作者 喻明兰 梁雪梅 张涛 向波 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期545-551,共7页
目的初步分析G蛋白α亚基13(GNA13)基因在精神分裂症中的作用,探索精神分裂症发病机制的相关生物通路。方法用出生24 h内的C57BL6N野生型幼鼠进行大脑皮层原代神经元细胞培养,使用重组病毒感染并敲低实验组的Gna13基因,空载病毒感染空... 目的初步分析G蛋白α亚基13(GNA13)基因在精神分裂症中的作用,探索精神分裂症发病机制的相关生物通路。方法用出生24 h内的C57BL6N野生型幼鼠进行大脑皮层原代神经元细胞培养,使用重组病毒感染并敲低实验组的Gna13基因,空载病毒感染空载对照组,对照组不做任何干预,在同等条件下继续培养。3组均进行蛋白和mRNA表达水平测定,用高通量测序技术检测其mRNA表达谱,并进行Phenotype表型富集、Kyoto encyclopedia of gene and genomes(KEGG)通路富集、gene ontology(GO)功能富集分析。结果与对照组相比,实验组中存在差异性表达的基因共211个(P<0.05,FDR校正),其中表达上调基因141个,表达下调基因70个。表达下调基因主要与异常有丝分裂、脑形态异常、产前发育迟缓等表型相关,与细胞代谢、细胞周期的催化调节、细胞蛋白质定位等生物过程相关,与细胞周期、代谢途径以及肌动蛋白细胞骨架的调节和粘附力等生物通路相关。结论 GNA13基因可能通过影响神经细胞形态和突触可塑性构成,参与精神分裂症的发生发展。 展开更多
关键词 精神分裂症 gna13 基因 高通量核苷酸测序 基因表达
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